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對于紫外可見分光光度計,,你了解多少?

閱讀:2423      發(fā)布時間:2021-9-16
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紫外可見分光光度計的用途之一是物質(zhì)的鑒定,,主要是用來測量待測的未知或者已知的物質(zhì)對可見光的吸光度,,并且同時的進行定量分析。用途之二是進行待測物質(zhì)和標準物及標準圖譜對照的分析,。用途之三是用來比較某種物質(zhì)比較大的吸收波長吸收系數(shù)一致性,。用途之四是進行物質(zhì)的純度檢驗。紫外可見分光光度計的用途之五是用來推測化合物的分子結(jié)構(gòu)以及其構(gòu)成等,。用途之六是判定絡(luò)合物的組成測定,。

  A.紫外可見分光光度計的原理:

  紫外可見分光光度計的工作原理:基于朗伯-比耳(Lambert-Beer)定律,即物質(zhì)在一定濃度下的吸光度與它的吸收介質(zhì)的厚度呈正比,。

  通常表述為:當一束平行的單色光通過某一均勻的有色溶液時,,溶液的吸光度與溶液的濃度和光程的乘積成正比,,其數(shù)學表達式如下:

  A=-lg( It/I0 )= - lgT= =εbC

  式中,A 為吸光度,;I0為入射的單色光強度,;It為透射的單色光強度;T為物質(zhì)的透射率,;ε為摩爾吸光系數(shù)(L·mol-1·cm-1),;b為被吸收層厚度(cm),即比色皿的光程,;C為物質(zhì)的摩爾濃度(mol·L-1),;

  B.紫外可見分光光度計常見應(yīng)用:

  紫外可見分光光度計廣泛應(yīng)用于制藥、醫(yī)療衛(wèi)生,、化工,、能源、機械,、冶金,、環(huán)保、地質(zhì),、食品,、生物、材料,、農(nóng)業(yè),、林業(yè)、漁業(yè)等行業(yè),,在高等教育,、計量科學和科研院所中的教學、科研領(lǐng)域,,以及生產(chǎn)中的質(zhì)量控制,,原材料和產(chǎn)品檢驗等各方面發(fā)揮著重要作用,是理化實驗室常用的分析儀器,。

  C.紫外可見分光光度計的光譜范圍:

  常見的紫外可見分光光度計的波長范圍為190-1100 nm,。通常所指的可見光譜范圍為400-700 nm,是指被人眼能感知到的光譜范圍,,200-400 nm為紫外光譜范圍,。一般,在可見區(qū)測試的樣品必須是有色物質(zhì),。

  D.紫外可見分光光度計具體應(yīng)用如下:

  1)核酸,、蛋白濃度測量以及細菌生長濃度測量。

  2)食品,、水質(zhì),、合金等樣品中的金屬元素(如鐵,、錳、鎘,、銅,、鋁等)及非金屬元素(如硅、磷/磷酸鹽,、硝酸鹽,、硫酸鹽、氟化物等)分析,。

  3)與其他分析儀器聯(lián)用,,并進行定性分析,,如有機化合物的分析,、藥物分析。常見的 分析手段如:與標準物及標準圖譜對照,;比較大吸收波長吸收系數(shù)的一致性,。

  E.紫外可見分光光度計的使用方法:

  1)溶液裝入比色皿約2/3高度處為宜;盡量避免氣泡的產(chǎn)生,;若溶液殘留在比色皿外壁,,應(yīng)及時擦拭干凈(先用濾紙吸干,然后用擦鏡紙輕拭光面),;對于易揮發(fā)的樣品,,建議使用比色皿蓋;盡量避免沾污樣品架,,否則應(yīng)及時擦去樣品架上殘留液體,。

  2)比色皿使用完畢應(yīng)及時清洗,并用適當?shù)姆椒ㄇ逑?,若清洗不當或沒有清洗干凈,,也會影響測量結(jié)果的準確度和穩(wěn)定性。

  3)測試過程中,,若某一光源不用,,可選擇將其關(guān)閉,以延長燈的使用壽命,;儀器不用時,,請及時關(guān)機、并拔掉電源插頭,,以防止雷雨天氣可能造成的損壞,。

  4)請勿擅自拆卸儀器外殼和內(nèi)部零部件,尤其是光路結(jié)構(gòu)部分,,切勿隨意松動其緊固螺釘和螺母,;請勿隨意觸碰各光學表面(包括光源),,以免影響儀器的正常工作、甚至造成人為損壞,。

  5)保持儀器表面和工作環(huán)境的清潔,;杜絕使用汽油、乙mi等有機溶液擦拭儀器外殼,;儀器不用時可用防塵罩進行防護,。

  6)紫外可見分光光度計應(yīng)避免長期不用,建議定期開機確保其能正常運轉(zhuǎn),;溫,、濕度較高的地區(qū)應(yīng)特別注意防潮。


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