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抗體緩沖液中的透析法

2023-12-25 閱讀(155)

取長度適中的分子截留量為一萬的透析膜,,先用50%乙醇煮沸1小時,再依次用50%乙醇,、0.01 mol/L碳酸氫鈉和0.001 mol/L EDTA溶液洗滌,,最后用蒸餾水沖洗即可使用,。實驗證明,50%乙醇處理對除去具有紫外吸收的雜質(zhì)特別有效,。使用后的透析袋洗凈后可存于4℃蒸餾水中,若長時間不用,,可加少量NaN2,以防長菌,。洗凈涼干的透析袋彎折時易裂口,,用時必須仔細(xì)檢查,,不漏時方可重復(fù)使用。
新透析袋如不作如上的特殊處理,,則可用沸水煮五至十分鐘,再用蒸餾水洗凈,,即可使用,。使用時,一端用橡皮筋或線繩扎緊,,也可以使用特制的透析袋夾夾緊,由另一端灌滿水,,用手指稍加壓,檢查不漏,,方可裝入待透析液,通常要留三分之一至一半的空間,,以防透析過程中,,透析的小分子量較大時,,袋外的水和緩沖液過量進(jìn)入袋內(nèi)將袋漲破。含鹽量很高的蛋白質(zhì)溶液透析過夜時,,體積增加50%是正常的。為了加快透析速度,,除多次更換透析液外,還可使用磁子攪拌,。透析的容器要大一些,,可以使用大燒杯,、大量筒和塑料桶。小量體積溶液的透析,,可在袋內(nèi)放一截兩頭燒園的玻璃棒或兩端封口的玻璃管,以使透析袋沉入液面以下,。
注意:透析液一般為所透析物體積的10倍。
4度,,磁子攪拌
7-8小時更換一次,,更換三次即可




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