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人表皮黑色素細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 11:02:08瀏覽次數(shù):246

聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 皮膚組織
人表皮黑色素細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:SMMC-7721 (人肝癌細(xì)胞)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶人肺微血管平滑肌5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶HIC (人小腸癌細(xì)胞)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶小鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人表皮黑色素細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

皮膚組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自皮膚組織,;表皮位于動(dòng)物皮膚的外層,由胚胎時(shí)期外胚層形成,,具有抗摩擦和抗損傷的作用,。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu),由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成,。從基底層到表面可分為五層,,即基底層、棘層,、顆粒層,、透明層和角質(zhì)層。黑色素細(xì)胞是皮膚產(chǎn)生和維持色素的主要細(xì)胞,,起源于神經(jīng)嵴,,后逐漸遷移到表皮和毛囊,。黑色素細(xì)胞的異常或功能的失常導(dǎo)致了一系列難治性色素性疾病的發(fā)生,,如,、黃褐斑等。表皮黑色素細(xì)胞主要分布于位于表皮的基底層,,與表皮細(xì)胞共同組成表皮黑素單位,,其主要功能是產(chǎn)生黑素小體保護(hù)皮膚免受損害。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的先中性dan白消化,、后胰dan白 - 膠原混合消化法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)S-100免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  梭形、多角形

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,,95%,;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一,、分離與培養(yǎng):

二,、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
   3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織被消化;
   4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
   5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
   4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
   5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
   6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲(chǔ)存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

髓鞘少樹突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白抗體 色氨相關(guān)蛋白3封閉多肽 

T淋巴細(xì)胞分化蛋白MAL2抗體 1號(hào)染色體開放閱讀框114封閉多肽 

RH家族B型糖蛋白R(shí)HBG抗體 烯醇化超家族成員1封閉多肽 

乳腺癌相關(guān)抗原BRCAA1抗體 辛酰基化腦腸肽28 

細(xì)胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白43抗體 白介17F封閉多肽 

CD8抗體 Smad蛋白相互作用蛋白1封閉多肽 

精神發(fā)育遲滯相關(guān)蛋白抗體 ZPLD1蛋白封閉多肽 

軟骨細(xì)胞蛋白39抗體 重組人白介15 (活性的, Tag free) 

張力蛋白4抗體 SHC4蛋白封閉多肽 

賴氨tRNA的連接抗體 G蛋白偶聯(lián)受體77封閉多肽 

拓普西異構(gòu)Ⅰ抗體 TATA盒結(jié)合蛋白相關(guān)因子TAF1C封閉多肽 

M期磷蛋白9抗體 胞漿蛋白SH3GL3封閉多肽 

黑皮質(zhì)受體5抗體 絲氨抑制劑B6封閉多肽 

膽汁鹽輸出泵抗體 磷化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD2封閉多肽 

端粒抑制因子PinX-1抗體 MED28蛋白封閉多肽 

激上調(diào)神經(jīng)腫瘤相關(guān)激抗體 硫角質(zhì)封閉多肽 

白細(xì)胞介-10受體a抗體 重組人BCMA蛋白 

淋巴增強(qiáng)因子-1抗體 鈣激活氯通道調(diào)節(jié)蛋白4封閉多肽 
人表皮黑色素細(xì)胞DMS 114 (人肺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)Waymouth's MB 752/1+10%FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

BT-20 (人乳腺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

8305C (人甲狀腺癌細(xì)胞(未分化)) (STR鑒定正確)MEM(含NEAA)+10% FBS+1%P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

BALL-1 (人B淋巴細(xì)胞急性白血病) (STR鑒定正確)RPMI-1640+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

SW579 [SW 579; SW-579] (人甲狀腺鱗癌細(xì)胞) (L15) (STR鑒定正確)Leibovitz's L-15+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠氣管平滑肌細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠毛囊細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

 


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