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小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

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聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 皮膚組織
小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:兔腦血管周細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔腦膜細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔腦皮層神經(jīng)元細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔海馬神經(jīng)元細(xì)胞原代細(xì)胞5×105兔脊髓神經(jīng)元細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

皮膚組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自皮膚組織;表皮位于動物皮膚的外層,由胚胎時(shí)期外胚層形成,,具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu),,由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成,。從基底層到表面可分為五層,即基底層,、棘層,、顆粒層,、透明層和角質(zhì)層。表皮角質(zhì)形成細(xì)胞是一種能合成角質(zhì)蛋白的上皮細(xì)胞,,此類細(xì)胞為表皮的主體,,由表皮深層始逐漸增殖、分化,,并在成為角化的角質(zhì)細(xì)胞中,,細(xì)胞核與細(xì)胞器消失,細(xì)胞亦失去生理功能而脫落,。未脫落部分對機(jī)體尚有保護(hù)作用,,故不必在洗擦身體時(shí)用力搓擦,使其過早脫失,。表皮角質(zhì)形成細(xì)胞主要分布于表皮基底層,,在上皮程序性死亡后,細(xì)胞產(chǎn)生角化并移向表皮,。體外培養(yǎng)的表皮角化細(xì)胞容易導(dǎo)致終末分化,,不能充分增殖。角質(zhì)形成細(xì)胞終產(chǎn)生角質(zhì)蛋白,,在其向角質(zhì)細(xì)胞演變過程中,,一般可以分為四層,即基底層,、棘層,、顆粒層以及角質(zhì)層。有人把前三層或前二層稱為生發(fā)層或馬爾匹基層,。此外,,在某些部位,特別在掌跖部位,,角質(zhì)層下方還可見到透明層,。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的先中性dan白消化、后胰dan白-膠原混合消化法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  上皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,,95%,;CO2,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一,、分離與培養(yǎng):

二,、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化,;
   4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
   5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;

 

1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
   2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
   6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

細(xì)胞分裂周期蛋白2亞型1抗體 淋巴細(xì)胞性白血病相關(guān)序列1封閉多肽 

英文名稱: ADK 半乳糖凝集2封閉多肽 

BMP內(nèi)皮細(xì)胞調(diào)節(jié)蛋白抗體 肌球蛋白7a/常染色體隱性耳聾蛋白2封閉多肽 

附睪特異蛋白8抗體 蛋白質(zhì)磷1B封閉多肽 

泛樣蛋白SUMO2激活抗體 核仁蛋白10封閉多肽 

烯脂酰水解抗體 8號染色體開放閱讀框76封閉多肽 

9號染色體開放閱讀框131抗體 有絲分裂阻滯缺陷2樣蛋白2封閉多肽 

鋅指蛋白139抗體 纖維細(xì)胞生長因子結(jié)合蛋白2封閉多肽 

轉(zhuǎn)化生長因子β4抗體 ATPH+轉(zhuǎn)運(yùn)溶體輔助蛋白2封閉多肽 

嗅覺感受器蛋白10G9抗體 G蛋白信號調(diào)節(jié)因子14封閉多肽 

熱休克蛋白70蛋白2抗體 呼吸道合胞病毒核蛋白封閉多肽 

STR蛋白抗體 磷化熱休克蛋白90β封閉多肽 

磷化微管相關(guān)蛋白抗體 白細(xì)胞共同抗原封閉多肽 

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體 THAP2蛋白封閉多肽 

造血轉(zhuǎn)錄因子PU.1抗體 DNAJB5蛋白封閉多肽 

FAM150A蛋白抗體 鋅指蛋白879封閉多肽 

防凍蛋白IV型 (Danio rerio) 抗體 ATP結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)家族蛋白11封閉多肽 

磷脂酰絲氨脫羧PISD抗體 氨基末端激3封閉多肽 
小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞HSC-T6細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4HSC-T6細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持HSC-T6細(xì)胞佳的生長狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含HSC-T6細(xì)胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,可直接用于HSC-T6細(xì)胞的體外培養(yǎng),。

小鼠羊膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠羊膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠羊膜上皮細(xì)胞佳的生長狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含小鼠羊膜上皮細(xì)胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,可直接用于小鼠羊膜上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng),。

小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞佳的生長狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,可直接用于小鼠結(jié)腸平滑肌細(xì)胞的體外培養(yǎng),。

人滑膜細(xì)胞培養(yǎng)基100mL人滑膜細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持人滑膜細(xì)胞佳的生長狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含人滑膜細(xì)胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,可直接用于人滑膜細(xì)胞的體外培養(yǎng),。

大鼠心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持大鼠心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞佳的生長狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含大鼠心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,可直接用于大鼠心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng),。

小鼠外周血樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)培養(yǎng)基100mL小鼠外周血樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠外周血樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)佳的生長狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含小鼠外周血樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,可直接用于小鼠外周血樹突狀細(xì)胞(未成熟DC細(xì)胞)的體外培養(yǎng),。

McCoy's 5A(不含酚紅)500mL-

 


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