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人骨髓樹(shù)突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 骨髓
人骨髓樹(shù)突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)的相關(guān)產(chǎn)品:SK-NO-1人急性髓系白血病細(xì)胞人細(xì)胞系1×106SK-N-SH人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞人細(xì)胞系1×106SK-OV-3人卵巢癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106SK-OV-3+LUC人卵巢癌細(xì)胞熒光標(biāo)記人細(xì)胞系1×106smmc-7721人肝癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來(lái)源

人骨髓樹(shù)突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

骨髓

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自骨髓,;骨髓是機(jī)體的造血組織,,位于身體的許多骨骼內(nèi),。成年動(dòng)物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓,。紅骨髓能制造紅細(xì)胞,、血小板和各種白細(xì)胞,。血小板有止血作用,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,,包括細(xì)菌,、病毒等,;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體,。因此,,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官,。骨髓是存在于長(zhǎng)骨(如肱骨,、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,,稱為紅骨髓。出生時(shí),,紅骨髓充滿全身骨髓腔,,隨著年齡增大,脂肪細(xì)胞增多,,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓DC細(xì)胞是由骨髓單核細(xì)胞誘導(dǎo)而成的,;樹(shù)突狀細(xì)胞分為成熟樹(shù)突狀細(xì)胞和未成熟樹(shù)突狀細(xì)胞,,典型的未成熟樹(shù)突狀細(xì)胞呈半貼壁生長(zhǎng),在GM-CSF,、IL4的作用下形成葡萄串樣集落,,細(xì)胞大而形態(tài)不規(guī)則,表面皺褶多,,亦可見(jiàn)少量短刺狀突,,胞內(nèi)細(xì)胞器豐富并可見(jiàn)吞噬泡,具有較強(qiáng)的遷移能力,,伴隨有部分未誘導(dǎo)成的單核細(xì)胞,,貼壁形態(tài)多樣。而成熟的樹(shù)突狀細(xì)胞由未成熟DC進(jìn)一步經(jīng)TNFα,、LPS等誘導(dǎo)而成,,多數(shù)呈懸浮生長(zhǎng), 細(xì)胞呈圓形,,細(xì)胞體積進(jìn)一步增大,,表面大量粗細(xì)不等的樹(shù)枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀察到 ),伴隨少量貼壁未成熟細(xì)胞或者單核細(xì)胞,。未成熟DC細(xì)胞長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)也可能導(dǎo)致自發(fā)分化成熟,。DC細(xì)胞尚無(wú)特異性細(xì)胞表面分子標(biāo)志,主要通過(guò)形態(tài)學(xué),、組合性細(xì)胞表面標(biāo)志,、在混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)中能激活初始T細(xì)胞等特征進(jìn)行鑒定,。其中成熟樹(shù)突狀細(xì)胞表面高表達(dá)主要組織相容性復(fù)合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子,,進(jìn)而激活T淋巴細(xì)胞,,誘導(dǎo)免疫應(yīng)答,處于啟動(dòng),、調(diào)控,、并維持免疫應(yīng)答的中心環(huán)節(jié);未成熟樹(shù)突狀細(xì)胞具有很強(qiáng)的抗原攝取加工能力,,但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細(xì)胞活化,、增殖產(chǎn)生免疫應(yīng)答,不能激活T細(xì)胞的第二信號(hào),,可導(dǎo)致T細(xì)胞無(wú)能,,從而誘導(dǎo)免疫低反應(yīng)或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹(shù)突狀細(xì)胞表面CD80,、CD86,、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達(dá)較低,一般在30%以下,。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用密度梯度離心法分離骨髓單個(gè)核細(xì)胞,、培養(yǎng)過(guò)程添加細(xì)胞因子誘導(dǎo)而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD86免疫熒光鑒定,、細(xì) 胞 形態(tài)等綜合鑒定,純度可達(dá)80%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  半貼半懸浮

細(xì)胞形態(tài)  圓形,,樹(shù)突狀

傳代特性  屬于高度分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,,95%,;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲(chǔ)存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一,、分離與培養(yǎng):

二,、免疫熒光鑒定:


   1、無(wú)菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織被消化;
   4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
   5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
   5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
   6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

