常用的c18液相色譜柱,,當(dāng)拿到新的C18柱時(shí)應(yīng)該怎樣進(jìn)行活化及維護(hù),?為什么要這樣做?
新柱活化,,實(shí)際上是一個(gè)平衡的過(guò)程,,除了用流動(dòng)相平衡外,,有時(shí)候還必須用所測(cè)樣品對(duì)新柱進(jìn)行平衡。特別是測(cè)定分子量比較高的多肽,,尤其重要,。因?yàn)榉肿恿扛叩奈镔|(zhì)分子,擴(kuò)散速度慢,,平衡所需時(shí)間也相應(yīng)較長(zhǎng),。
具體平衡方式也很簡(jiǎn)單,多進(jìn)幾次測(cè)試樣品,,直到峰面積和保留時(shí)間穩(wěn)定,,再進(jìn)行正式進(jìn)樣測(cè)定。
如果要加快平衡時(shí)間,,把前面用來(lái)平衡的進(jìn)樣樣品濃度加大,,或者不等洗脫完成,連續(xù)進(jìn)樣多針,。用待測(cè)物對(duì)新柱平衡,,目的是將硅膠基質(zhì)填料表面具有非特異性吸附的位點(diǎn)的吸附能力飽和掉。
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