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小鼠骨骼肌成纖維細(xì)胞

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更新時間:2023-04-23 10:22:33瀏覽次數(shù):288

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 骨骼肌組織
小鼠骨骼肌成纖維細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:SW480 [SW-480] (人結(jié)腸癌細(xì)胞) (DMEM) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶MDA-MB-435S (人乳腺癌細(xì)胞/人黑瘤細(xì)胞) (M14污染細(xì)胞系,)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶大鼠腸黏膜上皮細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶SCC-25 [SCC 25; SCC25] (人舌鱗癌細(xì)胞)(STR鑒定正確)1×10?c

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自四肢肌肉組織,;骨骼肌又稱橫紋肌,,肌肉中的一種,,約占全身重量的40%,。骨骼肌纖維為長柱形的多核細(xì)胞,,肌膜的外面有基膜緊密貼附,。屬于橫紋肌,,橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌,其中骨骼肌主要分布于四肢,。每塊肌肉都是具有一定形態(tài),、結(jié)構(gòu)和功能的器官,有豐富的血管,、淋巴分布,,在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張,進(jìn)行隨意運動,。肌肉可根據(jù)共形狀,、大小、位置,、起止點,、纖維方向和作用等命名。依形態(tài)命名的如斜方肌,、菱形肌,、三角肌,、梨狀肌等。骨骼肌成纖維細(xì)胞呈纖維狀,,不分支,,有明顯橫紋,核很多,,且都位于細(xì)胞膜下方,。骨骼肌間質(zhì)中有很多成纖維細(xì)胞。成纖維細(xì)胞是結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,,由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來,。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),,其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯,。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,,在一定條件下,,它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,,懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,,表現(xiàn)為小的突起,;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,,胞核清晰,,分布較均勻,,散在生長,,不聚集成團(tuán);細(xì)胞排列緊密,,有的交叉重疊生長,,平坦、胞體較大,,細(xì)胞質(zhì)透明,,細(xì)胞核較大,,呈橢圓形,顏色淡,。細(xì)胞融合,,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%,;CO2,,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠骨骼肌成纖維細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

骨骼肌組織

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二,、免疫熒光鑒定:


   1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將成1mm3左右大小,;
   2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織被消化,;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
   5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
   3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
   6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

骨形態(tài)發(fā)生抑制蛋白SOST抗體 Crk p38封閉多肽  

細(xì)胞色C氧化蛋白7B2抗體 重組小鼠嗜鉻粒A蛋白 

ANKLE2蛋白抗體 突觸結(jié)合蛋白1樣2封閉多肽 

乳鐵蛋白單克隆抗體 剪接體相關(guān)蛋白62封閉多肽 

ZRANB3蛋白抗體 磷化絲氨/蘇氨蛋白激MARK3封閉多肽 

視網(wǎng)膜鈉/鉀/鈣交換體2抗體 磷化DNA依賴性蛋白激封閉多肽 

磷化p21蛋白抗體 磷化活化復(fù)制因子2封閉多肽 

膽汁結(jié)合蛋白DDH2抗體 精氨2封閉多肽 

英文名稱: SARS-CoV-2 Spike Protein S1 RAB3-GTP激活蛋白催化亞單位1封閉多肽 

結(jié)腸癌抗原16抗體 突觸結(jié)合蛋白12封閉多肽 

羅伯茨綜合征相關(guān)蛋白抗體 磷化轉(zhuǎn)化生長因子β活化激1封閉多肽 

CD307d蛋白抗體 肝癌衍生生長因子2封閉多肽 

轉(zhuǎn)錄因子Tbx3抗體 非霍奇金淋巴瘤重復(fù)蛋白2封閉多肽 

磷脂C樣蛋白2抗體 自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3A/3B封閉多肽 

葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白3抗體 穿孔封閉多肽 

泛激4抗體 富含亮氨重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白7封閉多肽 

20號染色體開放閱讀框7抗體 溶質(zhì)載體家族25成員19封閉多肽 

包含氧化還原的WW域抗體 粘附分子IgG樣結(jié)構(gòu)域蛋白1封閉多肽 
小鼠骨骼肌成纖維細(xì)胞HBE細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4HBE細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,,本產(chǎn)品可保持HBE細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含HBE細(xì)胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,,可直接用于HBE細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠氣管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠氣管平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,,本產(chǎn)品可保持大鼠氣管平滑肌細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠氣管平滑肌細(xì)胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,,可直接用于大鼠氣管平滑肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

小鼠牙齦成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠牙齦成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,,本產(chǎn)品可保持小鼠牙齦成纖維細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含小鼠牙齦成纖維細(xì)胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,,可直接用于小鼠牙齦成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng)。本產(chǎn)品僅供進(jìn)一步科研使用,,不得用于診斷,、治療、臨床,、家庭及其他用途,。

大鼠子宮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠子宮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,,本產(chǎn)品可保持大鼠子宮成纖維細(xì)胞佳的生長狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含大鼠子宮成纖維細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,,可直接用于大鼠子宮成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng),。

MLO-Y4 [MLOY4]細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4MLO-Y4 [MLOY4]細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,,本產(chǎn)品可保持MLO-Y4 [MLOY4]細(xì)胞佳的生長狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含MLO-Y4 [MLOY4]細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,,可直接用于MLO-Y4 [MLOY4]細(xì)胞的體外培養(yǎng),。

J82細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4J82細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持J82細(xì)胞佳的生長狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含J82細(xì)胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,可直接用于J82細(xì)胞的體外培養(yǎng),。

H-4-II-E [H4-II-E]細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4H-4-II-E [H4-II-E]細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持H-4-II-E [H4-II-E]細(xì)胞佳的生長狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含H-4-II-E [H4-II-E]細(xì)胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,可直接用于H-4-II-E [H4-II-E]細(xì)胞的體外培養(yǎng),。
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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