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1. 收集4ml待提取的培養(yǎng)基樣品,，置2-8℃保存,。
2. 將樣品在4℃條件下,，3000×g離心15分鐘。棄沉淀,，收集上清,。
3. 小心將上清移入另一干凈離心管中。
4. 將樣品在4℃條件下,，10000×g離心20分鐘,。棄沉淀，收集上清,。
5. 小心將上清移入另一干凈離心管中,。
6. 在4 ml上清中加入1 ml提取液A，蓋緊離心管蓋,，上下顛倒混勻1分鐘左右,，使液體充分混勻。
7. 置2-8℃冰箱靜置過(guò)夜,。
8. 在4℃條件下,，10000×g離心60分鐘。
9. 小心移除上清,，收集沉淀,。
10. 取50-100 μl外泌體保存液將沉淀重懸，即得到外泌體樣品,。
11. 將外泌體樣本-80℃保存或直接用于下游應(yīng)用,。