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黃曲霉B1檢測(cè)卡 操作說(shuō)明
閱讀：2707 發(fā)布時(shí)間：2019-5-15
黃曲霉毒suB1（Aflatoxin B1簡(jiǎn)寫(xiě)為AFB1）是目前已知的化學(xué)物質(zhì)中致癌性zui強(qiáng)的一種。黃曲霉毒suB1對(duì)人和若干動(dòng)物具有強(qiáng)烈的毒性,，其毒性作用主要是對(duì)肝臟的損害,。國(guó)家質(zhì)檢總局規(guī)定黃曲霉B1是大部分食品的必檢項(xiàng)目之一,。本品的檢測(cè)靈敏度為5ng/ml。
【測(cè)定原理】
本品采用高度特異性的抗體抗原反應(yīng)及免疫層析分析技術(shù),，通過(guò)單克隆抗體競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合AFB1-BSA偶聯(lián)物和樣品中可能含有的AFB1的原理,。試劑含有被事先固定于膜上測(cè)試區(qū)（T）的AFB1-BSA偶聯(lián)物和被膠體金標(biāo)記的抗AFB1單克隆抗體。
【樣品制備】
使用儀器：①感量0.1g的天平 ②玻璃器皿：蒸發(fā)皿或燒杯,、量筒,、滴管、移液管 ③小型粉碎機(jī),、④ 4000rpm離心機(jī)等,。
1. 谷物：任取5g以上有代表性樣品并粉碎過(guò)20目篩，準(zhǔn)確稱(chēng)取2.0g均勻粉碎試樣于配套離心管中,，再準(zhǔn)確加入4ml純凈水和4.0ml乙酸乙酯,，將瓶塞蓋緊密封，充分振蕩5min,，4000rpm離心1min得上清液,，將上清液用吸管移出2.0ml到蒸發(fā)皿或小玻璃杯中，用電吹風(fēng)吹干上清液,，再根據(jù)樣品的種類(lèi)用以下規(guī)定的稀釋液量用鋁箔袋內(nèi)配套吸管反復(fù)沖洗,，*溶解杯底所有的固體，此溶解液為樣品提取液即檢測(cè)液,?？紤]不同樣品對(duì)黃曲霉毒suB1的高含量要求，請(qǐng)參考下表進(jìn)行用稀釋液溶解杯底固體：
谷物殘留*（ppb） | 2.5 | 5 | 10 | 20 |
使用稀釋液體積（ml） | 0.4 | 0.8 | 1.6 | 3.2 |
2. 飼料（以殘留*50ppb計(jì)算）：任取5g以上有代表性樣品并粉碎過(guò)20目篩,，準(zhǔn)確稱(chēng)取2.0g均勻粉碎試樣于配套離心管中,，再準(zhǔn)確加入4ml純凈水和4.0ml乙酸乙酯，將瓶塞蓋緊密封,，充分振蕩5min,，4000rpm離心1min得上清液，將上清液用吸管移出0.5ml到蒸發(fā)皿或小玻璃杯中,，用電吹風(fēng)吹干上清液,，再用2ml的稀釋液量用鋁箔袋內(nèi)配套吸管反復(fù)沖洗，*溶解杯底所有的固體,，此溶解液為樣品提取液即檢測(cè)液,。如果殘留*是30ppb，則用1.2ml的稀釋液溶解,；如果殘留*是40ppb,，則用1.6ml的稀釋液溶解。
3. 食用油：稱(chēng)2.0g油樣于小燒杯中,，用8ml正乙烷分次將試樣轉(zhuǎn)移至分液漏斗中,，準(zhǔn)確加入4ml純凈水充分振蕩3min,，吸去上層正乙烷層，再加入4ml的乙酸乙酯,，將瓶塞蓋緊密封,，充分振蕩5min，靜置或3000rpm離心得上清液,，將上清液用吸管移出2ml到小玻璃杯中,，用電吹風(fēng)吹干，再用稀釋液溶解后為樣品提取液,。
4. 醬油,、醋、發(fā)酵酒：稱(chēng)取25.0g樣品于小燒杯中,，用5ml蒸餾水將試樣轉(zhuǎn)移到分液漏斗中,，加入20ml三氯甲烷，加塞輕輕振搖3min,，靜置分層,。放出下層三氯甲烷層，經(jīng)盛有約5g預(yù)先用三氯甲烷濕潤(rùn)的無(wú)水Na2SO4過(guò)濾器于蒸發(fā)皿中,，后用少量三氯甲烷洗滌過(guò)濾器,，洗液并于蒸發(fā)皿中，用電吹風(fēng)吹干,。吹干冷卻后,，準(zhǔn)確加入稀釋液，將蒸發(fā)皿中的凝結(jié)物充分溶解,。
【操作步驟】
1. 在進(jìn)行檢測(cè)前先完整閱讀使用說(shuō)明書(shū),，使用前將試紙卡和待檢樣本溶解恢復(fù)至室溫。
2. 從原包裝袋中取出試紙卡,，打開(kāi)后平放在桌面上,，請(qǐng)?jiān)?小時(shí)內(nèi)盡快使用。
3. 用吸管吸取待檢樣品溶液,，滴加3滴于加樣孔中,，加樣后開(kāi)始計(jì)時(shí)。
4. 結(jié)果應(yīng)在5min左右讀取,，超過(guò)10min的時(shí)間判讀無(wú)
【結(jié)果判定】
1.陽(yáng)性：位置C顯示出紅色線條，而位置 T不顯色時(shí)為陽(yáng)性,。陽(yáng)性結(jié)果表明：AFB1含量超過(guò)樣品允許量,。
2.陰性：位置C顯示出紅色線條，位置 T同時(shí)顯示出紅色線條,，且T線顏色接近C線或者深于C線時(shí),，判為陰性,。陰性結(jié)果表明：AFB1含量低于樣品允許量。
3.無(wú)效：位置C不顯示出紅色線條而位置 T顯示出紅色線條或位置C和位置 T均無(wú)線,，該試紙卡視為無(wú)效,。建議使用新的試紙卡按本說(shuō)明書(shū)要求重新測(cè)試。
【特別說(shuō)明】
1.請(qǐng)按照操作步驟進(jìn)行測(cè)試,，操作時(shí)請(qǐng)勿觸摸試紙顯示區(qū),。
2.如購(gòu)買(mǎi)時(shí)發(fā)現(xiàn)過(guò)期，破損,，污染,，無(wú)效的產(chǎn)品，請(qǐng)到購(gòu)買(mǎi)處進(jìn)行更換,。
3.本品應(yīng)保存在干燥陰涼處（4--30℃）,，有效期12個(gè)月，生產(chǎn)日期見(jiàn)包裝,。
4.本品為一次性產(chǎn)品,，請(qǐng)勿重復(fù)使用。
5.如遇稀釋液不足,，請(qǐng)用蒸餾水加入稀釋液中混勻后使用,。
6.本品為篩選試劑，任何陽(yáng)性結(jié)果請(qǐng)用其他方法做進(jìn)一步確認(rèn),。
7.有條件的實(shí)驗(yàn)室可以用AFB1標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)試后作為判斷參考,。