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嘔吐毒素的檢測(cè)方法與作用機(jī)制
閱讀：3252 發(fā)布時(shí)間：2018-7-9脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(deoxynivalenol，DON)又稱(chēng)嘔吐毒素(vomitoxin),，主要是由鐮刀菌的某些種產(chǎn)生的化學(xué)結(jié)構(gòu)和生物活性相似的有毒代謝產(chǎn)物——單端孢霉烯族化合物中的一種,。
DON的主要產(chǎn)生菌是禾谷鐮刀菌(Fusariumgraminearum)，據(jù)報(bào)道也有其它一些鐮刀菌可產(chǎn)生 ,。DON于1972年由日本的Morooka等分離,，同年，Yoshizawa等闡明了這種新的真菌毒素的結(jié)構(gòu),，并將其命名為4-deoxynivalenol(DON) ,。
DON廣泛存在于，主要污染小麥,、大麥,、玉米等谷類(lèi)作物，也污染糧食制品,，人和動(dòng)物在誤食被該毒素污染的糧谷類(lèi)后可以產(chǎn)生廣泛的毒性效應(yīng),。另外，它還常與其它的霉鹵毒素如黃曲mei毒素共同污染農(nóng)作物,，進(jìn)入人體后可以相互影響,。近年來(lái)發(fā)現(xiàn)DON可能與人類(lèi)食管癌、IGA腎bing有關(guān),，對(duì)人類(lèi)及動(dòng)物的健康構(gòu)成威脅,。DON屬于劇毒或中等毒物，研究表明,，DON在體內(nèi)可能有一定的蓄積,，但無(wú)特殊的靶器官，具有很強(qiáng)的細(xì)胞毒性,。人畜攝入了被DON污染的食物／飼料后,，會(huì)導(dǎo)致厭食、嘔吐,、腹瀉,、發(fā)燒、站立不穩(wěn),、反應(yīng)遲鈍等急性中毒癥狀,，嚴(yán)重時(shí)損害造血系統(tǒng)造成死亡，但不同的動(dòng)物對(duì)DON的敏感程度不一，豬是敏感的動(dòng)物,。研究表明,，DON可能對(duì)免疫系統(tǒng)有影響，有明顯胚胎毒性和一定致畸作用,，可能有遺傳毒性,，但無(wú)致癌、致突變作用,。由于DON的危害嚴(yán)重,，引起了各國(guó)的普遍重視。
有調(diào)查顯示：
中國(guó)飼料和原料霉菌毒素污染超標(biāo)的比例為60%—70%,，其中嘔吐毒素的超標(biāo)比例接近70%,，被檢的玉米、麩皮和DDGS樣品中嘔吐毒素的檢出率均高達(dá)90%以上,，分別為92.9%,、92.3%和100%。
豆粕的檢出率較低為54.5%,。
麩皮和豆粕中嘔吐毒素未見(jiàn)超標(biāo),，其平均含量為0.44mg/kg和0.05mg/kg，屬于輕度污染,。
玉米嘔吐毒素的超標(biāo)率為57.1%,，毒素平均含量為1.01mg/kg，其中*含量為2.13mg/kg,，屬于中度污染,。
DDGS中嘔吐毒素的超標(biāo)率為88.2%，毒素平均含量為1.36mg/kg,，低含量為0.85mg/kg,，*含量為1.72mg/kg，屬于中度污染,。
玉米和DDGS中嘔吐毒素的平均含量極顯著高于麩皮和豆粕（P＜0.01）,，DDGS中嘔吐毒素的平均含量顯著高于玉米（P＜0.05），麩皮中嘔吐毒素的平局你含量極顯著高于豆粕（P＜0.01）,。
