化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
產品屬性：
| 產品名稱 | 規(guī)格 | 組織來源 |
| 雞卵泡顆粒細胞 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 雞卵泡組織 |
商品詳細介紹：
4.細胞簡介：
分離自雞卵泡組織,；成熟卵泡是卵巢的組織結構成分之一,，卵泡腔很大，卵丘很明顯,。卵泡內膜細胞緊靠卵泡顆粒層,，與顆粒層細胞之間有一層基膜相隔，內膜細胞呈多邊形,，胞質清亮,，胞核圓形，細胞間可見許多毛細血管,，外膜細胞位于最外層,，多呈梭形，與周圍結締組織分界不明顯,。卵泡(follicle)中卵母細胞四周有一層菱形或扁平細胞圍繞,，在卵泡開始發(fā)育、卵細胞成長的同時，周圍的菱形細胞變?yōu)榱⒎叫?，并由單層增生成復層,，因其細胞漿內含有顆粒，故稱為顆粒細胞,。初級卵泡的顆粒細胞為單層,；次級卵泡的顆粒細胞增至復層；成熟卵泡的顆粒細胞展開又變?yōu)閱螌?。顆粒細胞的胞核大而圓,，著色深，細胞的游離面有許多細長突起伸入放射帶的凹陷部,。
5.方法簡介：
實驗室分離采用先機械分離后膠原酶 - 聯(lián)合消化法,、并通過專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
6.質量檢測：
實驗室分離經(jīng)FSHR免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含F(xiàn)BS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
實驗報告：
| 一,、分離與培養(yǎng)： | 二,、免疫熒光鑒定： |
1、無菌條件下,，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將成1mm3左右大??； 2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復此步驟2-3次,，直至組織被消化； 4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),； 5、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min； 2,、PBS沖洗細胞2次，每次10min,，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min； 3,、PBS沖洗細胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min,； 4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,； 5,、PBS沖洗細胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h； 6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。 |
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO,，貨號21875-091)，90%,；優(yōu)質胎牛血清,，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%,。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清,，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存,。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度,。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞,，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
tPSA總前列腺特異抗原ELISA試劑盒 tPSA ELISA Kit 48T/96T
PCX足細胞標記蛋白/足盂蛋白ELISA試劑盒 PCX ELISA Kit 48T/96T
HIS組胺ELISA試劑盒 HIS ELISA Kit 48T/96T
H3F3A/H3.3A/H3F3/PP781H3F3B/H3.3B組蛋白H3.3ELISA試劑盒 Histone H3.3(H3F3A/H3.3A/H3F3/PP781H3F3B/H3.3B)ELISA kit 48T/96T
SETD7組蛋白賴氨酸N-甲基轉移酶SETD7ELISA試劑盒 SETD7 ELISA Kit 48T/96T
HDAC組蛋白去乙?；窫LISA試劑盒 HDAC ELISA Kit 48T/96T
HDAC3組蛋白去乙酰化酶3ELISA試劑盒 HDAC3 Elisa kit 48T/96T
HDAC2組蛋白脫乙?；?ELISA試劑盒 HDAC2 ELISA Kit 48T/96T
HAT組蛋白乙?；窫LISA試劑盒 HAT ELISA Kit 48T/96T
CTSC組織蛋白酶CELISA試劑盒 CTSC ELISA Kit 48T/96T
Cath G Ab組織蛋白酶G自身抗體ELISA試劑盒 Cath G Ab ELISA Kit 48T/96T
CTSH組織蛋白酶HELISA試劑盒 CTSH ELISA kit 48T/96T
CTSL1/CTSL組織蛋白酶L1ELISA試劑盒 Cathepsin L1 ELISA Kit 48T/96T
Cath Ab組織蛋白酶抗體ELISA試劑盒 Cath Ab ELISA Kit 48T/96T
HD組織蛋白去乙酰化酶ELISA試劑盒 HD ELISA Kit 48T/96T
大鼠肺大動脈內皮細胞 5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶
大鼠肺成纖維細胞 5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶
大鼠多巴胺神經(jīng)元細胞 5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶
大鼠大隱靜脈平滑肌細胞 5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶
大鼠大隱靜脈內皮細胞 5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶
大鼠成骨細胞 5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶
大鼠腸微血管內皮細胞 5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶
大鼠腸神經(jīng)嵴干細胞 5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶
大鼠腸平滑肌細胞 5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶
大鼠腸黏膜上皮細胞 5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶
大鼠腸巨噬細胞 5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶
大鼠腸靜脈內皮細胞 5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶
雞卵泡顆粒細胞大鼠腸動脈內皮細胞 5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶
大鼠腸道干細胞 5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶
大鼠表皮角質形成細胞 5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶
大鼠表皮角化細胞 5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶
化工儀器網(wǎng)