左旋肉堿(L-Carnitine, β-羥基γ-三jia銨丁酸)又稱肉毒堿或維生素 BT,其化學(xué)式為C7H15O3N,,分子量為162.2,,是一種類氨基酸。L-肉堿作為 載體將長(zhǎng)鏈脂肪酸從腺粒體膜外輸送到膜內(nèi),,促進(jìn)脂肪酸的β-氧化,,從降低 血清膽固醇及甘油三脂的含量,,提高機(jī)體耐受力及減少代謝毒性作用[i-iv] 。對(duì) 嬰幼兒來(lái)說(shuō),,L-肉堿在維持嬰幼兒生命及許多促進(jìn)發(fā)育的生理過(guò)程,,如生酮 作用、蛋白質(zhì)代謝等方面均有一定的功能[v,vi] ,。我國(guó)及許多其它國(guó)家已規(guī)定在 嬰幼兒食品配方中添加適量的L-肉堿,,以滿足其生理需要,更好地促進(jìn)嬰幼 兒健康成長(zhǎng)[vii-x] ,。
左旋肉堿極性較強(qiáng),,缺少發(fā)色基團(tuán),定量分析困難,。國(guó)內(nèi)外對(duì)左旋肉堿 的測(cè)定主要有酶法[xi,xii] ,、電泳[xiii,xiv] 、流動(dòng)相注射串聯(lián)質(zhì)譜法[xv] ,,液相色譜 法[xvi-xix] 等,。酶法專屬性強(qiáng),但前處理繁瑣,,液相色譜法中低波長(zhǎng)檢測(cè)則 干擾較多,,衍生法靈敏度高,但前處理復(fù)雜,,所用衍生劑毒性強(qiáng),。其它方法 有的靈敏度較低。有的設(shè)備較貴等原因較少使用,。
離子色譜法可測(cè)定在水溶液中能電離的物質(zhì),。在酸性溶液中,左旋肉堿 表現(xiàn)為陽(yáng)離子特性,,帶正電荷,,可用陽(yáng)離子交換色譜柱分離。但左旋肉堿的 兩性特征使其在抑制后呈電中性,,無(wú)法采用抑制型電導(dǎo)檢測(cè),。同時(shí),奶粉中 左旋肉堿添加量較低,,需要更低檢出限的測(cè)定方法,。為此,我們通過(guò)實(shí)驗(yàn),, 摸索出左旋肉堿的在線固相萃取非抑制型離子色譜測(cè)定的新方法,。該方法前 處理簡(jiǎn)便、檢測(cè)快速,用于奶粉樣品中左旋肉堿的檢測(cè),,結(jié)果令人滿意,。
測(cè)試條件 儀器:ICS系列離子色譜系統(tǒng)帶雙六通閥及雙泵。 分析柱: IonPac CS17+IonPac CG17,,4mm 濃縮柱: IonPac TCC-UPL1 MSA:0-20min,,3mM;流速:1mL/min 柱溫:30℃ 檢測(cè)方式:抑制型電導(dǎo)檢測(cè) 進(jìn)樣量:500µL
樣品前處理 稱取奶粉樣品約1 g至50 mL比色皿中,,加入超純水 14 mL,,適當(dāng)搖晃,使奶粉充分溶解后加入21 mL乙腈 沉淀蛋白,,靜置10 min,,取上層清液,10000 r/min離心 10min后,,稀釋5倍,,將稀釋液依次通過(guò)0.22µm尼龍濾膜 和OnGuard II RP柱、Na柱,,棄去6mL初始流出液后采集 2mL樣品用于離子色譜測(cè)定,。 OnGuard II RP柱(規(guī)格2.5cc),預(yù)先使用10mL甲 醇和15mL水活化,。 OnGuard II Na柱,,用10mL水活化。
詳細(xì)了解請(qǐng)點(diǎn)擊:戴安ICS-600基礎(chǔ)型離子色譜儀
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