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BT-549細胞專用培養(yǎng)基

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更新時間:2023-04-26 14:17:41瀏覽次數(shù):298

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 125mL×4
主要用途 僅供科研實驗 產(chǎn)品濃度
BT-549細胞專用培養(yǎng)基的相關(guān)產(chǎn)品:大鼠前列腺成纖維細胞 大鼠腹腔巨噬細胞培養(yǎng)基小鼠外周血樹突狀細胞(成熟DC細胞) 大鼠肝動脈內(nèi)皮細胞 293T/17 (人胚腎細胞) (STR鑒定正確) 大鼠肝動脈內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基IMR-32 (人神經(jīng)母細胞瘤細胞) 大鼠肝動脈平滑肌細胞

詳細介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

產(chǎn)品形態(tài)

BT-549細胞專用培養(yǎng)基

125mL×4

液體

商品詳細介紹:

由技術(shù)團隊精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,,本產(chǎn)品可保持BT-549細胞最佳的生長狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含BT-549細胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,,可直接用于BT-549細胞的體外培養(yǎng),。本產(chǎn)品僅供進一步科研使用,,不得用于診斷,、治療、臨床,、家庭及其它用途,。

產(chǎn)品說明

產(chǎn)品形態(tài):液體

產(chǎn)品濃度:1×

產(chǎn)品規(guī)格:125mL×4

培養(yǎng)基成分:RPMI-1640+10% FBS+0.01mg/ml Insulin+1% P/S

細菌檢測:陰性

真菌檢測:陰性

支原體檢測:陰性

細胞生長實驗:細胞生長良好,形態(tài)正常

內(nèi)毒素含量(EU/mL):≤3

儲存條件:2~8℃,,避光儲存

運輸條件:冰袋冷藏運輸

有效期:3個月

1.png

實驗報告:

一,、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織被消化;
   4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
   5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
   2、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
   3,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細胞30min;
   4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5,、PBS沖洗細胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
   6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存,。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。
公司產(chǎn)品僅用于科研

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phospho-DVL2 (Thr224) Antibody Blocking Peptide磷化蓬亂蛋白2封閉多肽

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Phospho-GYS1 (Ser641) Antibody Blocking Peptide磷化葡萄糖合成1封閉多肽

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