色譜柱是高效液相色譜儀主要的部件,，被測(cè)物質(zhì)能否被很好的分離和測(cè)定，色譜柱的性能起著決定性的作用,。因此,，在日常工作中，應(yīng)特別注意色譜柱的正確使用和維修保養(yǎng),，以延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命,。
1、使用預(yù)柱和保護(hù)柱,。預(yù)柱(pre-column)安裝于泵和進(jìn)樣器之間,，它給色譜柱中的流動(dòng)相提供了*的平衡，并防止了對(duì)柱填料有破壞作用的組分或污染物進(jìn)入色譜柱,。保護(hù)柱(guardcolumn)可以阻擋能夠牢固地吸附于色譜柱上的組分進(jìn)入色譜柱,，保護(hù)柱應(yīng)與色譜柱的填料相同。預(yù)柱和保護(hù)柱可以經(jīng)常更換,，而不需要經(jīng)常更換色譜柱,，這就延長(zhǎng)了色譜柱的使用壽命。
2,、防止氣體進(jìn)入色譜柱,。有些色譜柱(如凝膠柱)是不允許氣泡進(jìn)入的，否則將會(huì)使柱效降低甚至形成微小的難以驅(qū)除的氣室,。因此,，為了防止氣泡進(jìn)入色譜柱，一定要使用經(jīng)過脫氣的流動(dòng)相,，并且要嚴(yán)格按照下列步驟來安裝色譜柱,。a.拆卸下色譜柱入口處的密封螺絲，觀察是否有溶劑滲出,；b.如有溶劑滲出,，即可將色譜柱接到管路上，以避免氣泡的進(jìn)入,；c.如無溶劑滲出時(shí),，表明色譜柱的此端已經(jīng)進(jìn)去空氣了，此時(shí)，可將色譜柱的出口端接到進(jìn)樣閥上,，以流動(dòng)相來反方向沖洗色譜柱,，以便將柱內(nèi)的空氣排除。最好以0.2ml/min的小流量來沖色譜柱,，如果溶劑的流速太快或者是壓力突然的上升都將會(huì)導(dǎo)致柱性能的降低,；d.如果流出的溶劑里不含有氣泡，說明柱內(nèi)的氣體已經(jīng)被排出了,，再將色譜柱以正確的方向接好,，這樣氣泡就進(jìn)不到色譜柱里面了。
3,、色譜柱的清洗,。為了不使被測(cè)物質(zhì)和雜質(zhì)停留在色譜柱中，在每次的樣品分析工作完成之后,，都應(yīng)及時(shí)地清洗色譜柱,。首先要用對(duì)被測(cè)樣品洗脫能力強(qiáng)的溶劑來洗脫色譜柱，以分析工作中常用的反相色譜分析法為例,，因其先流出的物質(zhì)是極性大的物質(zhì),，此時(shí)應(yīng)用100%的甲醇或使用異丙純、四氫呋喃等極性稍弱的溶劑將吸附在柱內(nèi)的極性小的物質(zhì)洗脫下來,，洗脫液的用量一般為柱體積的20倍即可,。如果流動(dòng)相是緩沖溶液，則應(yīng)先用蒸餾水來沖洗色譜柱,，以沖掉柱內(nèi)的鹽,，然后再用合適的溶劑來沖洗。
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