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人皮膚肥大細胞

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更新時間:2023-04-21 15:46:41瀏覽次數(shù):357

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 皮膚組織
人皮膚肥大細胞的相關(guān)產(chǎn)品:大鼠頸動脈內(nèi)皮細胞原代細胞5×105大鼠頸動脈平滑肌細胞原代細胞5×105大鼠腹腔主動脈內(nèi)皮細胞原代細胞5×105大鼠腹腔主動脈平滑肌細胞原代細胞5×105大鼠腹腔主動脈外膜成纖維細胞原代細胞5×105

詳細介紹

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自皮膚組織;皮膚肥大細胞廣泛分布于皮膚微血管周圍,分泌多種細胞因子,,參與免疫調(diào)節(jié)(T細胞、B細胞、APC細胞活化),。皮膚肥大細胞表達MHC分子、B7分子,,具有APC功能,。表達大量的IgE-Fc受體,,釋放過敏介質(zhì)。具有弱吞噬功能,,和血液的嗜堿粒細胞同樣,,具有強嗜堿性顆粒的組織細胞。存在于血液中的這類顆粒,,含有肝素,、組織胺、5-羥色胺,,由細胞崩解釋放出顆粒以及顆粒中的物質(zhì),,可在組織內(nèi)引起速發(fā)型過敏反應(yīng)(炎癥)。由于在肥大細胞上結(jié)合的IgE抗體和抗原的接觸,,使細胞多陷于崩壞,。肥大細胞呈圓形或卵圓形,細胞核小,,呈圓形或橢圓形,,染色淺,位于細胞中央,。細胞常成堆或單個分布于血管附近,。細胞呈圓形或卵圓形,細胞質(zhì)中充滿大小一致,、染成藍紫色的顆粒,,均勻分布在核周圍。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用膠原 - 胰dan白混合消化法制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)CD117免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  圓形,、梭形、多角形

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,,95%,;CO2,,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人皮膚肥大細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

皮膚組織

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二,、免疫熒光鑒定:


   1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將成1mm3左右大小,;
   2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織被消化;
   4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
   5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
   3、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min,;
   4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;
   5,、PBS沖洗細胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
   6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

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磷化B-Raf抗體 細胞膜鈣ATP1封閉多肽 豬白介3(IL-3)ELISA檢測試劑盒

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G蛋白信號轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子18抗體 磷化血小板源性生長因子受體-B封閉多肽 豬白介1β (IL-1β)ELISA試劑盒

英文名稱: CD46 硫代硫硫轉(zhuǎn)移封閉多肽 豬白介18(IL-18)試劑盒 ELISA

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肥大細胞類胰β2 磷化原癌基因c-Raf封閉多肽 豬白介10(IL-10) ELISA Kit

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神經(jīng)纖毛蛋白1抗體 胞環(huán)蛋白肌動蛋白結(jié)合蛋白封閉多肽 豬Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)試劑盒 ELISA
人皮膚肥大細胞原代平滑肌細胞低血清培養(yǎng)體系英文名稱:原代平滑肌細胞低血清培養(yǎng)體系100mL

原代平滑肌細胞低血清培養(yǎng)體系英文名稱:原代平滑肌細胞低血清培養(yǎng)體系500mL

原代平滑肌細胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代平滑肌細胞培養(yǎng)體系100mL

原代平滑肌細胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代平滑肌細胞培養(yǎng)體系500mL

原代神經(jīng)元細胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代神經(jīng)元細胞培養(yǎng)體系100mL

原代神經(jīng)元細胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代神經(jīng)元細胞培養(yǎng)體系500mL

原代少突膠質(zhì)細胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代少突膠質(zhì)細胞培養(yǎng)體系100mL
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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