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微生物致病菌檢測儀-溶藻性弧菌檢測試劑盒操作說明書
閱讀：2126 發(fā)布時間：2022-6-10微生物致病菌檢測儀-溶藻性弧菌檢測試劑盒操作說明書
溶藻性弧菌快速檢測試劑盒是基于公司科研團隊諸多創(chuàng)新性成果,，針對快速檢測需求，實現(xiàn)在恒定溫度條件下的快速檢測,，通過配套機器微生物致病菌檢測儀快速判讀結果,。
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【預期用途】
溶藻性弧菌檢測試劑盒可用于溶藻性弧菌快速檢測和篩查。
【產(chǎn)品特點】
1. 反應速度快,，僅需 60 min,。
2. 操作簡單，快速判讀,。
3. 靈敏度高,，本試劑盒檢測限為10CFU/mL。
4. 特異性高,，*的多重體系降低假陽性的出現(xiàn),。
【試劑組成】
序號 名稱 規(guī)格 數(shù)量/支
1 試劑預混液（深色遮光管） 750μL 1
2 生物酶（黃蓋管） 100μL 1
3 封閉劑（透明蓋管） 300μL 1
4 陽性對照（紅蓋管） 100 μL 1
5 快速釋放劑（10毫升保存管） 3ml 1
【實驗需要的器材】
微生物致病菌檢測儀、0.45μm濾膜,、擦拭拭子,、渦旋振蕩器、離心機,、2-20μL移液器、20-200μl 移液器,、1.5ml離心管,、96孔板、200ul 反應管,。
【實驗前準備】
1,、將微生物致病菌檢測儀通電并開機,；將渦旋振蕩器、離心機通電等待使用,；
2,、將微生物快速釋放劑、試劑預混液,、生物酶,、封閉劑、陽性對照從冰箱取出恢復至室溫,。試劑預混液自然解凍后渦旋混勻,，瞬時離心待用。
3,、取出1.5ml離心管若干只,，200ul離心管、96孔板冰盒,，0.45μm濾膜若干,。
【樣品前處理】
實驗器具必須潔凈并使用一次性吸頭（每次取試劑前及時更換新的吸頭），以避免污染干擾實驗結果?。,。?/span>
1,、采樣
水樣本每次采樣量為250ml,；固體樣本使用拭子在樣本表面及可疑感染處進行擦拭，擦拭前拭子可用純水進行蘸濕處理,。
2,、水樣本過濾
將上述樣本用孔徑為0.45μm的濾膜進行過濾，將水樣中的微生物截留在濾膜上,。
3,、微生物釋放
取下濾膜，將濾膜加入到1.5ml離心管中,，離心管中加入150-200μL快速釋放劑,，渦旋震蕩混勻，100℃條件下熱浴5分鐘,；固體樣本擦拭完成后將拭子頭投入1.5ml離心管中,，離心管中加入150-200μl快速釋放劑，渦旋震蕩混勻,，100℃條件下熱浴5分鐘,；熱浴完成后離心管內液體即為待檢測樣本。注：煮沸5分鐘時，離心管應封閉完整,，防止崩開,。
【實驗步驟】
1、取 n 個反應管（n=樣本數(shù)+陽性對照1+陰性對照1）,，單個反應體系配制如下：
試劑 體系配制
試劑預混液（深色遮光管） 44×（n+1）μL
生物酶 （黃蓋管） 2.5×（n+1）μL
2,、用移液器在一個新的 1.5 mL 離心管中加入上述試劑，渦旋混勻后瞬時離心,。在每個反應管中加入46μl混勻后的試劑,，加入約10μl封閉劑（透明蓋管）進入反應管中。
3,、在上述n個反應管中,，用移液器在一個反應管中加入陰性對照（純水即可）4μl，更換吸頭后在下一反應管加入陽性對照（紅蓋管）4μl,，再次更換吸頭后在下一反應管中加入待檢樣本4μl,，每次加樣均需更換吸頭。每管所得反應總體積為50μl,，加樣時吸頭需穿過封閉劑將模板加至反應管底部,。蓋緊管蓋，瞬時離心,。（吸取及加樣時注意不要產(chǎn)生明顯氣泡）,；
4、將準備好的反應管,，放置到檢測設備中,，按照檢測程序63℃檢測60min。
5,、將檢測管放入儀器后,，點擊調零，點擊檢測,，開始檢測,。反應結束后，機器自動判讀,，給出陽性或陰性結果,，同時可點擊頁面上“圖譜"可觀察各孔光強變化曲線，對給出的結果進行驗證,。實驗結果在陽性對照顯示“陽",，陰性對照顯示“陰"的情況下為有效實驗。顯示“陽"即該孔位樣本含有該病菌,，顯示為“陰"即該孔位樣本不含該病菌,，并同時給出相應定量,。若陰、陽性對照反應管結果與上述情況不符,，則本次檢測結果無效，應重新檢測或與產(chǎn)品公司聯(lián)系,。
【注意事項及安全提示】
1. 使用本試劑盒前請仔細閱讀說明書,。不同批號的產(chǎn)品請勿混合使用，避免反復凍融,，請在有效期內使用試劑盒,，由于操作不當引起的誤判，以及有此誤判引發(fā)的其他事項,，本公司概不負責,。
2. 檢測空間應嚴格分區(qū)操作，在空間條件允許情況下,，試劑配置區(qū)用于配置反應所需要的所有試劑,；樣品前處理區(qū)用于待測樣品的處理及加樣；擴增觀察區(qū)用于反應進行和結果判讀,。各區(qū)內空間獨立,，試驗用品專用，避免交叉污染,。另外,，樣品處理區(qū)建議配備超凈工作臺，所有步驟嚴格按照說明書的要求進行,。
3.加樣時應盡量避免產(chǎn)生氣泡,，反應前注意觀察反應管是否蓋緊，以免泄露,，造成污染,。實驗中所使用的離心管、吸頭應保證無菌,、無污染,。試劑盒內陽性對照應視為具有污染性物質，應避免污染其它樣本和反應試劑,，導致錯誤檢測結果,。
4. 檢測過程中建議穿潔凈工作服，帶一次性手套,，使用的槍頭需提前滅菌,。
5. 陽性對照可能會作為污染源，污染其他試劑和待檢樣品,，導致出現(xiàn)假陽性結果,，在加樣過程中建議最后加入陽性對照。
6. 上機前注意檢查反應管是否蓋緊，以免泄漏污染儀器,。在反應結束后切忌開蓋,，以防氣溶膠污染。
7. 試劑盒使用完畢廢棄時按照廢棄物相關規(guī)定處理,，由使用者自行負責處理,。
8. 工作臺及各物品定期用 1%次氯酸鈉、75%酒精或紫外燈處理,。
【貯存方法及有效期】
1,、本品應貯存在溫度-20℃范圍內
2、有效期6個月
3,、生產(chǎn)日期見盒裝標簽