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大鼠附睪上皮細(xì)胞

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 附睪
大鼠附睪上皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:兔前列腺基底細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔腎間質(zhì)成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔腎集合管上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔輸尿管成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔腎周肌成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

大鼠附睪上皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

附睪

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自附睪組織,;附睪(Epididymis)是一個(gè)由曲折,、細(xì)小的管子構(gòu)成的器官,一端接著輸精管(Ductusdeferens),,一端接著睪丸(Testis)的曲細(xì)精管,,具體結(jié)構(gòu)主要包括輸出小管和附睪管。附睪緊貼睪丸的上端和后緣,,可分為頭,、體、尾三部,。精子離開睪丸后通過(guò)輸出小管進(jìn)入附睪,。附睪具有暫存精液并分泌附睪液營(yíng)養(yǎng)精子的功能,以促進(jìn)精子的進(jìn)一步成熟附睪的功能是暫存精子,,促進(jìn)精子的進(jìn)一步成熟,。精子在附睪內(nèi)獲得運(yùn)動(dòng)能力,,總共停留8~17天,終達(dá)到功能上的成熟,。在這個(gè)過(guò)程中,精子除了自身的因素,,還受到附睪微環(huán)境的影響,,這包括了一系列的物理、化學(xué)變化和精子形態(tài)的改變,??梢哉f(shuō),附睪微環(huán)境正常穩(wěn)定是附睪發(fā)揮促成熟這一功能的必要條件,。若附睪的功能發(fā)生異常,,精子則不能成熟,引起不育,。附睪上皮含有主細(xì)胞,、基細(xì)胞、亮細(xì)胞等幾種類型細(xì)胞,?;?xì)胞,其頂部離附睪管腔有一定距離,,在附睪各部分,,其形態(tài)沒有差別,一般認(rèn)為是貯備細(xì)胞,;另一種主細(xì)胞,,是維持附睪生理功能的物質(zhì)基礎(chǔ),在各區(qū)段的主細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)差別很大,,這也反映出各區(qū)段的生理功能的差異,。除上皮細(xì)胞外,附睪的管壁組織結(jié)構(gòu)也有規(guī)律性的變化,,附睪管起始段平滑肌有自發(fā)地節(jié)律性收縮,,而尾部平滑肌就沒有這種特點(diǎn),僅在射精一瞬間出現(xiàn)強(qiáng)烈的節(jié)律收縮,。作為負(fù)責(zé)提供適合精子成熟微環(huán)境的附睪,,具有活躍的分泌與吸收功能。其中,,附睪上皮的電解質(zhì)和水分的轉(zhuǎn)運(yùn),,對(duì)保持附睪內(nèi)合適的離子濃度和suan堿度,為精子成熟提供適宜的環(huán)境起著相當(dāng)重要的作用,。睪丸的支持細(xì)胞每天能產(chǎn)生大量睪網(wǎng)液,,如一只公羊每天約能分泌40毫升睪網(wǎng)液,,而從附睪排出的只不過(guò)幾百微升,也就是說(shuō)睪丸分泌液有99%被附睪上皮重新吸收回體內(nèi),。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明,,結(jié)扎輸精管時(shí)睪丸不會(huì)腫脹,但若結(jié)扎睪丸輸出小管,,睪丸第二天就會(huì)腫脹,,這就充分證實(shí)了附睪存在著強(qiáng)有力的吸收功能,但是重新吸收的意義尚不清楚,。體外培養(yǎng)附睪上皮細(xì)胞對(duì)精子的發(fā)育,、成熟,附睪生理基礎(chǔ)功能研究具有重要意義,。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原消化結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、EGF,、Hydrocortisone,、腎上腺素、甲狀腺素,、Insulin,、Transferrin、Selenium Solution,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  上皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%,;CO2,,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二,、免疫熒光鑒定:


   1,、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將成1mm3左右大小,;
   2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
   3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織被消化,;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
   5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
   3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
   6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

STAC1蛋白抗體 脂肪水解LIPN封閉多肽 

PSD95結(jié)合蛋白1抗體 重組人胎盤生長(zhǎng)因子蛋白 

英文名稱: GFP 人類皰疹病毒8封閉多肽 

磷化磷脂酰肌醇激/PI3 Kinase P85α/γ抗體 血型糖蛋白A/涎糖蛋白封閉多肽 

磷化視網(wǎng)膜色變性蛋白4抗體 滋養(yǎng)層細(xì)胞抗原3β7封閉多肽 

磷化結(jié)蛋白抗體 基因抑制元件1封閉多肽 

富含絲氨精子發(fā)生相關(guān)蛋白2抗體 有絲分裂激B封閉多肽 

HRC蛋白抗體 跨膜蛋白74封閉多肽 

γS-crystallin蛋白抗體 重組核衣殼突變蛋白(D3L,P13T,D103Y,D128Y,H145Y,R203K,G204R,T205I,S235F), His tag, (南非) 

干擾腎細(xì)胞癌蛋白2抗體 CD97封閉多肽 

磷脂轉(zhuǎn)移蛋白抗體 肌球蛋白結(jié)合蛋白H樣蛋白封閉多肽 

去整合樣金屬28抗體 黑色瘤相關(guān)抗原C1封閉多肽 

3-羥基異丁脫氫抗體 GTP激活蛋白ASAP3封閉多肽 

鉻細(xì)胞瘤患者抑癌基因SDHB抗體 磷化S6核糖體蛋白封閉多肽 

非受體型蛋白酪氨磷7抗體 重組人腎小球細(xì)胞粘附分子受體蛋白 

廣泛控制氨基合成1樣蛋白1抗體 叉頭蛋白O3A封閉多肽 

絲氨/精氨相關(guān)蛋白53抗體 癲癇相關(guān)基因6封閉多肽 

信號(hào)肽復(fù)合物亞基2抗體 堿性螺旋環(huán)螺旋蛋白MESP2封閉多肽 
大鼠附睪上皮細(xì)胞大鼠顳下頜關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠顳下頜關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,,本產(chǎn)品可保持大鼠顳下頜關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含大鼠顳下頜關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,,可直接用于大鼠顳下頜關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的體外培養(yǎng),。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用,不得用于診斷,、治療、臨床,、家庭及其他用途,。

小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,,本產(chǎn)品可保持小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,,可直接用于小鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞的體外培養(yǎng),。

HBE135-E6E7 細(xì)胞專用培養(yǎng)基100mLHBE135-E6E7細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,,本產(chǎn)品可保持HBE135-E6E7細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含HBE135-E6E7細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,,可直接用于HBE135-E6E7細(xì)胞的體外培養(yǎng),。

Ham's F-12培養(yǎng)基,干粉5×1L-

RPMI-1640 (含L-丙氨酰-L-,、HEPES,,不含酚紅)500mL-

人表皮黑色細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人表皮黑色細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,,本產(chǎn)品可保持人表皮黑色細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含人表皮黑色細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,可直接用于人表皮黑色細(xì)胞的體外培養(yǎng),。

MC/CAR細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4MC/CAR細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持MC/CAR細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含MC/CAR細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,,無(wú)需添加任何成分,可直接用于MC/CAR細(xì)胞的體外培養(yǎng),。


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