詳細介紹
產品屬性:
產品名稱 | 規(guī)格 | 組織來源 |
大鼠骨髓樹突狀細胞(未成熟DC細胞) | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 骨髓 |
商品詳細介紹:
4.細胞簡介:
分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內,。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞,、血小板和各種白細胞,。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,,包括細菌,、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體,。因此,,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官,。骨髓是存在于長骨(如肱骨,、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質間的網眼中,是一種海綿狀的組織,,能產生血細胞的骨髓略呈紅色,,稱為紅骨髓。出生時,,紅骨髓充滿全身骨髓腔,,隨著年齡增大,脂肪細胞增多,,相當部分紅骨髓被黃骨髓取代,,后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓DC細胞是由骨髓單核細胞誘導而成的,;樹突狀細胞分為成熟樹突狀細胞和未成熟樹突狀細胞,,典型的未成熟樹突狀細胞呈半貼壁生長,在GM-CSF,、IL4的作用下形成葡萄串樣集落,,細胞大而形態(tài)不規(guī)則,表面皺褶多,,亦可見少量短刺狀突,,胞內細胞器豐富并可見吞噬泡,具有較強的遷移能力,,伴隨有部分未誘導成的單核細胞,,貼壁形態(tài)多樣。而成熟的樹突狀細胞由未成熟DC進一步經TNFα,、LPS等誘導而成,,多數(shù)呈懸浮生長, 細胞呈圓形,,細胞體積進一步增大,,表面大量粗細不等的樹枝樣突起(高倍鏡或者電鏡下可觀察到 ),,伴隨少量貼壁未成熟細胞或者單核細胞。未成熟DC細胞長時間培養(yǎng)也可能導致自發(fā)分化成熟,。DC細胞尚無特異性細胞表面分子標志,,主要通過形態(tài)學、組合性細胞表面標志,、在混合淋巴細胞反應中能激活初始T細胞等特征進行鑒定,。其中成熟樹突狀細胞表面高表達主要組織相容性復合物(MHC)以及CD80、CD86等共刺激分子,,進而激活T淋巴細胞,,誘導免疫應答,處于啟動,、調控,、并維持免疫應答的中心環(huán)節(jié);未成熟樹突狀細胞具有很強的抗原攝取加工能力,,但由于缺乏多種共刺激分子不能使初始T細胞活化,、增殖產生免疫應答,不能激活T細胞的第二信號,,可導致T細胞無能,,從而誘導免疫低反應或抗原免疫特異性耐受。未成熟樹突狀細胞表面CD80,、CD86,、MHC-Ⅱ類分子等共刺激分子表達較低,一般在30%以下,。
5.方法簡介:
實驗室分離的采用密度梯度離心法分離骨髓單個核細胞,、培養(yǎng)過程添加細胞因子誘導而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
6.質量檢測:
實驗室分離的經CD86免疫熒光鑒定、細胞形態(tài)等綜合鑒定,,純度可達80%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
7.培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 半貼半懸浮
細胞形態(tài) 圓形,、梭形、多角形,,形態(tài)多樣
傳代特性 屬于高度分化細胞,;屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%胰dan白
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng): | 二,、免疫熒光鑒定: |
| 1、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,; |
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,,90%,;優(yōu)質胎牛血清,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲存,。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
鋅指蛋白749抗體 促血管平滑肌細胞分化因子封閉多肽
IZUMO4蛋白抗體 先心病相關蛋白TBX1封閉多肽
細胞色P450 4A1抗體 重組豬圓環(huán)病毒CAP蛋白
粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子3受體抗體 核因子κB抑制蛋白δ封閉多肽
RAS相關抑細胞生長蛋白1抗體 C-肽封閉多肽
干擾α17抗體 脫氧核糖核1封閉多肽
腦富含膜附著信號蛋白1抗體 軟骨糖蛋白39封閉多肽
磷化周期依賴性激2抗體 重組人重組甲狀旁腺激受體蛋白
溶質載體家族16成員8抗體 驅動蛋白家族成員22封閉多肽
脫氫10抗體 CYLC2蛋白封閉多肽
SCAND3蛋白抗體 真核翻譯起始因子1A封閉多肽
血小板源性生長因子C抗體 INO80E蛋白封閉多肽
腺嘌呤核苷轉運蛋白1,、2,、3、4抗體 富含脯氨蛋白19封閉多肽
TBC結構域TB10A蛋白抗體 環(huán)指蛋白19封閉多肽
胃泌/蛙皮抗體 A型流感病毒核輸出蛋白封閉多肽
微小染色體維持缺陷蛋白5抗體 CD8封閉多肽
絲裂原活化蛋白激激8抗體 二磷腺苷核糖基化因子核苷交換因子2封閉多肽
磷化p21激活激6抗體 血管內皮生長因子A封閉多肽
大鼠骨髓樹突狀細胞(未成熟DC細胞)TPC-1細胞專用培養(yǎng)基125mL×4TPC-1細胞專用培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,,經過長期測試,,本產品可保持TPC-1細胞佳的生長狀態(tài)。本產品中已包含TPC-1細胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,,可直接用于TPC-1細胞的體外培養(yǎng)。
大鼠腎小球系膜細胞培養(yǎng)基100mL大鼠腎小球系膜細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,,經過長期測試,,本產品可保持大鼠腎小球系膜細胞佳的生長狀態(tài)。本產品中已包含大鼠腎小球系膜細胞生長所需的各種成分,,無需添加任何成分,,可直接用于大鼠腎小球系膜細胞的體外培養(yǎng)。
SW579 [SW 579; SW-579]細胞專用培養(yǎng)基(L15)125mL×4SW579 [SW 579; SW-579]細胞專用培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,,經過長期測試,,本產品可保持SW579 [SW 579; SW-579]細胞佳的生長狀態(tài)。本產品中已包含SW579 [SW 579; SW-579]細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,,可直接用于SW579 [SW 579; SW-579]細胞的體外培養(yǎng),。
P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]細胞專用培養(yǎng)基125mL×4P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]細胞專用培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,,本產品可保持P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]細胞佳的生長狀態(tài),。本產品中已包含P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,,可直接用于P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1]細胞的體外培養(yǎng),。
兔骺軟骨細胞培養(yǎng)基100mL兔骺軟骨細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,,本產品可保持兔骺軟骨細胞佳的生長狀態(tài),。本產品中已包含兔骺軟骨細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,,可直接用于兔骺軟骨細胞的體外培養(yǎng),。
小鼠海綿體內皮細胞培養(yǎng)基100mL小鼠海綿體內皮細胞培養(yǎng)基由技術團隊精心優(yōu)化,經過長期測試,,本產品可保持小鼠海綿體內皮細胞佳的生長狀態(tài),。本產品中已包含小鼠海綿體內皮細胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,,可直接用于小鼠海綿體內皮細胞的體外培養(yǎng),。
MEM無糖 (含NEAA、HEPES,,不含L-,、酚紅)500mL-