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人表皮黑色素細(xì)胞

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更新時(shí)間:2025-04-09 10:53:01瀏覽次數(shù):263

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 皮膚組織
人表皮黑色素細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:SMMC-7721 (人肝癌細(xì)胞)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶人肺微血管平滑肌5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶HIC (人小腸癌細(xì)胞)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶大鼠大隱靜脈內(nèi)皮細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶小鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

組織來(lái)源

人表皮黑色素細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

皮膚組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自皮膚組織,;表皮位于動(dòng)物皮膚的外層,由胚胎時(shí)期外胚層形成,具有抗摩擦和抗損傷的作用,。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu),由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層,,即基底層、棘層,、顆粒層,、透明層和角質(zhì)層。黑色素細(xì)胞是皮膚產(chǎn)生和維持色素的主要細(xì)胞,,起源于神經(jīng)嵴,,后逐漸遷移到表皮和毛囊。黑色素細(xì)胞的異?;蚬δ艿氖С?dǎo)致了一系列難治性色素性疾病的發(fā)生,,如、黃褐斑等,。表皮黑色素細(xì)胞主要分布于位于表皮的基底層,,與表皮細(xì)胞共同組成表皮黑素單位,其主要功能是產(chǎn)生黑素小體保護(hù)皮膚免受損害,。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的先中性dan白消化,、后胰dan白 - 膠原混合消化法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)S-100免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  梭形、多角形

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,,95%,;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一,、分離與培養(yǎng):

二,、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化,;
   4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
   5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
   6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

髓鞘少樹(shù)突膠質(zhì)細(xì)胞糖蛋白抗體 色氨相關(guān)蛋白3封閉多肽 

T淋巴細(xì)胞分化蛋白MAL2抗體 1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框114封閉多肽 

RH家族B型糖蛋白R(shí)HBG抗體 烯醇化超家族成員1封閉多肽 

乳腺癌相關(guān)抗原BRCAA1抗體 辛?;X腸肽28 

細(xì)胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白43抗體 白介17F封閉多肽 

CD8抗體 Smad蛋白相互作用蛋白1封閉多肽 

精神發(fā)育遲滯相關(guān)蛋白抗體 ZPLD1蛋白封閉多肽 

軟骨細(xì)胞蛋白39抗體 重組人白介15 (活性的, Tag free) 

張力蛋白4抗體 SHC4蛋白封閉多肽 

賴(lài)氨tRNA的連接抗體 G蛋白偶聯(lián)受體77封閉多肽 

拓普西異構(gòu)Ⅰ抗體 TATA盒結(jié)合蛋白相關(guān)因子TAF1C封閉多肽 

M期磷蛋白9抗體 胞漿蛋白SH3GL3封閉多肽 

黑皮質(zhì)受體5抗體 絲氨抑制劑B6封閉多肽 

膽汁鹽輸出泵抗體 磷化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD2封閉多肽 

端粒抑制因子PinX-1抗體 MED28蛋白封閉多肽 

激上調(diào)神經(jīng)腫瘤相關(guān)激抗體 硫角質(zhì)封閉多肽 

白細(xì)胞介-10受體a抗體 重組人BCMA蛋白 

淋巴增強(qiáng)因子-1抗體 鈣激活氯通道調(diào)節(jié)蛋白4封閉多肽 
人表皮黑色素細(xì)胞DMS 114 (人肺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)Waymouth's MB 752/1+10%FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

BT-20 (人乳腺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)MEM(含NEAA)+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

8305C (人甲狀腺癌細(xì)胞(未分化)) (STR鑒定正確)MEM(含NEAA)+10% FBS+1%P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

BALL-1 (人B淋巴細(xì)胞急性白血病) (STR鑒定正確)RPMI-1640+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

SW579 [SW 579; SW-579] (人甲狀腺鱗癌細(xì)胞) (L15) (STR鑒定正確)Leibovitz's L-15+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠氣管平滑肌細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠毛囊細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

 


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