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大鼠乳腺成纖維細胞

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更新時間:2023-04-23 11:00:00瀏覽次數(shù):274

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

產品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 乳腺組織
大鼠乳腺成纖維細胞的相關產品:HSPC-1 (人造血干細胞)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶HLF-a (人肺細胞)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶兔子宮成纖維細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶CCRF-CEM [CCRF CEM] (人急性淋巴細胞白血病T淋巴細胞) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶大鼠陰莖白膜成纖維細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠乳腺成纖維細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

乳腺組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自乳腺組織;乳腺位于皮下淺筋膜的淺層與深層之間,淺筋膜伸向乳腺組織內形成條索狀的小葉間隔,,一端連于胸肌筋膜,另一端連于皮膚,將乳腺腺體固定在胸部的皮下組織之中。乳腺是哺乳動物少數(shù)可以重復經歷生長,、功能分化和退化過程的器官之一,。纖維結締組織伸入乳腺組織之間,,形成許多間隔,這些纖維結締組織對乳房起固定作用,,而纖維結締組織是由成纖維細胞構成的,。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,,輪廓清楚,,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,,核仁大而明顯,。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化,;成纖維細胞對不同程度的細胞變性,、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的乳腺成纖維細胞呈圓形,、折光性良好,,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,,其中部分開始伸出偽足,,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁,,伸展成梭形,,胞核清晰,分布較均勻,,散在生長,,不聚集成團;細胞生長迅速,,5-7天即呈融合狀態(tài),,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,,平坦,、胞體較大,細胞質透明,,細胞核較大,,呈橢圓形,顏色淡,。細胞融合,,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化法結合差速貼壁法制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右,;3代以內狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%,;CO2,,5%

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二,、免疫熒光鑒定:


   1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將成1mm3左右大小,;
   2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復此步驟2-3次,,直至組織被消化;
   4,、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
   5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
   3、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min,;
   4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;
   5,、PBS沖洗細胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
   6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,,90%,;優(yōu)質胎牛血清,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲存,。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

內質網脂質轉運相關蛋白2抗體 ZNHIT2蛋白封閉多肽 

磷脂酰肌醇激(PI3Kβ)抗體 WDR91蛋白封閉多肽 

低分子量神經絲蛋白單克隆抗體 神經叢蛋白A3封閉多肽 

血小板衍化生長因子γ抗體 19號染色體開放閱讀框22封閉多肽 

神經突觸粘附樣分子4抗體 精氨加壓受體2封閉多肽 

FAM134A蛋白抗體 結構蛋白家族1封閉多肽 

磷化突觸融合蛋白1(Ser14)抗體 皮屑樣蛋白2封閉多肽 

磷化細胞核因子抗體 CD209b封閉多肽 

ETV3蛋白抗體 蛋白磷1調節(jié)亞單位18封閉多肽 

CD20單克隆抗體 KIAA0664蛋白封閉多肽 

多核苷磷化蛋白抗體 雙特異性磷封閉多肽18封閉多肽 

TRIM35蛋白抗體 樣蛋白1封閉多肽 

SCRIBBLE蛋白抗體 甲基化P53(Mono Methyl Lys370)封閉多肽 

交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 核突觸蛋白-γ封閉多肽 

肌球蛋白重鏈9抗體 環(huán)指蛋白47封閉多肽 

微管相關蛋白2抗體 原鈣粘蛋白γC3封閉多肽 

腦蛋白4抗體 神經粘蛋白封閉多肽 

3號染色體開放閱讀框70抗體 組氨性磷結構域蛋白2A封閉多肽 
大鼠乳腺成纖維細胞小鼠口腔黏膜成纖維細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠肺大靜脈平滑肌細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

INS-1 (大鼠胰島細胞瘤細胞) (種屬鑒定正確)RPMI-1640+10% FBS+50μmol/L β-mercaptoethanol+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

雞小腸黏膜上皮細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

BNL 1ME A.7R.1 (小鼠肝上皮細胞)DMEM+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠腸神經嵴干細胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

Hepa 1-6 (小鼠肝癌細胞) (STR鑒定正確)DMEM+10% FBS+1mM Sodium Pyruvate+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

 


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