每天用足夠的時間來維護色譜柱,，您將節(jié)省更多用于處理色譜柱故障的時間,，同時您的色譜柱的壽命也會變得更長,！色譜柱的使用壽命,，除了與所分析的樣品和流動相及使用頻率有關外,，主要的是與日常的維護密切相關。色譜柱的使用壽命主要是根據(jù)柱效和柱壓兩個指標來衡量,，如果一支色譜柱柱效太低或柱壓太高,，通常被認為該色譜柱的使用壽命已經(jīng)結束。因此,，延長色譜柱使用壽命的關鍵是,，消除引起柱效下降和柱壓升高的因素。通過以下幾點幫助您完成色譜柱的日常維護工作,。

流動相的pH 值

       由于硅膠基質的填料中存在Si-C和Si-O鍵,，流動相超過其pH范圍將會導致硅膠基質溶解和鍵合相碳鏈斷裂，使柱效下降,，壽命變短,。由于流動相的pH控制不當而對色譜柱造成的損害，通常很難使色譜柱恢復,，因此必須認真對待,，嚴格控制流動相的pH值。,。

去除樣品和流動相中的固體顆粒

       樣品和流動相中含有的固體顆粒物質會堵塞色譜柱篩板,，篩板被堵不僅會引起柱壓升高，而且也會引起柱效下降,，因為篩板的堵塞會引起液流不均,，導致色譜峰形拖尾、變寬,，甚至出現(xiàn)雙峰,，從而使柱效下降。因此,，建議使用超純水和色譜純試劑,，在分析前對樣品進行超聲、針筒過濾,，流動相過0.45µm 濾膜,，尤其是流動相加入了緩沖鹽（如NaH2PO4等），必須過濾,。

       博納艾杰爾為您提供了一系列高質量的過濾產(chǎn)品,，外殼采用聚丙烯材料，濾膜為意大利進口,。種類有：混合纖維素（MCM）,、尼龍（Nylon）、聚四氟乙烯（PTFE）,、聚偏氟乙烯（PVDF）,、 聚醚砜（PES）、增強型纖維素膜（Reg. Cellulose）,、玻璃纖維,、PP等,，常用規(guī)格為：直徑13mm、25mm,、33mm,；孔徑：0.45µm、0.22µm等,。

使用保護柱或在線過濾器

       樣品和流動相經(jīng)過濾后并不能*消除固體顆粒物質,，因為泵的磨損、密封圈和管路的老化也會產(chǎn)生固體顆粒物,，這些固體顆粒被流動相帶入色譜柱,，堵塞篩板，導致柱壓升高,、柱效下降,。保護柱和在線過濾器上都有篩板，其孔徑與色譜柱篩板孔徑相同,，因此可以阻止固體顆粒物質到達色譜柱,，有效防止色譜柱篩板的堵塞。由于柱壓升高在分析故障中占很大比例,，因此,，除對樣品和流動相進行過濾外，建議您在色譜柱進樣端加上保護柱或在線過濾器,。

正確使用緩沖鹽

       緩沖液可以提供離子平衡的反離子,，并使流動相保持一定的離子強度和p H 值，減少拖尾,。緩沖鹽通常易溶于水,，難溶于有機溶劑，因此緩沖鹽使用不當會致其析出,，堵塞填料基質上的微孔和顆粒間的空隙,，使填料板結，柱壓上升,；同時阻礙了基質上鍵合的碳鏈自由舒展,，使色譜柱的保留能力下降，柱效降低,。緩沖鹽析出后,，去除非常困難，因此,，正確的使用緩沖鹽對延長色譜柱使用壽命非常重要,。

       正確使用緩沖鹽的目的是防止緩沖鹽析出，因此正確使用緩沖鹽的方法可歸結為一句話：使用前要過渡,，使用后要沖洗,。

具體方法如下：

a . 等度條件：使用緩沖鹽前用過渡流動相以1.0mL/min   流速沖洗20-30倍柱體積,，然后再使用含有緩沖鹽的流動相；使用后去除緩沖鹽的方法是用過度流動相以1.0mL/min流速沖洗30倍柱體積,，然后以純有機溶液沖洗30倍柱體積保存,。

b .梯度條件：用含有緩沖鹽的流動相進行梯度洗脫之前，用與初始流動相組成相同的過渡流動相以1.0mL/min流速沖洗30倍柱體積,，再開始梯度的運行,；分析完成后,，再用過渡流動相以1.0mL/min沖洗色譜柱30倍柱體積,，然后以純有機溶液沖洗30倍柱體積保存。

另外,，在使用緩沖液的過程中還要注意以下幾點：

a .避免使用鹽酸鹽,，鹽酸鹽對鋼質有腐蝕作用；

b .緩沖液需現(xiàn)配現(xiàn)用,，往往緩沖液是良好的菌類培養(yǎng)液,，隔天或放置長時間實驗時會發(fā)生很多怪現(xiàn)象；

c .使用緩沖液要及時掌握pH范圍,，做到胸中有數(shù),；

d .清洗液路和柱子時，有溫控可加熱到30攝氏度易于沖洗,；

e.長時間用緩沖溶液要注意觀察接頭處有無析出,，若有白色鹽類析出，定期用10%硝酸沖洗液路（拆下柱子,，沖洗30mL10%硝酸溶液,，再用5倍水沖洗）可以避免液路的堵塞；

f.選擇緩沖液要用可靠的試劑,，避免不純的鹽類造成不必要的麻煩,；

過渡流動相是指有機相和水相的組成與分析流動相相同，但是不含緩沖鹽的溶液,。

防止強保留物質在色譜柱中存留

       強保留物質和大分子化合物在色譜柱中累積,，對樣品中的化合物產(chǎn)生額外的保留行為，不僅引起峰形變寬,、拖尾,，使柱效下降，同時也會引起保留時間的變化,，累積到一定程度時還會導致柱壓升高,。由于強保留物質和大分子化合物對色譜分離的影響是一個累積效應，需要一定的時間才會體現(xiàn)出來,，但對許多樣品特別是復雜樣品而言,，很難判斷其是否含有強保留物質,，因此要防止強保留物質的累積，需要在每天的日常維護中用純甲醇或乙腈30倍柱體積清洗色譜柱,。

色譜柱的再生

a,、反相柱

以下列溶劑順序沖洗30倍柱體積

乙腈－水（5:95） →    THF   →   乙腈－水（5:95）

b、正相柱

以下列溶劑順序沖洗30倍柱體積

正己烷   →  二氯甲烷  →  異丙醇   →  二氯甲烷  →  流動相

c,、硅膠柱（Si）除水

30mL 2.5% 2,2 二甲氧基丙烷和2.5%冰醋酸正己烷溶液沖洗柱子