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大鼠肺血管平滑肌細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 10:23:33瀏覽次數(shù):243

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 肺組織
大鼠肺血管平滑肌細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:人臍帶血造血干細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶人子宮平滑肌細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶小鼠前列腺上皮細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶大鼠牙齦成纖維細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶大鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠肺血管平滑肌細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

肺組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自肺組織;肺是機(jī)體的呼吸器官,位于胸腔,,左右各一,覆蓋于心之上,。肺有分葉,,左二右三,共五葉,。肺經(jīng)肺系(指氣管,、支氣管等)與喉、鼻相連,故稱喉為肺之門戶,,鼻為肺之外竅,。肺血管平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,,細(xì)胞形態(tài)大小不一,,呈梭形、不規(guī)則形,、三角形或扇形,,核卵圓形、居中,;2周后細(xì)胞匯合,,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,,有分枝狀突起,,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏,;細(xì)胞密度低時(shí),,常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),,則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn),。肺血管平滑肌細(xì)胞主要功能:①細(xì)胞表面表達(dá)介質(zhì)(ICAM-1和VCAM-1)參與血管壁炎癥反應(yīng);②是多數(shù)重要?jiǎng)用}疾病的靶細(xì)胞,。肺血管平滑肌細(xì)胞與主要病生理變化:①平滑肌增生易致肺動(dòng)脈高壓,;②先天性肺動(dòng)脈狹窄;③肺動(dòng)脈栓塞,。血管平滑肌細(xì)胞的加速生長(zhǎng)潛能是血管疾病進(jìn)展的關(guān)鍵因素,,新研究表明血管平滑肌細(xì)胞表達(dá)的ICAM-1和VCAM-1能促進(jìn)血管壁的炎癥反應(yīng),并且與血管疾病的發(fā)展及穩(wěn)定性有關(guān),。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白 - 膠原聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%,;CO2,,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲(chǔ)存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二,、免疫熒光鑒定:


   1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將成1mm3左右大小,;
   2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織被消化;
   4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
   5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
   3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
   6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

泛結(jié)構(gòu)域蛋白1抗體 FAM98C蛋白封閉多肽 

突觸小泡蛋白樣蛋白1抗體 細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激5封閉多肽 

酪蛋白激1γ2抗體 吸引封閉多肽 

FAM101B蛋白抗體 碳?xì)溻c協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A4突變型封閉多肽 

白介-22抗體 性鈣調(diào)蛋白3封閉多肽 

RAB6蛋白抗體 卵黃狀黃斑病蛋白4封閉多肽 

PYROXD2蛋白抗體 環(huán)腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白封閉多肽 

范可尼貧血組蛋白A抗體 凋亡相關(guān)蛋白激3封閉多肽 

亮氨拉鏈樣轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子1抗體 Runx3封閉多肽 

產(chǎn)氣莢膜梭菌(魏氏梭菌)磷脂C抗體 鉀電壓閥門通道混合器相關(guān)亞家族成員7封閉多肽 

嘌呤元結(jié)合蛋白G抗體 人類乳頭狀瘤病毒18 E6封閉多肽 

磷化甲狀腺受體相關(guān)蛋白220抗體 FOXJ3蛋白封閉多肽 

磷化整合β3/CD61抗體 叉頭蛋白O1/O3/O4封閉多肽 

角蛋白相關(guān)蛋白11-1抗體 P73腫瘤抑制基因封閉多肽 

硫辛酰連接抗體 磷羧化2封閉多肽 

連接粘附分子C抗體 四連接同源蛋白FJX1封閉多肽 

英文名稱: Beta Actin (CAEEL,Loading Control) 核黃轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2封閉多肽 

G蛋白結(jié)合蛋白7抗體 磷化ZCWCC1封閉多肽 
大鼠肺血管平滑肌細(xì)胞R 1610細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4R 1610細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持R 1610細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含R 1610細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,,無需添加任何成分,可直接用于R 1610細(xì)胞的體外培養(yǎng),。

T98G細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4T98G細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持T98G細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含T98G細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,,無需添加任何成分,可直接用于T98G細(xì)胞的體外培養(yǎng),。

HFSF細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4HFSF細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持HFSF細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含HFSF細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,,無需添加任何成分,,可直接用于HFSF細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

DMEM無糖(不含鈉)500mL-

DMEM高糖(不含L-,,含雙抗)500mL-

兔腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL兔腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持兔腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含兔腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,,無需添加任何成分,可直接用于兔腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng),。

MRC-5細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4MRC-5細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持MRC-5細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含MRC-5細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,,無需添加任何成分,可直接用于MRC-5細(xì)胞的體外培養(yǎng),。


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