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人臍靜脈平滑肌細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-23 09:34:11瀏覽次數(shù):303

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 臍帶組織
人臍靜脈平滑肌細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:MEGM kit CC-3150(A+B)細(xì)胞培養(yǎng)基500mL+4mLBEGM kit   CC-3170(A+B)細(xì)胞培養(yǎng)基500mL+4.2mLMCDB 105 培養(yǎng)基(含NaHCO3 1.5g/L)細(xì)胞培養(yǎng)基500mL霍亂毒細(xì)胞培養(yǎng)添加劑500uL馬血清(國產(chǎn))細(xì)胞培養(yǎng)添加劑200mL

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人臍靜脈平滑肌細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

臍帶組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自臍帶組織,;它是臍靜脈的重要結(jié)構(gòu)組成細(xì)胞之一,,在機(jī)體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用,。臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu),,臍帶中通過尿膜的血管即臍動(dòng)脈和臍靜脈,,卵黃囊的血管即臍腸系膜動(dòng)脈及臍腸系膜靜脈,。在子宮中,,子宮動(dòng)脈在胎盤的母體部分出的毛細(xì)血管,與胎盤的子體部胎兒毛細(xì)血管靠近,,在此處母體和胎兒的血液間進(jìn)行CO2和O2,,代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營養(yǎng)物質(zhì)的交換。臍動(dòng)脈將胎兒產(chǎn)生的廢物運(yùn)送至胎盤,,臍靜脈將O2和營養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運(yùn)送給胎兒,。血管平滑肌是許多重大血管疾病的細(xì)胞基礎(chǔ);血管平滑肌細(xì)胞的異常增加的生長潛力在血管疾病發(fā)生過程中起決定作用,。由于臍帶是分娩過程中的廢棄物,,同時(shí)從臍帶中分離人臍靜脈平滑肌細(xì)胞方法相對(duì)成熟,使得體外培養(yǎng)的臍靜脈平滑肌細(xì)胞作為研究血管的模型細(xì)胞,。臍靜脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,,可見細(xì)胞貼壁伸展,,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形,、不規(guī)則形,、三角形或扇形,核卵圓形,、居中,;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,,胞漿豐富,,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,,高低起伏,;細(xì)胞密度低時(shí),常交織成網(wǎng)狀,;密度高時(shí),,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,,4-6天即可匯合,,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白 - 膠原聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%,;CO2,,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二,、免疫熒光鑒定:


   1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將成1mm3左右大小,;
   2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織被消化;
   4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
   5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1,、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
   3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
   6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲(chǔ)存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

髓鞘蛋白P0樣蛋白2抗體 PGAM2(C端)封閉多肽 

腫瘤壞死因子配體超家族成員13B抗體 間變型淋巴瘤激封閉多肽 

信號(hào)通路Wnt4抗體 重組人脂蛋白磷脂A2蛋白 

KIAA1614蛋白抗體 鉀依賴鈉鈣交換蛋白6封閉多肽 

瞬時(shí)受體電位離子通道蛋白/M亞家族抗體 絲裂原活化蛋白激3K10封閉多肽  

SH3RF3蛋白抗體 基質(zhì)交感分子1封閉多肽 

周期T2抗體 FMNL2蛋白封閉多肽 

缺氧誘導(dǎo)因子脯氨酰4羥化抗體 維甲受體RAR α/RAR α封閉多肽 

TBC結(jié)構(gòu)域家族D9B蛋白抗體 旁瘤抗原MA1封閉多肽 

磷化G氨基丁B型受體2抗體 FAM3D蛋白封閉多肽 

環(huán)指蛋白35抗體 細(xì)胞因子受體樣因子3封閉多肽 

神經(jīng)細(xì)胞PAS結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體 白介22受體結(jié)合蛋白封閉多肽 

Muellerian繆勒管激抑制因子單克隆抗體 重組人神經(jīng)元特異性烯醇化/γ 烯醇化蛋白 

有絲分裂激B抗體 20號(hào)染色體開放閱讀框186封閉多肽 

阿爾茨海默病淀粉樣蛋白相關(guān)膠原蛋白抗體 鱗狀細(xì)胞癌相關(guān)蛋白封閉多肽 

英文名稱: AHA3 天冬酰胺合成 

甲型流感病毒血凝2抗體 1號(hào)染色體開放閱讀框228封閉多肽 

DNA修復(fù)蛋白GIYD2抗體 脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)2型蛋白封閉多肽 
人臍靜脈平滑肌細(xì)胞F9細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4F9細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測(cè)試,,本產(chǎn)品可保持F9細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含F(xiàn)9細(xì)胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,,可直接用于F9細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

MEM (含NEAA)(2X)-

大鼠心臟微血管周細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠心臟微血管周細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測(cè)試,,本產(chǎn)品可保持大鼠心臟微血管周細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠心臟微血管周細(xì)胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,,可直接用于大鼠心臟微血管周細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

Renca [RenCa]細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4Renca [RenCa]細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測(cè)試,,本產(chǎn)品可保持Renca [RenCa]細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含Renca [RenCa]細(xì)胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,,可直接用于Renca [RenCa]細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

豬脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基100mL豬脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測(cè)試,,本產(chǎn)品可保持豬脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含豬脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,,可直接用于豬脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

SP2/0-Ag14 [SP2/0]細(xì)胞專用培養(yǎng)基125mL×4SP2/0-Ag14 [SP2/0]細(xì)胞專用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過長期測(cè)試,,本產(chǎn)品可保持SP2/0-Ag14 [SP2/0]細(xì)胞佳的生長狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含SP2/0-Ag14 [SP2/0]細(xì)胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,,可直接用于SP2/0-Ag14 [SP2/0]細(xì)胞的體外培養(yǎng),。

 


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