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人肺癌成纖維細(xì)胞

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更新時間:2025-04-09 10:53:01瀏覽次數(shù):201

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 肺癌組織
人肺癌成纖維細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:兔肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔肺動脈內(nèi)皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔肺動脈平滑肌細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔肺動脈外膜成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔II型肺泡上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人肺癌成纖維細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

肺癌組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自肺癌組織,;肺癌是常見的肺原發(fā)性惡性腫瘤,絕大多數(shù)肺癌起源于支氣管粘膜上皮,,故亦稱支氣管肺癌,。肺癌可向四周乃至全身擴散。肺癌發(fā)病率和死亡率增長快,,對人群健康和生命威脅大的惡性腫瘤之一,。近50年來許多國家都報道肺癌的發(fā)病,女性發(fā)病率占第二位,,死亡率占第二位,。肺癌的病因至今尚不明確,大量資料表明,,長期大量吸煙與肺癌的發(fā)生有非常密切的關(guān)系,。肺癌,其實不是一種病,,而是幾十種病的組合,,有多種亞型,多種特性,;根據(jù)肺癌細(xì)胞在顯微鏡下的形態(tài)特點,,可以初步分為兩種類型:小細(xì)胞肺癌(SCLC)15%和非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)85%。這兩種類型肺癌的生長特點,、擴散風(fēng)險和治療方案均不相同,。絕大多數(shù)肺癌是非小細(xì)胞肺癌,,約占85%。它又能進(jìn)一步被分為三類,,分別是:腺癌,,鱗癌和大細(xì)胞癌。其中腺癌是主要的類型,,約占非小細(xì)胞肺癌中的50%,。如果是不吸煙的女性患者,幾乎全部都是腺癌,。是肺癌組織中的癌相關(guān)成纖維細(xì)胞,,癌相關(guān)成纖維細(xì)胞(cancer associated fibroblast,CAF)在腫瘤微環(huán)境中的重要作用已受到廣泛的重視,。該細(xì)胞通過與癌細(xì)胞的直接接觸,、分泌多種因子以及對腫瘤基質(zhì)的改造,促進(jìn)腫瘤的發(fā)生,、發(fā)展,、轉(zhuǎn)移甚至耐藥性的發(fā)生,。隨著研究的深入,,有人提出CAF可能成為抗治療的新靶點。然而CAF的分化來源多樣,,相應(yīng)的形態(tài)和功能各異,,因此深入了解CAF的分化來源有利于更全面地認(rèn)識腫瘤發(fā)展的機制,為臨床治療提供理論依據(jù),,體外培養(yǎng)肺癌成纖維細(xì)胞對肺癌研究有重要意義,。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化后差速貼壁制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,,95%,;CO2,5%

1.png

實驗報告:

一,、分離與培養(yǎng):

二,、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化,;
   4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;

 

1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
   4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
   5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
   6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

回腸絨毛刷狀緣膜蛋白抗體 細(xì)胞色P450 4Z2P封閉多肽 

磷化腫瘤易感候選基因3抗體 半乳糖腦苷脂封閉多肽 

滑膜肉瘤X斷點蛋白8抗體 磷化表皮生長因子受體封閉多肽 

雄激受體相關(guān)蛋白24抗體 血清反應(yīng)因子輔助蛋白SAP2封閉多肽 

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 胞漿動力蛋白輕鏈1封閉多肽 

谷氨脫羧-65單克隆抗體 磷化絲裂原活化蛋白激3K9封閉多肽 

卷曲蛋白6抗體 G蛋白γ2封閉多肽 

防御β-118/β-defensin 118抗體 B淋巴細(xì)胞新型蛋白1封閉多肽 

活性氧物種調(diào)節(jié)因子1抗體 λ輕鏈封閉多肽 

NUDT18蛋白抗體 SH3YL1蛋白封閉多肽 

核孔蛋白50抗體 非活性雙特異性磷封閉多肽27封閉多肽 

糖蛋白激β亞基5抗體 CD2結(jié)合蛋白1封閉多肽 

轉(zhuǎn)錄因子相關(guān)蛋白NK1抗體 絲氨/蘇氨蛋白激LMTK3封閉多肽 

磷化心臟磷蛋白抗體 γ-微管蛋白復(fù)合物GCP3封閉多肽 

羧酯4A抗體 科凱恩氏綜合癥相關(guān)蛋白/早衰蛋白CSA封閉多肽 

英文名稱: SARS-CoV-2 () Nucleocapsid 磷化突觸后密度蛋白95封閉多肽 

突觸細(xì)胞粘附分子3抗體 肌動蛋白相關(guān)蛋白2/3亞型2封閉多肽 

英文名稱: COX4I1 整合結(jié)合性信號分子封閉多肽 
人肺癌成纖維細(xì)胞小鼠腸道干細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠腸道干細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠腸道干細(xì)胞佳的生長狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含小鼠腸道干細(xì)胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,可直接用于小鼠腸道干細(xì)胞的體外培養(yǎng),。

DMEM低糖(含HEPES,,不含鈉)500mL-

T/G HA-VSMC細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4T/G HA-VSMC細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,,本產(chǎn)品可保持T/G HA-VSMC細(xì)胞佳的生長狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含T/G HA-VSMC細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,,可直接用于T/G HA-VSMC細(xì)胞的體外培養(yǎng),。

兔脊髓神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)基100mL兔脊髓神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,,本產(chǎn)品可保持兔脊髓神經(jīng)元細(xì)胞佳的生長狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含兔脊髓神經(jīng)元細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,,可直接用于兔脊髓神經(jīng)元細(xì)胞的體外培養(yǎng),。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用,不得用于診斷,、治療,、臨床、家庭及其他用途。

大鼠視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,,本產(chǎn)品可保持大鼠視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,,可直接用于大鼠視乳頭星形膠質(zhì)細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠前列腺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠前列腺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,,本產(chǎn)品可保持大鼠前列腺成纖維細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠前列腺成纖維細(xì)胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,,可直接用于大鼠前列腺成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

NCI-H209 [H209]細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4NCI-H209 [H209]細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,,本產(chǎn)品可保持NCI-H209 [H209]細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含NCI-H209 [H209]細(xì)胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,,可直接用于NCI-H209 [H209]細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

 


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