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人角膜上皮細(xì)胞

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更新時間:2023-04-21 14:31:55瀏覽次數(shù):284

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 眼角膜組織
人角膜上皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:L929小鼠成纖維細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLL Wnt-3A小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLL Wnt-3A小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLMA-891小鼠乳腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLMA-891小鼠乳腺癌高轉(zhuǎn)移細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人角膜上皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

眼角膜組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自眼角膜組織,;角膜位于眼球前壁的一層透明膜,,約占纖維膜的前1/6,從后面看角膜呈正圓形,,從前面看為橫橢圓形,。角膜厚度各部分不盡相同,中央部薄,。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢,,如有外物接觸角膜,眼瞼便會不由自主地合上以保護眼睛。為了保持透明,,角膜并沒有血管,,透過外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣,。角膜分為五層,,由前向后依次為:上皮細(xì)胞層、前彈力層,、基質(zhì)層、后彈力層,、內(nèi)皮細(xì)胞層,。其主要功能如下:①角膜是的無血管的組織,具有透明的特性和合成許多蛋白的功能,,分三層細(xì)胞層,,外層即是上皮細(xì)胞;②角膜上皮細(xì)胞能參與先天性免疫,,能感應(yīng)病原體存在并發(fā)出信號從而激活角膜防御系統(tǒng),;③角膜上皮細(xì)胞能高效表達醛脫氫。角膜上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)對研究角膜的生理學(xué),、病理學(xué),、免疫學(xué)以及分子生物學(xué)都是極為重要的手段,常用于研究細(xì)胞代謝產(chǎn)物,、病毒感染,、各種生長因子和藥物對細(xì)胞生長的影響。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白-膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法,,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  上皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%;CO2,,5%

1.png

實驗報告:

一,、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
   3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織被消化,;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
   5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
   2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
   6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

組蛋白去甲基化Jarid1C抗體 甲狀腺球蛋白(牛)(進口) 人去甲腎上腺(NA) ELISA試劑盒

MDM1蛋白抗體 鋅指及同源結(jié)構(gòu)域蛋白1封閉多肽 人前列腺F(PGF)試劑盒 ELISA

突觸融合蛋白1B抗體 環(huán)指蛋白15封閉多肽 人前列腺E1(PGE1)ELISA檢測試劑盒

PE-Cy3標(biāo)記小鼠抗人CD20單克隆抗體 磷化組胺受體H1封閉多肽 人內(nèi)皮1(ET-1)ELISA Kit

四分子交聯(lián)體6抗體(四旋蛋白) 黑皮質(zhì)3受體封閉多肽 人促卵泡(FSH)ELISA試劑盒

磷化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白1抗體 激活受體樣激1封閉多肽 人游離β絨毛膜促性腺激(f-βhCG)試劑盒 ELISA

ras癌基因家族Rab8蛋白單克隆抗體 激活受體2B封閉多肽 人大內(nèi)皮(Big ET)ELISA檢測試劑盒

19號染色體開放閱&# 細(xì)胞粘合/腱糖蛋白-C/固生蛋白封閉多肽 人全段甲狀旁腺(i-PTH)ELISA Kit

2號染色體開放閱讀框63抗體 INO80C蛋白封閉多肽 人降鈣(CT)ELISA試劑盒

碳水化合物磺基轉(zhuǎn)移7抗體 磷化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白1封閉多肽 人促甲狀腺(TSH)試劑盒 ELISA

絲裂原活化蛋白激2抗體 NDUFS5蛋白封閉多肽 人(Cortisol)ELISA檢測試劑盒

線粒體核糖體蛋白L32抗體 過氧化物體生成蛋白7封閉多肽 人雌二醇(E2)ELISA Kit

PerCP標(biāo)記小鼠抗人CD22單克隆抗體 磷化環(huán)腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白轉(zhuǎn)錄共激活因子封閉多肽 人脫氫表雄酮硫酯(DHEA-S)ELISA試劑盒

2號染色體開放閱讀框68抗體 G蛋白γ13/Gγ13 封閉多肽 人睪酮(T)試劑盒 ELISA

磷化熱休克因子1抗體 細(xì)胞周期檢測點激1封閉多肽 人游離睪酮(F-TESTO)ELISA檢測試劑盒

英文名稱: GAPDH (CAEEL,Loading Control) 鋅指蛋白773封閉多肽 人雄烯二酮(ASD)ELISA Kit

精子卵子結(jié)合生成堿性螺旋蛋白2抗體 跨膜蛋白120A封閉多肽 人雌三醇(E3)ELISA試劑盒

強直性肌營養(yǎng)不良相關(guān)蛋白9抗體 骨硬化病相關(guān)跨膜蛋白1封閉多肽 人17羥孕酮(17-OHP)試劑盒 ELISA
人角膜上皮細(xì)胞人頰黏膜成纖維細(xì)胞英文名稱:人頰黏膜成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人根尖牙乳頭干細(xì)胞英文名稱:人根尖牙乳頭干細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人結(jié)膜下囊成纖維細(xì)胞英文名稱:人結(jié)膜下囊成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人胎盤微血管內(nèi)皮細(xì)胞英文名稱:人胎盤微血管內(nèi)皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人羊膜上皮細(xì)胞英文名稱:人羊膜上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞英文名稱:人胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

人胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞英文名稱:人胎盤間充質(zhì)干細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

 


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