磷化17β羥基類固醇脫氫13抗體 甲基化樣蛋白19封閉多肽 人再生基因蛋白IV(REG-4)ELISA試劑盒

頂膜鈉依賴性膽鹽轉(zhuǎn)運(yùn)體蛋白抗體 干擾β封閉多肽 人多功能蛋白聚糖(VS)試劑盒ELISA

轉(zhuǎn)錄因子SOX-11蛋白抗體 垂體瘤轉(zhuǎn)化蛋白2封閉多肽 人B細(xì)胞κ輕肽基因增強(qiáng)子核因子抑制因子ε(Nfkbie)ELISA檢測(cè)試劑盒

白介2抗體 核孔蛋白Nup37封閉多肽 人ADAM金屬肽含血小板反應(yīng)蛋白1基元4(ADAMTS4)elisa試劑盒

β3腎上腺能受體抗體 緊密連接蛋白1封閉多肽 人類似RIKENcDNA4933429F08基因試劑盒elisa

11號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框16抗體 微管蛋白封閉多肽 人孕酮和adipoQ受體家族成員Ⅶ(PAQR7)檢測(cè)試劑盒elisa

膜粘連蛋白13抗體 封閉多肽 人集蛋白亞家族成員11(COLEC11)ELISA試劑盒

10號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框27抗體 RNA結(jié)合蛋白34封閉多肽 人絲氨抑制因子肽抑制因子進(jìn)化枝3G(Serpina3g)試劑盒ELISA

英文名稱: MUC2 氯離子通道調(diào)節(jié)蛋白1A封閉多肽 人類似RIKENcDNAA630077B13基因ELISA檢測(cè)試劑盒

金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)體1抗體 真核翻譯起始因子4G封閉多肽 人類似RIKENcDNA3110050K21基因elisa試劑盒

雙皮質(zhì)抗體 磷化Ephrin B封閉多肽 人類似RIKENcDNA2610307008基因試劑盒elisa

自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈β3抗體 磷化非受體酪氨激c-Abl封閉多肽 人類似RIKENcDNA2010109K09基因檢測(cè)試劑盒elisa

陽(yáng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 磷化磷脂酰肌醇激調(diào)節(jié)亞單位gamma封閉多肽 人ras同源物基因家族成員b(RHOB)ELISA試劑盒

細(xì)胞色C氧化蛋白6B2抗體 鋅指蛋白589封閉多肽 人假定蛋白LOC677340試劑盒ELISA

英文名稱: Cytokeratin 19 補(bǔ)體4結(jié)合蛋白封閉多肽 人假定蛋白LOC433328ELISA檢測(cè)試劑盒

CRB2蛋白抗體 ZNF792/鋅指蛋白792封閉多肽 人髓樣分化因子初次應(yīng)答基因88(MYD88)elisa試劑盒

/鈣調(diào)依賴蛋白激2b/2γ抗體 腱調(diào)蛋白/軟骨調(diào)節(jié)樣1蛋白封閉多肽 人干擾活化基因205(Ifi205)試劑盒elisa

妊娠特異性糖蛋白4抗體 活化半胱胺蛋白-3封閉多肽 人組織相容性2-K1-K區(qū)(H2-K1)檢測(cè)試劑盒elisa
人骨髓樹(shù)突狀細(xì)胞(成熟DC細(xì)胞)panc02小鼠胰腺癌細(xì)胞英文名稱:panc021×106DMEM+5%FBS+1%P/S(STR鼠源鑒定)報(bào)告

panc02+LUC小鼠胰腺癌細(xì)胞熒光標(biāo)記英文名稱:panc02+LUC1×106DMEM+5%FBS+1%P/S(panc02鼠源鑒定)報(bào)告

PT-67小鼠源基于MLV-10A1逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細(xì)胞系英文名稱:PT-671×106DMEM+10%FBS+1%P/S(STR鼠源鑒定)報(bào)告

RAG小鼠腎腺癌細(xì)胞英文名稱:RAG1×106MEM+10%FBS+1%P/S (STR鼠源鑒定)報(bào)告

RAW 264.7小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞英文名稱:RAW 264.71×106DMEM+10%FBS+1%P/S  不能用消化細(xì)胞刮代替,,易分化傳代時(shí)密度要大(STR鼠源鑒定)報(bào)告

RAW 264.7+GFP小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞+GFP英文名稱:RAW 264.7+GFP1×106DMEM+10%FBS+1%P/S  不能用消化細(xì)胞刮代替,,易分化傳代時(shí)密度要大(提供RAW264.7鑒定)報(bào)告

Renca 小鼠腎癌細(xì)胞英文名稱:Renca 1×1061640+10%FBS+1%P/S(STR鼠源鑒定)報(bào)告


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