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大鼠胸腺上皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 09:42:15瀏覽次數(shù):270

聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 胸腺組織
大鼠胸腺上皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:重因子細(xì)胞培養(yǎng)添加劑50ug重組人粒巨噬細(xì)胞集落刺激因子細(xì)胞培養(yǎng)添加劑10ug血管內(nèi)皮生長因子細(xì)胞培養(yǎng)添加劑10ug重組人白細(xì)胞介-2(凍干粉GMP級(jí))細(xì)胞培養(yǎng)添加劑100ug重組人白細(xì)胞介-2(凍干粉GMP級(jí))細(xì)胞培養(yǎng)添加劑1mg

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自胸腺組織,;胸腺是機(jī)體重要的淋巴器官,,其功能與免疫緊密相關(guān),,是T細(xì)胞分化,、發(fā)育,、成熟的場所,,還可以分泌胸腺激素及激素類物質(zhì),,具有內(nèi)分泌技能的器官,。胸腺上皮細(xì)胞和胸腺細(xì)胞是胸腺微環(huán)境的重要組成部分,其外,,胸腺上皮細(xì)胞組成了胸腺細(xì)胞不同發(fā)育階段的三維結(jié)構(gòu),,根據(jù)其在胸腺中位置不同,可分為皮質(zhì)胸腺上皮細(xì)胞和髓質(zhì)胸腺上皮細(xì)胞,。胸腺細(xì)胞的發(fā)育和成熟是通過在胸腺皮質(zhì)和髓質(zhì)上皮細(xì)胞的遷移過程中相互作用完成的,。此外,胸腺細(xì)胞通過皮質(zhì)胸腺上皮細(xì)胞介導(dǎo)的陽性選擇和髓質(zhì)胸腺上皮細(xì)胞介導(dǎo)的陰性選擇發(fā)育為能夠識(shí)別和耐受自身主要組織相容復(fù)合體和自身抗原的成熟T淋巴細(xì)胞,。胸腺上皮細(xì)胞是構(gòu)成胸腺微環(huán)境的主要成份,,其形態(tài)、分布和功能多樣,。表面抗原表達(dá)具有高度異質(zhì)性,,與胸腺細(xì)胞結(jié)合成不同類型復(fù)合體,部分胸腺上皮細(xì)胞相互排列構(gòu)成囊泡樣結(jié)構(gòu),。電鏡觀察,,可把胸腺上皮細(xì)胞分為3-6型,,用抗胸腺上皮細(xì)胞單克隆抗體熒光染色可把胸腺上皮細(xì)胞分為9種類型。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白-膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法,,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  上皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%,;CO2,,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠胸腺上皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

胸腺組織

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二,、免疫熒光鑒定:


   1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將成1mm3左右大小,;
   2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織被消化;
   4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
   5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
   4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
   5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
   6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

鋅指蛋白642抗體 NSUN5P1蛋白封閉多肽 

細(xì)胞因子受體樣因子1抗體 睪酮調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)和腫瘤抑制基因封閉多肽 

短鏈脫氫還原3抗體 癌基因RAS相關(guān)蛋白R(shí)ab25封閉多肽 

PE-Cy7標(biāo)記小鼠CD4單克隆抗體  蛋白偶聯(lián)受體55封閉多肽 

鋅指蛋白764抗體 eIF2B1蛋白封閉多肽 

纖維蛋白溶原抗體 神經(jīng)生長因子受體封閉多肽 

凋亡相關(guān)蛋白10抗體 SET結(jié)合蛋白1封閉多肽 

8號(hào)染色體開放閱讀框45抗體 甲狀腺過氧化物封閉多肽 

SGEF蛋白抗體 磷化馬鈴薯球蛋白(結(jié)節(jié)性硬化)封閉多肽 

血栓B2(一種新發(fā)現(xiàn)的抑癌基因)抗體 驅(qū)動(dòng)蛋白家族蛋白13B封閉多肽 

P5C還原2抗體 19號(hào)染色體開放閱讀框61封閉多肽 

線粒體核糖體蛋白L18抗體 G蛋白偶聯(lián)受體102封閉多肽 

磷化NF-κB活化激抗體 DNA指導(dǎo)的RNA聚合亞基C封閉多肽 

CD20樣蛋白1抗體 Meteorin神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞分化調(diào)節(jié)蛋白封閉多肽 

突觸結(jié)合蛋白5抗體 磷化絲裂原活化蛋白激激5封閉多肽 

味覺受體蛋白家族2亞基50抗體 重組人CA9蛋白 

磷化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤相關(guān)蛋白1抗體 尿路上皮特異蛋白1a封閉多肽 

磷化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD3抗體 富含亮氨重復(fù)神經(jīng)元3封閉多肽 
大鼠胸腺上皮細(xì)胞神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)基100mL神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,,本產(chǎn)品可保持神經(jīng)元細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含神經(jīng)元細(xì)胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,,可直接用于神經(jīng)元細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

M199(含雙抗)500mL-

TC-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4TC-1細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,,本產(chǎn)品可保持TC-1細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含TC-1細(xì)胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,,可直接用于TC-1細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

NCI-H196細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4NCI-H196細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,,本產(chǎn)品可保持NCI-H196細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含NCI-H196細(xì)胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,,可直接用于NCI-H196細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

T24 [T-24]細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4T24 [T-24]細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,,本產(chǎn)品可保持T24 [T-24]細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含T24 [T-24]細(xì)胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,,可直接用于T24 [T-24]細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

兔肌源性干細(xì)胞培養(yǎng)基100mL兔肌源性干細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,,本產(chǎn)品可保持兔肌源性干細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含兔肌源性干細(xì)胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,,可直接用于兔肌源性干細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

Ham's F-12(不含酚紅)500mL-
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲(chǔ)存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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