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時(shí)間分辨熒光小麥黃曲霉毒素含量檢測方案
閱讀：845 發(fā)布時(shí)間：2021-5-31方案檢測原理：應(yīng)用時(shí)間分辨熒光競爭抑制免疫層析的原理，當(dāng)將樣品滴加在加樣區(qū)時(shí),，樣品中的待測物與結(jié)合墊中的熒光微球標(biāo)記抗體結(jié)合并通過毛細(xì)作用向前層析,，當(dāng)達(dá)到檢測區(qū)后，檢測線 T 線上固定的抗原與剩余的部分熒光微球標(biāo)記抗體結(jié)合,，檢測線 T 線上結(jié)合的熒光微球標(biāo)記抗體的量與樣品中待測物的量成反比,，質(zhì)控線 C 線結(jié)合的熒光標(biāo)記物樣品中待測物的量無關(guān)，其它熒光標(biāo)記物繼續(xù)層析達(dá)到吸收區(qū),。層析結(jié)束后,，用CSY-YG701讀取 T 線和 C 線的熒光強(qiáng)度并計(jì)算 T/C 值，通過儀器內(nèi)置的標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計(jì)算出樣品中待測物的含量,。
方案介紹：小麥中黃曲霉毒素含量快速定量檢測方案選用CSY-YG701黃曲霉毒素?zé)晒舛繖z測儀（深圳市芬析儀器制造有限公司）,、電子天平、離心機(jī),、粉粹機(jī),、渦旋振蕩器檢測設(shè)備,，該方法操作簡單，結(jié)果準(zhǔn)確,，整體測試時(shí)間20分鐘左右,。
一、實(shí)驗(yàn)所需器皿準(zhǔn)備
1,、CSY-YG701黃曲霉毒素?zé)晒舛繖z測儀（深圳市芬析儀器制造有限公司）
2,、電子天平（國產(chǎn)）
3、離心機(jī)（國產(chǎn)）
3,、粉粹機(jī)（國產(chǎn)）
4,、渦旋振蕩器（國產(chǎn)）
5、可調(diào)移液器1000-5000ul 可調(diào)移液器 20-200ul（國產(chǎn)）
二,、樣品前處理
1,、準(zhǔn)確稱取2.0g粉碎均勻的小麥樣本，放入50ml離心管或者錐形瓶中,，加入10ml樣品提取液,，用旋渦振蕩器震蕩3分鐘混勻，混勻后即為樣品液,。
2,、混勻后，取1.5ml均勻的樣品液在離心管,，并在3500轉(zhuǎn)以上離心5分鐘,。
3、取離心液上清液200ul+1000ul樣品提取液震蕩5秒混勻即為待測液,。
三,、樣品檢測
1、開始檢測：取60ul待測液+60ul熒光標(biāo)記物,放入新的離心管中,，把移液器刻度調(diào)至90ul,，然后在離心管中吸吐3次液體（避免氣泡出現(xiàn)），混勻之后取90ul滴入檢測卡內(nèi)（本步驟應(yīng)該在30s內(nèi)完成）,，滴入完成之后,，立即將檢測卡放入恒溫孵育器內(nèi)孵育8分鐘后進(jìn)行檢測。