被檢配合飼料中嘔吐毒素的檢出率為97.4%,，仔豬料、中豬料,、妊娠母豬料和哺乳母豬料的檢出率高達(dá)100%,。
其中，乳豬料嘔吐毒素未見(jiàn)超標(biāo),，其平均含量為0.28mg/kg,，顯著低于其他種類(lèi)全價(jià)料（P＜0.05）,，屬于輕度污染。仔豬料,、中豬料、大豬料,、妊娠豬料和哺乳豬料均有不同程度的超標(biāo),，超標(biāo)率為14.3%、14.3%,、22.2%,、10.0%和23.1%，其*含量分別為2.31,、1.14,、1.44、1.45mg/kg和1.52mg/kg,，屬于中度污染,。
“嘔吐毒素”不怕高溫126℃下加熱90分鐘仍有毒性。
蠟樣芽孢桿菌是一種在顯微鏡下看起來(lái)形狀像蠟一樣的革蘭染色陽(yáng)性桿菌,，在自然界廣泛存在,，是引起食物中毒的常見(jiàn)細(xì)菌，與臭名昭著的炭疽桿菌是“同族兄弟”,。
蠟樣芽孢桿菌很狡猾,，在生長(zhǎng)條件不好的情況下會(huì)產(chǎn)生一種被稱(chēng)為“芽孢”的“外殼”，把自己保護(hù)起來(lái),，避免死亡,。因此，蠟樣芽孢桿菌比其它細(xì)菌更耐熱,，常常在加熱的條件下也不會(huì)死亡,。
上世紀(jì)70年代以前，人們并未注意到蠟樣芽孢桿菌對(duì)人類(lèi)健康的影響,，以為只是一種自然界常見(jiàn)的非致病菌,。但實(shí)際上，早在1937年就有人從病人的血液中分離到了這種細(xì)菌,；上世紀(jì)50年代,，挪威醫(yī)生首先報(bào)告了蠟樣芽孢桿菌引起的4起食物中毒事件，涉及600多人,。后來(lái),，英國(guó)、日本,、印度,、澳大利亞,、美國(guó)等地相繼發(fā)現(xiàn)蠟樣芽孢桿菌引起的食物中毒，我國(guó)于1973年報(bào)道蠟樣芽孢桿菌相關(guān)病例,。近年來(lái),，蠟樣芽孢桿菌引起的食物中毒事件逐漸增多。據(jù)統(tǒng)計(jì),，1986年-2007年僅在我國(guó)文獻(xiàn)報(bào)道中的蠟樣芽孢桿菌食物中毒事件就有299起,，甚至有導(dǎo)致死亡的病例發(fā)生。
“米”家族易被盯上
蠟樣芽孢桿菌釋放何種毒素與細(xì)菌的類(lèi)型和生長(zhǎng)環(huán)境有關(guān),。有研究證實(shí),，血清1型蠟樣芽孢桿菌容易釋放嘔吐毒素；在米飯等淀粉類(lèi)食物中,，蠟樣芽孢桿菌容易產(chǎn)生嘔吐毒素,，而在肉類(lèi)等其它食品中，嘔吐毒素產(chǎn)生較少,，而腸毒素增多,。
一般來(lái)說(shuō)，壞了的食品總是有異味,，大家聞一聞就知道能不能吃,，但蠟樣芽孢桿菌“放毒”特別隱蔽，含有毒素的食品大多無(wú)腐*,、變質(zhì)現(xiàn)象,，進(jìn)食時(shí)不易被人們察覺(jué)。蠟樣芽孢桿菌食物中毒主要發(fā)生在夏季,，在我國(guó)主要發(fā)生在6-9月,。食物中毒的臨床表現(xiàn)有兩種類(lèi)型：嘔吐型和腹瀉型。我國(guó)以嘔吐型多見(jiàn),，約占蠟樣芽孢桿菌食物中毒的76%,，而歐美等西方國(guó)家以腹瀉型多見(jiàn)。這可能與我國(guó)的飲食結(jié)構(gòu)有關(guān),。
