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小鼠虹膜色素上皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2025-04-09 10:53:01瀏覽次數(shù):261

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 眼球
小鼠虹膜色素上皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:HuTu-80 (人十二脂腸腺癌) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶大鼠脊髓成纖維細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶兔羊膜胚胎細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶CHL (倉(cāng)鼠肺細(xì)胞)(種屬鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶CCD-18Co (人結(jié)腸組織細(xì)胞)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

小鼠虹膜色素上皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

眼球

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自眼球虹膜組織,;虹膜是眼睛構(gòu)造的一部分,,屬于眼球中層,位于血管膜的前部,;在睫狀體前方虹膜,,中心有一圓形開(kāi)口,稱為瞳孔,,猶如相機(jī)當(dāng)中可調(diào)整大小的光圈,,內(nèi)含色素決定眼睛的顏色。日間光線較為強(qiáng)烈時(shí),,虹膜會(huì)收蹜,,只使一小束光線穿透瞳孔,進(jìn)入眼睛,;當(dāng)進(jìn)入黑暗環(huán)境中,,虹膜就會(huì)往后退縮,使瞳孔變大,,讓更多的光線進(jìn)入眼睛,,多數(shù)的脊椎動(dòng)物的眼睛都有虹膜。虹膜色素上皮細(xì)胞(IPE)是虹膜重要結(jié)構(gòu)組成細(xì)胞之一,,位于虹膜組織的后面,,和視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞(RPE)同樣起源于神經(jīng)外胚葉層,可能具有相似的生物學(xué)功能,,因此對(duì)IPE的研究將為防治因RPE結(jié)構(gòu)或功能異常而導(dǎo)致的眼底病提供新思路,。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白-膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過(guò)上皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  上皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,,95%;CO2,,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一,、分離與培養(yǎng):

二,、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化,;
   4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
   5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;

 

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
   2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
   6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

維甲調(diào)節(jié)核基質(zhì)相關(guān)蛋白抗體 免疫球蛋白μ鏈結(jié)合蛋白2封閉多肽 

D型-天冬氨氧化抗體 S轉(zhuǎn)移ω2封閉多肽 

胰島受體相關(guān)受體抗體 蛋白激GCN2蛋白封閉多肽 

ZDHHC6蛋白抗體 中心體和紡錘體極相關(guān)蛋白1封閉多肽 

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 7號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框29封閉多肽 

CD163蛋白樣1抗體 外致密纖維蛋白3B封閉多肽 

磷化γ1氨基丁受體GABAA Rβ1抗體 蛋白磷酯-1B封閉多肽 

LCMT2蛋白抗體 溶質(zhì)載體轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白家族30成員5封閉多肽 

磷肌醇磷蛋白INPP5抗體 溶質(zhì)載體家族蛋白30成員A9封閉多肽 

CD244抗體 羥基酰水解樣蛋白封閉多肽 

CD351抗體 21號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框7封閉多肽 

延伸因子EF-1δ抗體 活化半胱胺蛋白-3封閉多肽 

親環(huán)蛋白(親環(huán))40抗體 紡錘體組裝異常蛋白6封閉多肽 

甲基化樣蛋白21B抗體 G蛋白偶聯(lián)受體128封閉多肽 

CD44抗體 磷化細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)分子SMAD2封閉多肽 

MEGF9蛋白抗體 精子卵子結(jié)合生成堿性螺旋蛋白2封閉多肽 

磷化鈉鉀ATP蛋白a1抗體 凋亡抑制因子1封閉多肽 

外周蛋白單克隆抗體 Ⅲ型纖維連接蛋白域蛋白1封閉多肽 
小鼠虹膜色素上皮細(xì)胞人皮層神經(jīng)元細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

DC2.4 (小鼠骨髓來(lái)源樹(shù)突狀細(xì)胞) (種屬鑒定正確) RPMI-1640+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

K-562 [K562] (人慢性髓原白血病細(xì)胞) (STR鑒定正確)IMDM+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

VCaP (人前列腺癌細(xì)胞) (STR鑒定正確)DMEM+10% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

RG2 [D74] (大鼠膠質(zhì)瘤細(xì)胞) (種屬鑒定正確)DMEM+10%FBS+1%P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶

人乳腺癌組織源細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

 


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