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小鼠肺微血管內(nèi)皮細胞

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更新時間:2025-04-09 10:53:01瀏覽次數(shù):302

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 肺組織
小鼠肺微血管內(nèi)皮細胞的相關產(chǎn)品:人脂肪干細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基100ML人脂肪干細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500ML大鼠海綿體內(nèi)皮細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基100ML大鼠海綿體內(nèi)皮細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基500ML雞骨骼肌細胞永生化細胞專用培養(yǎng)基細胞培養(yǎng)基100ML

詳細介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠肺微血管內(nèi)皮細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

肺組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自肺組織,;肺是機體的呼吸器官,,位于胸腔,左右各一,,覆蓋于心之上,。肺有分葉,左二右三,,共五葉。肺經(jīng)肺系(指氣管,、支氣管等)與喉,、鼻相連,故稱喉為肺之門戶,,鼻為肺之外竅,。微血管內(nèi)皮細胞密切參與包括再生、發(fā)育,、傷口愈合等一系列生理及炎癥反應,。細胞呈梭形或多角形,形成單層后呈鵝卵石樣或鋪路石樣排列,。肺微血管內(nèi)皮細胞構成半選擇性屏障,,該屏障對于肺氣體交換,調節(jié)液體和可溶物在血液與肺間質之間的流動具有重要意義,。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用組織貼塊法并結合內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測:

實驗室分離的經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  內(nèi)皮細胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%,;CO2,,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,,90%;優(yōu)質胎牛血清,,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

實驗報告:

一,、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復此步驟2-3次,直至組織被消化,;
   4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
   5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
   2、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
   3,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細胞30min,;
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;
   5、PBS沖洗細胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
   6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

免疫球蛋白λ輕鏈恒定區(qū)1抗體 腦蛋白44封閉多肽 小鼠己糖激(HK)ELISA檢測試劑盒

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小鼠肺微血管內(nèi)皮細胞小鼠腦動脈平滑肌細胞英文名稱:小鼠腦動脈平滑肌細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠神經(jīng)干細胞英文名稱:小鼠神經(jīng)干細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠腦血管成纖維細胞英文名稱:小鼠腦血管成纖維細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠DRG神經(jīng)元細胞英文名稱:小鼠DRG神經(jīng)元細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠下丘腦神經(jīng)元細胞英文名稱:小鼠下丘腦神經(jīng)元細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠背根神經(jīng)節(jié)細胞英文名稱:小鼠背根神經(jīng)節(jié)細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

小鼠三叉神經(jīng)星形膠質細胞英文名稱:小鼠三叉神經(jīng)星形膠質細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告


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