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大鼠胚肺成纖維細胞

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更新時間:2023-04-21 15:53:02瀏覽次數:219

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

產品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 胚胎,;肺組織
大鼠胚肺成纖維細胞的相關產品:大鼠肝竇內皮細胞原代細胞5×105大鼠肝Kupffer細胞原代細胞5×105大鼠結腸神經元細胞原代細胞5×105大鼠肝間質細胞原代細胞5×105大鼠肝成纖維細胞原代細胞5×105

詳細介紹

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自胚肺組織;肺是機體的呼吸器官,,位于胸腔,,左右各一,覆蓋于心之上,。肺有分葉,,左二右三,共五葉,。肺經肺系(指氣管,、支氣管等)與喉、鼻相連,,故稱喉為肺之門戶,,鼻為肺之外竅。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,,由胚胎時期的間充質細胞分化而來,。成纖維細胞較大,輪廓清楚,,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,,核仁大而明顯,。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化,;成纖維細胞對不同程度的細胞變性,、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的胚肺成纖維細胞呈圓形,、折光性良好,,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,,其中部分開始伸出偽足,,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁,,伸展成梭形,,胞核清晰,分布較均勻,,散在生長,,不聚集成團,;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),,細胞排列緊密,,有的交叉重疊生長,平坦,、胞體較大,,細胞質透明,細胞核較大,,呈橢圓形,,顏色淡。細胞融合,,并彼此連接成網狀,;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。該細胞在合成和分泌細胞因子,、維持血管內外和凝血和纖溶的的動態(tài)平衡中起重要作用。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原混合消化法結合差速貼壁法制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質量檢測:

實驗室分離的經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳5代左右,;3代以內狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%,;CO2,,5%

產品屬性:

產品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠胚肺成纖維細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

胚胎;肺組織

1.png

實驗報告:

一,、分離與培養(yǎng):

二,、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將成1mm3左右大小,;
   2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復此步驟2-3次,,直至組織被消化;
   4,、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;

 

1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
   2,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
   3、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min,;
   4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;
   5,、PBS沖洗細胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
   6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

磷化原癌基因蛋白18 整合樣金屬與13型封閉多肽 

熱休克轉錄因子2抗體 肽基脯氨酰順反異構FKBP11封閉多肽 

α1微球蛋白單克隆抗體 離子通道蛋白Kv3.3封閉多肽 

磷化KLF5抗體 B細胞活化因子受體(CD268)封閉多肽 

FBXW8蛋白抗體 胎盤生長因子封閉多肽 

細胞色P450 19抗體 CD350封閉多肽 

HHIP蛋白抗體 重組乙肝病毒核心抗原 

C-反應蛋白單克隆抗體 核孔復合蛋白Nup53封閉多肽 

白細胞介27β抗體 短鏈L-3羥烷基脫氫封閉多肽 

甲基化樣蛋白21D抗體 重組腫瘤抑制基因P53/野生型P53蛋白 

乳腺癌易感基因2抗體 痙攣性截癱相關蛋白20封閉多肽 

DNA損傷誘導轉錄樣蛋白4抗體 DTWD1蛋白封閉多肽 

羥基類固醇脫氫3α/3α-羥類固醇脫氫Ⅰ抗體 染色質修飾蛋白CHMP7封閉多肽 

分泌型免疫球蛋白A抗體 8號染色體開放閱讀框30a封閉多肽 

英文名稱: Valine 磷化原癌基因c-Raf封閉多肽 

CARD9抗體 胰島β細胞生長因子封閉多肽 

Cy7標記小鼠抗人CD45單克隆抗體 磷化一氧化氮合成3(內皮型)封閉多肽 

α1微球蛋白單克隆抗體 抑制βB/Inhibin β B封閉多肽  
大鼠胚肺成纖維細胞原代T淋巴細胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代T淋巴細胞培養(yǎng)體系500mL

原代基質細胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代基質細胞培養(yǎng)體系100mL

原代基質細胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代基質細胞培養(yǎng)體系500mL

原代卵巢顆粒細胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代卵巢顆粒細胞培養(yǎng)體系100mL

原代卵巢顆粒細胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代卵巢顆粒細胞培養(yǎng)體系500mL

原代肥大細胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代肥大細胞培養(yǎng)體系100mL

原代肥大細胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代肥大細胞培養(yǎng)體系500mL
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,,90%;優(yōu)質胎牛血清,,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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