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上海吉至生化科技有限公司

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牛血清的儲存以及蛋白提取

2019-1-4 閱讀(3655)

血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,。血清中含有各種血漿蛋白、多肽,、脂肪,、碳水化合物、生長因子,、激素,、無機物等。

胎牛血清應(yīng)取自剖腹產(chǎn)的胎牛,;新牛血清取自出生24小時之內(nèi)的新生牛,;小牛血清取自出生10-30天的小牛。因為胎牛還未接觸外界,,血清中所含的抗體,、補體等對細胞有害的成分少,所以胎牛血清是品質(zhì)高的,。

儲存條件:

血清一般儲存于-20℃,,同時應(yīng)避免反復(fù)凍融。購買大包裝的血清后,,先要滅活處理,,然后分裝成小包裝,儲存于-20℃,使用前融化,。融化時置于4℃,。融化后的血清在4℃不宜長時間存放,應(yīng)盡快使用,。

牛血清蛋白熱乙醇法提取工藝:

1,、分離血漿、取新鮮牛血放入制冷功能離心機中,,加入血量的10%的濃度為3.8%的枸櫞酸鈉,、離心溫度2°C以下,分離血漿,、血球,、收集血漿、血球另用,。

2,、將血漿放入夾層反應(yīng)罐內(nèi)、夾層內(nèi)加熱水,,邊加熱水邊加入牛血清容積的0.2-0.3%的辛酸鈉,、緩慢攪拌、溫度在55°C-65°C,溶解后調(diào)PH值,、加入濃度為1摩爾的鹽酸,、將PH調(diào)4.6.5然后加入血清總量的5.5%的濃度為95%的乙醇、過濾濾渣去掉,。

3、脫鹽和濃縮,、將濾液用20000分子量以下的超濾器洗脫鹽類及其它小分子雜志同時進行濃縮,。

4、凍干,、將濃縮液按凍干即將濃縮液迅速冷凍-40°C,、持續(xù)1小時左右,升到-25°C,、持續(xù)10-20小時再緩慢升溫到0°C再持續(xù)1-4小時升溫保存溫度20°C為成品,。

 



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