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人骨髓造血干細胞

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更新時間:2023-04-21 16:51:59瀏覽次數(shù):503

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 骨髓組織
人骨髓造血干細胞的相關(guān)產(chǎn)品:兔腎小球內(nèi)皮細胞原代細胞5×105兔腎足細胞原代細胞5×105兔輸尿管上皮細胞原代細胞5×105兔輸尿管平滑肌細胞原代細胞5×105兔膀胱上皮細胞原代細胞5×105

詳細介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人骨髓造血干細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

骨髓組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自骨髓,;骨髓是機體的造血組織,,位于身體的許多骨骼內(nèi),。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞,、血小板和各種白細胞,。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,,包括細菌,、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體,。因此,,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官,。骨髓是存在于長骨(如肱骨,、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,,能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色,,稱為紅骨髓。出生時,,紅骨髓充滿全身骨髓腔,,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓,。造血干細胞具有自我更新能力并能分化為各種血細胞的前提細胞,終生成各種血細胞成分,,包括紅細胞,,白細胞和血小板。造血干細胞需要根據(jù)機體的生理需求適時的補充血液系統(tǒng)各個成熟細胞組分,。同時在損傷,、炎癥等應(yīng)激狀態(tài)下,造血干細胞也扮演著調(diào)節(jié)和維持體內(nèi)血液系統(tǒng)各個細胞組分的生理平衡的角色,。臨床治療中,,造血干細胞移植廣泛應(yīng)用于血液系統(tǒng)疾病以及自身免疫疾病,在其它實體瘤的治療中,,比如淋巴瘤,,生殖細胞瘤,乳腺癌,,小細胞肺癌,,主要應(yīng)用于常規(guī)治療失敗或復(fù)發(fā)難治以及具有不良預(yù)后因素的患者。造血干細胞以不對稱有絲分裂方式進行增殖,,一個干細胞分裂產(chǎn)生兩個子細胞,,一個分化為造血祖細胞,另一個則保持干細胞特征,。造血干細胞在不斷體外培養(yǎng)產(chǎn)生大量造血祖細胞同時,,保持自己既不增殖也不分化。體外培養(yǎng)微環(huán)境合適,,造血干細胞可持續(xù)維持培養(yǎng) 60 天左右,。 造血干細胞體外增殖培養(yǎng)需要基質(zhì)細胞滋養(yǎng)(滋養(yǎng)層細胞),缺少滋養(yǎng)層細胞不增殖,,無法長期培養(yǎng),,本產(chǎn)品為收集培養(yǎng)好的造血干懸浮細胞灌裝發(fā)貨,不包含滋養(yǎng)層,,因此收貨后建議盡快實驗,。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用沖洗骨髓,、密度梯度離心,、差速貼壁法結(jié)合培養(yǎng)基篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)CD34免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、SCF,、IL-3,、TPO、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  懸浮

細胞形態(tài)  圓形

傳代特性  不建議傳代

消化液  

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,,95%;CO2,,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實驗報告:

一,、分離與培養(yǎng):

二,、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化,;
   4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;

 

1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
   2,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細胞30min,;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;
   5、PBS沖洗細胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
   6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

脫氫激亞型2抗體 皮膚T細胞淋巴瘤相關(guān)抗原5封閉多肽 

促腎上腺皮質(zhì)激釋放因子/促腎上皮質(zhì)激釋放激抗體 SYF2蛋白封閉多肽 

D型多巴色脫羧抗體 突觸相關(guān)蛋白23封閉多肽 

CD10單克隆抗體 9號染色體開放閱讀框66封閉多肽 

二酰基甘油?;D(zhuǎn)移2樣蛋白6抗體 組胺雞卵白蛋白偶聯(lián)物 

促甲狀腺受體抗體(C端) 乙?;D(zhuǎn)移10封閉多肽 

核自身抗原SP140抗體 原癌基因AF4蛋白封閉多肽 

SAPS結(jié)構(gòu)域家族3抗體 酪氨羥化封閉多肽 

鈉離子/氫離子交換蛋白3抗體 RNA結(jié)合蛋白35A封閉多肽 

ADP核糖基化因子GTP激活蛋白1抗體 過氧化物體生成蛋白5相關(guān)蛋白封閉多肽 

Cy3標記小鼠抗人CD8單克隆抗體 延胡索酰乙酰乙水解封閉多肽 

還原型輔Ⅱ氧化5/腺嘌呤二核苷磷抗體 軸突蛋白5封閉多肽 

舞蹈癥相關(guān)蛋白40/8相關(guān)蛋白/第八因子相關(guān)蛋白抗體 重組小鼠FcRn蛋白 

早老蛋白-1抗體 卵泡刺激結(jié)合蛋白1封閉多肽 

eIF4H蛋白抗體 解旋樣轉(zhuǎn)錄因子封閉多肽 

乳腺癌易感基因1抗體 富含亮氨重復(fù)蛋白48封閉多肽 

退行性精母細胞同源物1抗體 MAGOH蛋白封閉多肽 

DEK癌基因結(jié)合蛋白 基質(zhì)金屬-26封閉多肽 
人骨髓造血干細胞GMEM (Glasgows MEM)500mL-

Ham's F-12500mL-

Ham's F-12K(不含L-)500mL-

小鼠子宮成纖維細胞培養(yǎng)基100mL小鼠子宮成纖維細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,,本產(chǎn)品可保持小鼠子宮成纖維細胞佳的生長狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含小鼠子宮成纖維細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,,可直接用于小鼠子宮成纖維細胞的體外培養(yǎng),。

SW579 [SW 579; SW-579]細胞專用培養(yǎng)基(DMEM)125mL×4SW579 [SW 579; SW-579]細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,,本產(chǎn)品可保持SW579 [SW 579; SW-579]細胞佳的生長狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含SW579 [SW 579; SW-579]細胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,可直接用于SW579 [SW 579; SW-579]細胞的體外培養(yǎng),。

大鼠睪丸支持細胞培養(yǎng)基100mL大鼠睪丸支持細胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠睪丸支持細胞佳的生長狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含大鼠睪丸支持細胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,可直接用于大鼠睪丸支持細胞的體外培養(yǎng),。

22RV1細胞專用培養(yǎng)基125mL×422RV1細胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持22RV1細胞佳的生長狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含22RV1細胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,可直接用于22RV1細胞的體外培養(yǎng),。


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