詳細介紹
規(guī)格參數(shù):
產(chǎn)品名稱 | 大鼠輸尿管上皮細胞 |
組織來源 | 尿道組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
4.細胞簡介:
分離自輸尿管組織;輸尿管上接腎盂,,下連膀胱,,是一對細長的管道,,呈扁圓柱狀,位于腹膜后,,為一肌肉粘膜所組成管狀結(jié)構(gòu),,沿腰大肌內(nèi)側(cè)的前方垂直下降進入骨盆,。輸尿管有三個狹窄部:一個在腎盂與輸尿管移行處(輸尿管起始處);一個在越過小骨盆入口處,;后一個在進入膀胱壁的內(nèi)部,。這些狹窄是結(jié)石、及壞死組織容易停留的部位,。輸尿管——膀胱連接處有一種特殊結(jié)構(gòu),,即瓦耳代爾鞘,它能有效地防止膀胱內(nèi)尿液返流到輸尿管,。臨床上將輸尿管分為上,、中、下三段,,也可稱為腹段,、盆段、膀胱段,。其中,,腹段自腎盂輸尿管交界處,到跨越髂動脈處,;盆段,,自髂動脈到膀胱壁;膀胱段,,自膀胱壁內(nèi)斜行至膀胱粘膜,、輸尿管開口。輸尿管管壁分為4層,,黏膜層,、固有層、肌層,、外膜,。黏膜層表面為移行上皮,約有4-5層細胞,;固有層由細密的結(jié)締組織構(gòu)成,,內(nèi)含膠原纖維和少量彈性纖維;輸尿管肌層主要由內(nèi)縱和外環(huán)兩層平滑肌組成,;外膜為疏松結(jié)締組織,,營養(yǎng)血管由外膜進入輸尿管,。其中,,輸尿管上皮細胞主要分布于黏膜層。
5.方法簡介:
實驗室分離的采用先中性dan白消化,、然后機械分離法使輸尿管分層,、后膠原消化,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
6.質(zhì)量檢測:
實驗室分離的經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
7.培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%胰dan白
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
運輸和保存:
視天氣狀況和運輸距離遠近,,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進行,。
1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸,;收到細胞后請盡快解凍復(fù)蘇細胞進行培養(yǎng),,如無法立刻進行復(fù)蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月,。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進行常溫運輸,;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,,如懸浮的細胞較多,,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。
收到如何處理:
1,、首先,,觀察培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有,請拍照,,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),。因運輸問題,,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3,、仔細閱讀細胞說明書,,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。
4、靜置完成后,,取出細胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢、拍照,,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照,、記錄細胞生長狀態(tài),。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,,可正常傳代,;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時,,若細胞密度超過80%,,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),,補加培養(yǎng)基至5ml,;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作,。
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