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培養(yǎng)基常用的滅菌方法

2020-10-13 閱讀(4714)

高壓蒸汽滅菌:

高壓蒸汽滅菌適合于耐高溫培養(yǎng)基,、接種器械和蒸餾水的滅菌。培養(yǎng)基在愛制備過程中混入各種雜菌,,分裝后應(yīng)立即滅菌,,至少應(yīng)在24h內(nèi)完成滅菌工作。滅菌時一般是在0.105MPa壓力下,,溫度121℃時,,滅菌15~30min即可。消毒時間不宜過長,,也不能超過規(guī)定的壓力范圍,,否則有機(jī)物質(zhì)特別是維生素類物質(zhì)就會在高溫下分解,失去營養(yǎng)作用,,也會使培養(yǎng)基變質(zhì),、變色,甚至難以凝固,。

將蒸餾水或自來水裝在三角瓶中,,裝水量一般不超過瓶的2/3,用牛皮紙或硫酸紙包扎封口,,然后放入高壓鍋中滅菌后即為無菌水,。 滅菌后的培養(yǎng)基可放到培養(yǎng)室中預(yù)培養(yǎng)3d,若無污染現(xiàn)象,,則證明滅菌是*的,,可以使用。暫時不用的培養(yǎng)基較好置于10℃下保存,。含IAA或GA3的培養(yǎng)基應(yīng)在1周內(nèi)用完,,其他培養(yǎng)基多也不要超過1個月。

過濾滅菌:

一些植物生長調(diào)節(jié)劑及有機(jī)物,,如IAA,、GA3、ZT,、CM等,,遇熱容易分解,不能與培養(yǎng)基一起進(jìn)行高溫滅菌,,而要使用細(xì)菌過濾器濾去其中的雜菌,。細(xì)菌過濾器與濾膜(孔徑0.45微米)使用之前要先進(jìn)行高壓滅菌,。過濾后的溶液要立即加入培養(yǎng)基中,若為液體培養(yǎng)基,,可在培養(yǎng)基冷卻至30℃時加入,;若為固體培養(yǎng)基,必須在培養(yǎng)基凝固之前(50-60℃)加入,,振蕩使溶液與其他成分混合均勻,。



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