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人腹膜毛細血管內皮細胞

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更新時間:2023-04-21 16:49:57瀏覽次數:240

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,,謝謝!

產品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 腹膜組織
人腹膜毛細血管內皮細胞的相關產品:兔結腸平滑肌細胞原代細胞5×105兔結腸成纖維細胞原代細胞5×105兔膽囊上皮細胞原代細胞5×105兔肝內膽管上皮細胞原代細胞5×105兔肝外膽管上皮細胞原代細胞5×105

詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規(guī)格

組織來源

人腹膜毛細血管內皮細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

腹膜組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自腹膜組織;腹膜是存在于高等脊椎動物腹腔中的一層黏膜,,主要由間皮細胞和間質(結締組織,、纖維,、毛細血管、淋巴管)構成,,藉由結締組織的支持所形成的一層膜狀組織,。腹膜包覆大部分腹腔內的器官,能分泌黏液潤濕臟器的表面,,減輕臟器間的摩擦,。腹腔臟器的血液、淋巴和神經組織經由腹膜與外界相連,;腹膜也具有吸收撞擊保護內臟的效果,。腹膜(peritoneum)為全身面積大,、配布復雜的漿膜,由皮及少量結締組織構成,,薄而光滑,,呈半透明狀。襯于腹,、盆腔壁內表面的腹膜稱為壁腹膜(parietal-peritoneum)或腹壁薄層,;覆蓋腹、盆腔器表面的部分稱為臟腹膜(visceral-peritoneum)腹膜或腹膜臟層,。臟腹膜與壁腹膜互相延續(xù),、移行,共同圍成不規(guī)則的潛在性腔隙,,稱為腹膜腔(peritoneal-cavity),。腹膜腔是臟、壁兩層腹膜之間相互移行圍成的潛在性間隙,。腹膜腔內有少量漿液,,在臟器活動時可減少摩擦。腹膜的主要生理功能:①分泌功能,;②吸收功能,;③再生能力;④防御功能,;⑤調理功能,。臟、壁腹膜都有豐富的毛細血管,,毛細血管上有不同的孔徑,;腹膜的毛細血管和毛細血管后靜脈是進行溶質交換的主要場所。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原-中性dan白聯(lián)合消化法結合化學試劑抑制法,、并通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經CD31免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  內皮細胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,,95%;CO2,,5%

1.png

實驗報告:

一,、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
   3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復此步驟2-3次,,直至組織被消化;
   4,、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
   5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
   2、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
   3,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細胞30min;
   4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5,、PBS沖洗細胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
   6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,,90%,;優(yōu)質胎牛血清,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存,。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

NUDCD2蛋白抗體 LCK相互作用膜蛋白封閉多肽 

一氧化氮合轉運誘導抗體 粘結蛋白SA1封閉多肽 

細胞分化蛋白SEPT14抗體 嗅覺受體51I2封閉多肽 

頜骨成釉細胞相關蛋白抗體 FLJ38767蛋白封閉多肽 

鋅指蛋白804A抗體 磷化CD156b封閉多肽 

英文名稱: PAX8 絲裂原活化蛋白激6封閉多肽  

英文名稱: VSV-G tag 甲狀腺激轉運蛋白/單羧轉運蛋白7/8封閉多肽 

磷肌醇磷脂PLCZ1抗體 FBXO16蛋白封閉多肽 

環(huán)指蛋白21抗體 長鏈脂肪酰基水解封閉多肽 

英文名稱: ALDH1L1 絲氨/蘇氨蛋白激NEK1封閉多肽 

9號染色體開放閱讀框78抗體 DNA1樣蛋白1封閉多肽 

磷化微管相關蛋白抗體 組織K封閉多肽 

神經降壓受體2抗體 核糖體p70 S6蛋白激封閉多肽 

原鈣粘附蛋白α8抗體 T淋巴細胞CD1d封閉多肽 

磷化絲氨/蘇氨/酪氨抗體 磷化血小板源性生長因子受體α/β封閉多肽 

PE-Cy5標記小鼠CD4單克隆抗體 轉錄因子E2F8封閉多肽 

1號染色體開放閱讀框124抗體 核受體共激活因子5封閉多肽 

HOMER2抗體 磷化β 連環(huán)蛋白封閉多肽 
人腹膜毛細血管內皮細胞M199(不含酚紅,,含L-丙氨酰-L-)500mL-

McCoy's 5A培養(yǎng)基(含10%FBS)125mL×4McCoy's 5A培養(yǎng)基是Thomas McCoy等人在1959年設計的培養(yǎng)基,,初專門用于Novikoff Hepatoma細胞的培養(yǎng)。McCoy's 5A培養(yǎng)基是改良的Basal Medium 5A,,與其他培養(yǎng)基不同的是,,McCoy's 5A含有還原型、細菌蛋白胨以及高濃度的葡萄糖,。McCoy's 5A廣泛用于多種類型的原代細胞的培養(yǎng),,如骨髓、皮膚,、牙齦,、腎,、脾,、肺、大鼠胚胎,、網膜等,。此外McCoy's 5A培養(yǎng)基還用于組織活檢培養(yǎng)、細胞建系,,以及一些淋巴細胞和較難培養(yǎng)的細胞的培養(yǎng),。

小鼠脂肪間充質干細胞成軟骨誘導分化培養(yǎng)基100mL小鼠脂肪間充質干細胞成軟骨誘導分化培養(yǎng)基專門為小鼠脂肪間充質干細胞成軟骨誘導分化而開發(fā),針對小鼠脂肪間充質干細胞的特性優(yōu)化分化試劑的配方,可增加小鼠脂肪間充質干細胞的成軟骨分化效果,。本產品不含血清成分,,但含其他血清替代物蛋白成分,僅用于科研用途,,不可用于診斷,、治療、臨床及其他用途,。培養(yǎng)基組成成分成分名稱添加體積(規(guī)格200ML)添加體積(規(guī)格100ML)小鼠脂肪間充質干細胞成軟骨誘導分化基礎培養(yǎng)基194mL97mL鈉 SodiumPyruvate200μL100μLITS添加物 ITS+supplement1mL*21mLTGF-β31mL*21mL抗壞血 AscorbicAcid600μL300μL脯氨 Proline200μL100μL Dexamethasone20μL10μL青鏈霉 Pennicillin-Streptomycin2mL1mL染色劑阿利辛藍染液                                                      10ML/5ML      注:各成分請根據試劑管上標簽標示溫度保存,。

人臍靜脈血來源內皮祖細胞培養(yǎng)基100mL人臍靜脈血來源內皮祖細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,,本產品可保持人臍靜脈血來源內皮祖細胞佳的生長狀態(tài),。本產品中已包含人臍靜脈血來源內皮祖細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,,可直接用于人臍靜脈血來源內皮祖細胞的體外培養(yǎng),。

DMEM高糖(含HEPES)500mL-

Reh細胞專用培養(yǎng)基125mL×4Reh細胞專用培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,,本產品可保持Reh細胞佳的生長狀態(tài),。本產品中已包含Reh細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,,可直接用于Reh細胞的體外培養(yǎng),。

RS1細胞專用培養(yǎng)基125mL×4RS1細胞專用培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,,本產品可保持RS1細胞佳的生長狀態(tài),。本產品中已包含RS1細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,,可直接用于RS1細胞的體外培養(yǎng),。

 


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