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小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 冠狀動(dòng)脈
小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:小鼠頸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠頸動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠腹腔主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠腹腔主動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞原代細(xì)胞5×105小鼠腹腔主動(dòng)脈外膜成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

組織來(lái)源

小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

冠狀動(dòng)脈

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自冠狀動(dòng)脈組織,;冠狀動(dòng)脈是供給心臟血液的動(dòng)脈,,起于主動(dòng)脈根部,分左右兩支,,行于心臟表面,。采用Schlesinger等的分類(lèi)原則,,將冠狀動(dòng)脈的分布分為三型:右優(yōu)勢(shì)型、均衡型,、左優(yōu)勢(shì)型,。左右冠狀動(dòng)脈是升主動(dòng)脈的第一對(duì)分支。左冠狀動(dòng)脈為一短干,,發(fā)自左主動(dòng)脈竇,,經(jīng)肺動(dòng)脈起始部和左心耳之間,沿冠狀溝向左前方行后,,立即分為前室間支和旋支,。前室間支沿前室間溝下行,旋支繞過(guò)心尖切跡至心的膈面與右冠狀動(dòng)脈的后室間支相吻合,。冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞呈單層扁平分布,,是一薄層的專(zhuān)門(mén)上皮細(xì)胞,它形成冠狀動(dòng)脈的內(nèi)壁,,是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁(單層鱗狀上皮)的接口,。內(nèi)皮細(xì)胞是沿著整個(gè)循環(huán)系統(tǒng),由心臟直至小的微血管,。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用混合短暫消化后組織貼塊,、結(jié)合內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  內(nèi)皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,,95%;CO2,,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,,5%,。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲(chǔ)存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一,、分離與培養(yǎng):

二,、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織被消化;
   4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
   5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,;
   5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
   6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框206抗體 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)氨基肽1封閉多肽 

細(xì)胞凋亡敏感性基因抗體 6號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框142封閉多肽 

ATP依賴(lài)的解旋CHD6抗體 范可尼綜合征相關(guān)鋅指蛋白封閉多肽 

KMO蛋白抗體 鈣依賴(lài)膜結(jié)合蛋白Copine蛋白9封閉多肽 

英文名稱(chēng): Galectin 8 神經(jīng)細(xì)胞蠟樣質(zhì)脂褐質(zhì)沉積病蛋白CLN5封閉多肽 

CD84抗體 轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)因子TEF3封閉多肽 

纖維蛋白溶原抗體 骨形態(tài)發(fā)生蛋白4封閉多肽 

結(jié)核分枝桿菌分泌性蛋白ESAT6抗體 Kartagener綜合征相關(guān)蛋白R(shí)SHL3封閉多肽 

磷化叉頭蛋白3A抗體 1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框111封閉多肽 

交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian 柯薩奇病毒A16型3CD封閉多肽 

B淋巴細(xì)胞成熟因子(CD269)抗體 前折疊蛋白亞基5封閉多肽 

膠質(zhì)瘤發(fā)病相關(guān)蛋白1抗體 細(xì)胞毒性受體NK-p44封閉多肽 

衰老標(biāo)記蛋白30抗體 FBX47蛋白封閉多肽 

生長(zhǎng)因子受體結(jié)合蛋白10抗體 磷化蛋白激C zeta 封閉多肽 

TNRC18蛋白抗體 磷脂酰乙醇胺N-甲基轉(zhuǎn)移封閉多肽 

磷化220kDa蛋白激D相互作用蛋白抗體 AKT相互作用蛋白蛋白封閉多肽 

LHFP蛋白抗體 多聚免疫球蛋白受體封閉多肽 

卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白67抗體 重組人促黃體生成受體蛋白 
小鼠冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞雞肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL雞肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持雞肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含雞肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,,無(wú)需添加任何成分,可直接用于雞肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞的體外培養(yǎng),。

NCI-H1975細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基125mL×4NCI-H1975細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持NCI-H1975細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含NCI-H1975細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,,無(wú)需添加任何成分,可直接用于NCI-H1975細(xì)胞的體外培養(yǎng),。

MDA-MB-435細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基(L15)125mL×4MDA-MB-435細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持MDA-MB-435細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含MDA-MB-435細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,,無(wú)需添加任何成分,可直接用于MDA-MB-435細(xì)胞的體外培養(yǎng),。

TE-10細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基125mL×4TE-10細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持TE-10細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含TE-10細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,,無(wú)需添加任何成分,可直接用于TE-10細(xì)胞的體外培養(yǎng),。

SK-N-SH細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基125mL×4SK-N-SH細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持SK-N-SH細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含SK-N-SH細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,,無(wú)需添加任何成分,可直接用于SK-N-SH細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

KHM-5M細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基125mL×4KHM-5M細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,,本產(chǎn)品可保持KHM-5M細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含KHM-5M細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,,無(wú)需添加任何成分,,可直接用于KHM-5M細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

MEM(含NEAA,、雙抗)500mL-


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