詳細介紹
規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 人骨髓單個核細胞 |
組織來源 | 骨髓 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
4.細胞簡介:
分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,,位于身體的許多骨骼內(nèi),。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓,。紅骨髓能制造紅細胞,、血小板和各種白細胞,。血小板有止血作用,,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,,包括細菌、病毒等,;某些淋巴細胞能制造抗體,。因此,骨髓不但是造血器官,,它還是重要的免疫器官,。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,,是一種海綿狀的組織,,能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓,。出生時,,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,,脂肪細胞增多,,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓,。骨髓單個核細胞是骨髓中具有單個核的細胞,,包括淋巴細胞和單核細胞。注意這里是(mononuclear cell)單個核細胞,,而不是(Monocyte)單核細胞,。單個核細胞的體積,、形態(tài)和比重與骨髓其他細胞不同,利用一定比例聚蔗糖和鈉形成的等滲溶液作密度梯度離心,,使一定密度的細胞按相應(yīng)密度梯度分布,,可將各種血細胞與單個核細胞分離。
5.方法簡介:
實驗室分離的采用取骨髓,、通過密度梯度離心法制備而來制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
6.質(zhì)量檢測:
實驗室分離的經(jīng)檢測,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
7.培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 半貼壁半懸浮
細胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%胰dan白
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
運輸和保存:
視天氣狀況和運輸距離遠近,,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行,。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸,;收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng),,如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月,。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸,;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,,如懸浮的細胞較多,,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
收到如何處理:
1,、首先,,觀察培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有,,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2,、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),。因運輸問題,,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3,、仔細閱讀細胞說明書,,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。
4,、靜置完成后,,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢,、拍照,,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照,、記錄細胞生長狀態(tài)。
5,、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,,可正常傳代;若未超過80%,,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,,瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時,,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),,補加培養(yǎng)基至5ml,;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作,。
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