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2021-11-2 閱讀(2660)
堿性磷酸酶是廣泛分布于人體肝臟,、骨骼、腸,、腎和胎盤(pán)等組織經(jīng)肝臟向膽外排出的一種酶,，是免疫診斷試劑中常用的生物標(biāo)志物，也是重要的治療靶點(diǎn)。檢測(cè)堿性磷酸酶可用于肝臟功能異常,，骨質(zhì)疏松和糖尿病等疾病的診斷,。常見(jiàn)的堿性磷酸酶底物有PNPP、BCIP/NBT組合,。
PNPP：中文名稱為對(duì)硝基苯磷酸二鈉,廣泛用作ELisa檢測(cè)堿性磷酸酶的底物,。原理是，堿性溶液中無(wú)色的對(duì)硝基苯磷酸二鈉（PNPP）可被堿性磷酸酶催化分解出磷酸?；?，磷酸酰基與受體物結(jié)合,，生成游離的對(duì)硝基苯酚,，對(duì)硝基苯酚在堿性溶液中轉(zhuǎn)變?yōu)轷浇Y(jié)構(gòu)，呈現(xiàn)較深的黃色,，即水溶性黃色產(chǎn)物。在波長(zhǎng)405nm處檢測(cè)吸光度增高速率,，則可檢測(cè)堿性磷酸酶,。
對(duì)硝基苯磷酸二鈉（PNPP）還用于農(nóng)藥殘留檢測(cè)、古文物膠原蛋白檢測(cè)等,，也是醫(yī)藥,、農(nóng)藥合成領(lǐng)域的重要化工中間體。
BCIP/NBT：是堿性磷酸酶的發(fā)光底物組合,，其原理是在堿性磷酸酯酶的催化下,，BCIP會(huì)被水解產(chǎn)生強(qiáng)反應(yīng)性的產(chǎn)物，該產(chǎn)物會(huì)和NBT發(fā)生反應(yīng),，形成不溶性的深藍(lán)色至藍(lán)紫色的產(chǎn)物,，具有強(qiáng)特征性，易于捕捉分析,，從而達(dá)到標(biāo)記作用,。
BCIP，又稱對(duì)甲苯氨藍(lán),，除作為堿性磷酸酶化學(xué)組織底物應(yīng)用于生化研究,、醫(yī)藥領(lǐng)域外,，還用于食品安全檢測(cè)中,。
NBT,，即氯化硝基四氮唑藍(lán)，在免疫印跡實(shí)驗(yàn)中檢測(cè)堿性磷酸酶底物是其最常見(jiàn)的應(yīng)用,。此外，氯化硝基四氮唑蘭（NBT）還作為脫氫酶和其它過(guò)氧化酶的底物,，用于測(cè)定葡萄糖-6-磷酸脫氫酶,、乳酸脫氫酶、超氧化物歧化酶等,。