嘔吐型的蠟樣芽孢桿菌食物中毒潛伏期短,，一般在進(jìn)食后0.5-6小時(shí)發(fā)生，主要表現(xiàn)為惡心,、嘔吐,，伴有乏力、低熱等癥狀,，很少出現(xiàn)腹瀉,。大多數(shù)病情較輕，24小時(shí)內(nèi)可以自愈,，但嚴(yán)重的可能引起肝衰竭,、代謝性酸中毒,、心肌或中樞神經(jīng)系統(tǒng)損害，甚至導(dǎo)致死亡,。引起嘔吐型食物中毒的主要食品是米飯及其制品(80%以上),，如：米飯、炒飯,、稀飯,、米糕、米粉皮,、米線(xiàn)等；涼面,、豆腐也可以引發(fā),。
腹瀉型食物中毒較少見(jiàn)，中毒的原因是蠟樣芽孢桿菌腸毒素,。潛伏期較長(zhǎng),，一般在進(jìn)食后6-15小時(shí)發(fā)生，臨床表現(xiàn)主要是水樣腹瀉和腹痛,，很少伴有嘔吐癥狀,。大多數(shù)在腹瀉數(shù)次后癥狀逐漸減輕，1天左右好轉(zhuǎn),。嚴(yán)重者可引起電解質(zhì)紊亂,、出血性腹瀉。引起腹瀉型食物中毒的食品較復(fù)雜,，糧食,、肉類(lèi)、乳類(lèi)食品均可引發(fā),，其中盒飯類(lèi)混合食品較多見(jiàn),，可能是在分裝的過(guò)程中污染所致。
嘔吐毒素檢測(cè)方法：
1,、膠體金定性卡法：
是嘔吐毒素簡(jiǎn)便的檢測(cè)方法,，檢測(cè)不需要配套儀器，樣品處理簡(jiǎn)單,，五到十分鐘就可以看到檢測(cè)結(jié)果,。可以根據(jù)G,、T線(xiàn),，初步確定所測(cè)樣本毒素含量范圍，但不能給出具體數(shù)值,。價(jià)*低,、沒(méi)有國(guó)標(biāo)支持,，適合企業(yè)初檢使用。
2,、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法：
依據(jù)該方法開(kāi)發(fā)出來(lái)的嘔吐毒素檢測(cè)試劑盒,，可以半定量的檢測(cè)樣品中嘔吐毒素的含量，目前國(guó)產(chǎn)試劑盒大量上市,，價(jià)*適中,，有國(guó)標(biāo)支持，適合中小型企業(yè)質(zhì)量控制,，或者作為產(chǎn)品初步質(zhì)量控制,。
3、免疫親和柱為分離手段：用液相色譜儀作為檢測(cè)工具的分析方法,。該項(xiàng)技術(shù)靈敏度高,，測(cè)定范圍廣泛，采用單克隆免疫技術(shù),，可以性地將嘔吐毒素和其他真菌毒素分離出來(lái),，分離效率和回收率高，正確性和可靠性強(qiáng),，有國(guó)標(biāo)支持,。檢測(cè)成本高，儀器維護(hù)成本高,。一般作為檢測(cè)機(jī)構(gòu)終端判定方法,，也有大型企業(yè)作為產(chǎn)品質(zhì)量衛(wèi)生指標(biāo)控制方法。
4,、膠體金定量分析卡法：是深圳市芬析儀器制造有限公司推出的光譜掃描吸峰方法,，靈敏度高、結(jié)果可靠,，可以和親和柱方法相媲美,，檢測(cè)價(jià)*適中；有行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)支持,。適合中大型企業(yè)作為產(chǎn)品質(zhì)量衛(wèi)生指標(biāo)控制,。
5、液相或氣相串聯(lián)質(zhì)譜法：一般作為實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)方法,，主要作為研究或者國(guó)家部門(mén)對(duì)毒素情況監(jiān)測(cè),、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。
