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詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性：
| 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 組織來源 |
| 雞卵泡顆粒細(xì)胞 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 雞卵泡組織 |
商品詳細(xì)介紹：
4.細(xì)胞簡介：
分離自雞卵泡組織,；成熟卵泡是卵巢的組織結(jié)構(gòu)成分之一，卵泡腔很大,，卵丘很明顯。卵泡內(nèi)膜細(xì)胞緊靠卵泡顆粒層,，與顆粒層細(xì)胞之間有一層基膜相隔,，內(nèi)膜細(xì)胞呈多邊形，胞質(zhì)清亮,，胞核圓形,，細(xì)胞間可見許多毛細(xì)血管，外膜細(xì)胞位于最外層,，多呈梭形,，與周圍結(jié)締組織分界不明顯。卵泡(follicle)中卵母細(xì)胞四周有一層菱形或扁平細(xì)胞圍繞,，在卵泡開始發(fā)育,、卵細(xì)胞成長的同時，周圍的菱形細(xì)胞變?yōu)榱⒎叫?，并由單層增生成?fù)層,，因其細(xì)胞漿內(nèi)含有顆粒，故稱為顆粒細(xì)胞,。初級卵泡的顆粒細(xì)胞為單層,；次級卵泡的顆粒細(xì)胞增至復(fù)層；成熟卵泡的顆粒細(xì)胞展開又變?yōu)閱螌?。顆粒細(xì)胞的胞核大而圓,，著色深，細(xì)胞的游離面有許多細(xì)長突起伸入放射帶的凹陷部,。
5.方法簡介：
實驗室分離采用先機械分離后膠原酶 - 聯(lián)合消化法,、并通過專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
6.質(zhì)量檢測：
實驗室分離經(jīng)FSHR免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含F(xiàn)BS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài),。
實驗報告：
| 一、分離與培養(yǎng)： | 二,、免疫熒光鑒定： |
1,、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,，然后用PBS將此組織塊清洗2次,，最后將成1mm3左右大小,； 2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s,，置37℃條件下消化10min,，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清,，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,； 3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液,，混懸10s,，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,，重復(fù)此步驟2-3次,，直至組織被消化； 4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,，1200r/min 離心10min，棄去上清,，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ,，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),； 5,、差速貼壁1h后,，吸出培養(yǎng)基,，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)； | 1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min； 2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min，然后在4℃條件下,，用0.1％Triton X-100透膜15min,； 3、PBS沖洗細(xì)胞2次,，每次10min,，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min,； 4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,； 5,、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min,，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗,， 37℃條件下放置1h； 6,、用PBS沖洗3次,，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。 |
操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO,，貨號21875-091)，90%,；優(yōu)質(zhì)胎牛血清,，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣,，95%,；二氧化碳，5%。 溫度：37℃,，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO,，現(xiàn)用現(xiàn)配,，液氮儲存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍,，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
tPSA總前列腺特異抗原ELISA試劑盒 tPSA ELISA Kit 48T/96T
PCX足細(xì)胞標(biāo)記蛋白/足盂蛋白ELISA試劑盒 PCX ELISA Kit 48T/96T
HIS組胺ELISA試劑盒 HIS ELISA Kit 48T/96T
H3F3A/H3.3A/H3F3/PP781H3F3B/H3.3B組蛋白H3.3ELISA試劑盒 Histone H3.3(H3F3A/H3.3A/H3F3/PP781H3F3B/H3.3B)ELISA kit 48T/96T
SETD7組蛋白賴氨酸N-甲基轉(zhuǎn)移酶SETD7ELISA試劑盒 SETD7 ELISA Kit 48T/96T
HDAC組蛋白去乙?；窫LISA試劑盒 HDAC ELISA Kit 48T/96T
HDAC3組蛋白去乙酰化酶3ELISA試劑盒 HDAC3 Elisa kit 48T/96T
HDAC2組蛋白脫乙?；?ELISA試劑盒 HDAC2 ELISA Kit 48T/96T
HAT組蛋白乙?；窫LISA試劑盒 HAT ELISA Kit 48T/96T
CTSC組織蛋白酶CELISA試劑盒 CTSC ELISA Kit 48T/96T
Cath G Ab組織蛋白酶G自身抗體ELISA試劑盒 Cath G Ab ELISA Kit 48T/96T
CTSH組織蛋白酶HELISA試劑盒 CTSH ELISA kit 48T/96T
CTSL1/CTSL組織蛋白酶L1ELISA試劑盒 Cathepsin L1 ELISA Kit 48T/96T
Cath Ab組織蛋白酶抗體ELISA試劑盒 Cath Ab ELISA Kit 48T/96T
HD組織蛋白去乙酰化酶ELISA試劑盒 HD ELISA Kit 48T/96T
大鼠肺大動脈內(nèi)皮細(xì)胞 5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶
大鼠肺成纖維細(xì)胞 5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶
大鼠多巴胺神經(jīng)元細(xì)胞 5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶
大鼠大隱靜脈平滑肌細(xì)胞 5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶
大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶
大鼠成骨細(xì)胞 5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶
大鼠腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞 5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶
大鼠腸神經(jīng)嵴干細(xì)胞 5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶
大鼠腸平滑肌細(xì)胞 5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶
大鼠腸黏膜上皮細(xì)胞 5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶
大鼠腸巨噬細(xì)胞 5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶
大鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞 5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶
雞卵泡顆粒細(xì)胞大鼠腸動脈內(nèi)皮細(xì)胞 5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶
大鼠腸道干細(xì)胞 5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶
大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞 5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶
大鼠表皮角化細(xì)胞 5×10^5Cells/T25培養(yǎng)瓶
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