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人退行性椎間盤(pán)髓核細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 15:06:39瀏覽次數(shù):286

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 椎間盤(pán)組織
人退行性椎間盤(pán)髓核細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:小鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基100ML小鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML小鼠卵巢顆粒細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基100ML小鼠卵巢顆粒細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞永生化細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基100ML

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

人退行性椎間盤(pán)髓核細(xì)胞分離退行性椎間盤(pán)組織,;椎間盤(pán)是位于脊柱兩椎體之間,,分為中央部的髓核,,富于彈性的膠狀物質(zhì),;周圍部的纖維環(huán),,由多層纖維軟骨環(huán)按同心圓排列,。上下有軟骨板,,是透明軟骨復(fù)蓋于椎體上,,下面骺環(huán)中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來(lái),。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構(gòu)成,,位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊,,使纖維環(huán)成為堅(jiān)實(shí)的組織,,能承受較大的彎曲和扭轉(zhuǎn)負(fù)荷,。髓核,是乳白色半透明膠狀體,,富于彈性,,為椎間盤(pán)結(jié)構(gòu)的一部分,位于兩軟骨板與纖維環(huán)之間,。由縱橫交錯(cuò)的纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)即軟骨細(xì)胞和蛋白多糖黏液樣基質(zhì)構(gòu)成的彈性膠凍物質(zhì),。嬰幼兒時(shí)期的髓核含水量為80%-90%,即使到了老年,,其含水量也在70%上下,。髓核在出生時(shí)體積大而松散,位于椎間盤(pán)的中央,,至成年時(shí)位置移至椎間盤(pán)的中后部,;在成年以前構(gòu)成髓核的主要物質(zhì)是大量蛋白多糖復(fù)合體、膠原纖維和纖維軟骨,,隨著年齡的增長(zhǎng),,髓核中的蛋白多糖解聚增多,水分逐漸減少,,膠原增粗并逐漸被纖維軟骨所替代,。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原-中性dan白混合消化法并結(jié)合軟骨細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    3-4天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  梭形,、多角形

傳代特性  可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%,;CO2,,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

人退行性椎間盤(pán)髓核細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

椎間盤(pán)組織

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1,、無(wú)菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
   3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織被消化,;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
   5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
   3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
   6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

連接蛋白3抗體 細(xì)胞表面趨化因子受體5封閉多肽 小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA檢測(cè)試劑盒

7號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框46抗體 鋅指蛋白801封閉多肽 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF) ELISA Kit

干擾誘導(dǎo)的雙鏈RNA活化蛋白激單克隆抗體 FBXL12蛋白封閉多肽 小鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)ELISA試劑盒

中腦核仁蛋白抗體 5號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框36封閉多肽 小鼠髓過(guò)氧化物(MPO)試劑盒 ELISA

甲狀腺激轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白/單羧轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白7/8抗體 FAM162B蛋白封閉多肽 小鼠顆粒B(Gzms-B)ELISA檢測(cè)試劑盒

AF750標(biāo)記小鼠抗人CD34單克隆抗體 SPRED2蛋白封閉多肽 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體1(VEGFR-1/Flt1)ELISA Kit

長(zhǎng)鏈脂肪延長(zhǎng)長(zhǎng)ELOVL5抗體 19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框44封閉多肽 小鼠顆粒A(Gzms-A)ELISA試劑盒

過(guò)氧化物8抗體 5-羥色胺受體1A封閉多肽 小鼠淋巴細(xì)胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)試劑盒 ELISA

DTX1抗體 腎細(xì)胞癌下調(diào)蛋白1封閉多肽 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體2(VEGFR-2/Flk-1)ELISA檢測(cè)試劑盒

血紅蛋白ζ鏈/Hemoglobin ζ 抗體 Bax封閉多肽 小鼠末端補(bǔ)體復(fù)合物C5b-9(TCC C5b-9)ELISA Kit

組織C抗體 溶質(zhì)載體家族25成員42封閉多肽 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體-3(VEGFR-3/Flt-4)ELISA試劑盒

神經(jīng)內(nèi)分泌特異性蛋白2抗體 血小板源性生長(zhǎng)因子A相關(guān)蛋白2封閉多肽 小鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)試劑盒 ELISA

G蛋白偶聯(lián)受體C5B抗體 原鈣粘蛋白γA1封閉多肽 小鼠腎(Renin)ELISA檢測(cè)試劑盒

S轉(zhuǎn)移A3抗體 視神經(jīng)細(xì)胞相關(guān)蛋白/早老結(jié)合蛋白封閉多肽 小鼠α2抗纖溶(α2-AP)ELISA Kit

磷脂DDHD1抗體 表皮細(xì)胞表面抗原1/Esa1封閉多肽 小鼠α2纖溶抑制物(α2-PI)ELISA試劑盒

DNA甲基轉(zhuǎn)移1抗體 睪丸蛋白聚糖2封閉多肽 小鼠泛蛋白(Ub)試劑盒 ELISA

轉(zhuǎn)錄因子SOX9蛋白抗體 線粒體蘋(píng)果脫氫2封閉多肽 小鼠αL艾杜糖苷(IDUA)ELISA檢測(cè)試劑盒

骨骼肌慢肌肌鈣蛋白I抗體 溶質(zhì)載體家族蛋白35成員D2封閉多肽 小鼠αN已酰氨基葡糖苷(αNAG)ELISA Kit
人退行性椎間盤(pán)髓核細(xì)胞小鼠杏仁核神經(jīng)元細(xì)胞英文名稱:小鼠杏仁核神經(jīng)元細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠角膜上皮細(xì)胞英文名稱:小鼠角膜上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞英文名稱:小鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠視網(wǎng)膜色上皮細(xì)胞 英文名稱:小鼠視網(wǎng)膜色上皮細(xì)胞 5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠晶狀體上皮細(xì)胞英文名稱:小鼠晶狀體上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠結(jié)膜成纖維細(xì)胞英文名稱:小鼠結(jié)膜成纖維細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告

小鼠結(jié)膜上皮細(xì)胞英文名稱:小鼠結(jié)膜上皮細(xì)胞5×105提供免疫熒光鑒定報(bào)告
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲(chǔ)存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

 


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