 |
上海吉至生化科技有限公司
主營產(chǎn)品： 潮霉素b,DTT二硫蘇糖醇,Albumin BovineⅤ 牛血清白蛋白Ⅴ,Zeocin 博萊霉素 1.25ml -20℃ （125mg）,IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷 進(jìn)口 100g |
8
聯(lián)系電話
|
上海吉至生化科技有限公司
主營產(chǎn)品： 潮霉素b,DTT二硫蘇糖醇,Albumin BovineⅤ 牛血清白蛋白Ⅴ,Zeocin 博萊霉素 1.25ml -20℃ （125mg）,IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷 進(jìn)口 100g |
聯(lián)系電話
2023-3-24 閱讀(456)
1.細(xì)菌繁殖：LB培養(yǎng)基，2ml / 20ml,，37℃,，200rpm，搖動過夜,；
2.離心10分鐘,，轉(zhuǎn)速為5000 rpm，4°C,；丟棄液體,；
3.用預(yù)冷的TES緩沖液洗滌沉淀物（細(xì)胞），在4°C下以10 rpm,，5 000 rpm離心10分鐘,，加入預(yù)冷的1 ml溶液I，并冰浴10分鐘,；
4.重懸,，加入150ul溶菌酶母液，在室溫下靜置5分鐘,；
5.添加1.2ml的溶液II并在冰浴上保持5分鐘,；
6.加入0.9 ml預(yù)冷的乙酸鉀，混合均勻,，在4°C下以12 000 rpm離心10分鐘,；
7.加入1.5 ml異丙醇，并將其放在-20°C的冰箱中放置15分鐘；
8.在4°C下以12 000 rpm離心10分鐘,；
9.取沉淀并將其懸浮在400 ul TE緩沖液中,；
10.添加40ul 3M NaAc；
11.phenol/Trichloromethane,，萃取,，乙醇沉淀；
12.在4°C下以12 000 rpm離心10分鐘,；
13.取出沉淀物,，將其冷凍干燥，然后重懸于50ul TE緩沖液中,；
14.電泳檢測提取的DNA的質(zhì)量,。
