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上海吉至生化科技有限公司
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2023-4-11 閱讀(310)
1.瓊脂平板的制備可以根據(jù)需要選擇大玻璃平板和小玻璃載玻片,。大玻璃板需要約10毫升的瓊脂，小玻璃片需要約3.5毫升,。固化后打孔。該方法與瓊脂擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)相同,。
2.添加樣品：在左孔中添加患者血清（原始血清和10倍稀釋血清各占據(jù)一個(gè)孔）,，在右側(cè)添加抗血清，每片均應(yīng)有陽性對(duì)照,。
3.電泳操作流程：在電泳槽高度的三分之二處添加0.05mPH8.6Barbita酸鹽緩沖液,。請(qǐng)注意，兩個(gè)水箱中的液位盡可能高,。將帶有樣品的玻璃板放在電泳槽上,，將抗原端連接到負(fù)極，將抗體端連接到正極過濾紙浸濕后作為鹽橋,，過濾紙與瓊脂板連接,，其長度為0.5厘米。以板寬度計(jì)算電流,，以板的長度計(jì)算電壓,。要求電流量為2毫安/厘米，即大板為20毫安,，小板為10毫安,。電壓為5伏/厘米。通電2小時(shí)后觀察結(jié)果,。
4.對(duì)流免疫電泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果觀察：在黑色背景上方,，用多個(gè)角度的散射光觀察。兩口井之間有一條白色的沉淀線,，這意味著陽性對(duì)照應(yīng)該有一條清晰的白色沉淀線,。如果是抗原，則兩極微沉淀?xiàng)l不清楚,，將其在37°C下放置數(shù)小時(shí)可增強(qiáng)沉淀?xiàng)l的清晰度,。
