新手學(xué)液相色譜,,會(huì)碰到兩種洗脫方式:等度洗脫和梯度洗脫,,什么情況下會(huì)用到等度,哪些條件下用梯度,,有什么不同,?
1、洗脫的改變與不改變的配比不同
等度洗脫:流動(dòng)相的組成比例和流速恒定不變,。
梯度洗脫:改變流動(dòng)相的濃度配比,。
2、它們的定義不同
等度洗脫定義:液相色譜操作中,,等度洗脫即在樣品組分的分析周期中,,流動(dòng)相的組成比例和流速恒定不變的洗脫方式。與梯度洗脫對(duì)應(yīng),。
梯度洗脫定義:梯度洗脫又稱(chēng)為梯度淋洗或程序洗脫,。在同一個(gè)分析周期中,,按一定程度不斷改變流動(dòng)相的濃度配比,稱(chēng)為梯度洗脫,。
用梯度洗脫還是等度洗脫,主要看雜質(zhì)的情況,。同一物質(zhì)有梯度洗脫和等度洗脫兩種條件時(shí),,梯度洗脫的認(rèn)可度較高。雜質(zhì)與雜質(zhì),、主峰,、溶劑峰的分離度一定要好(不好的話(huà)就要用梯度洗脫)。
1,、雜質(zhì)和主成分極性相差很大,,雜質(zhì)一定要全部都能洗脫出來(lái)(有時(shí)等度情況下沖兩三個(gè)小時(shí)雜質(zhì)也沖出不來(lái),就必須考慮用梯度),。
2,、雜質(zhì)和主成分極性相差較大,雜質(zhì)出峰太晚(等度沖兩個(gè)小時(shí)出來(lái)個(gè)雜質(zhì),,就可以通過(guò)梯度縮短檢樣時(shí)間)
3,、還有就是雜質(zhì)極性比主峰的大,等度時(shí)要想主峰時(shí)間合適雜質(zhì)全堆在前邊,,雜質(zhì)分開(kāi)主峰又出峰太晚,,這種情況也得考慮梯度洗脫。
在能達(dá)到較好的分離度的情況下能用等度就用等度,,用梯度要麻煩一些,。
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