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大鼠氣管平滑肌細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 11:10:43瀏覽次數(shù):240

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 氣管
大鼠氣管平滑肌細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:hct-15人結(jié)腸癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106HCT15/5Fu人結(jié)直腸癌氟耐藥株人細(xì)胞系1×106HCT-15/Taxol人結(jié)直腸癌耐藥株人細(xì)胞系1×106HCT-8人結(jié)直腸癌癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106HEC-1-A人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞人細(xì)胞系1×106

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠氣管平滑肌細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

氣管

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自氣管組織,;氣管(Trachea),呼吸器官的一部分,;為后壁略平的圓筒型管狀,。上端平第六頸椎下緣,與環(huán)狀軟骨相連,;向下至第四,、五胸椎體(相當(dāng)胸骨角平面)交界處,分左,、右主支氣管,,分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個(gè)半環(huán)狀軟骨構(gòu)成,,有彈性,,軟骨為“C"字形的軟骨環(huán),,缺口向后,各軟骨環(huán)以韌帶連接起來,,環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接,,保持了持續(xù)張開狀態(tài)。管腔襯以粘膜,,表面覆蓋纖毛上皮,,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒,纖毛不斷向咽部擺動(dòng)將粘液與灰塵排出,,以凈化吸入的氣體,。氣管平滑肌是氣管的重要結(jié)構(gòu)組成之一,在機(jī)體的正常生理過程中發(fā)揮著重要作用,;能夠保持氣道張力,,維持氣道管狀形態(tài),從而有利于氣體流通,,保持肺部通氣,。氣管平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,,細(xì)胞形態(tài)大小不一,,呈梭形、不規(guī)則形,、三角形或扇形,,核卵圓形、居中,;2周后細(xì)胞匯合,,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長(zhǎng)梭形,胞漿豐富,,有分枝狀突起,,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長(zhǎng),高低起伏,;細(xì)胞密度低時(shí),,常交織成網(wǎng)狀;密度高時(shí),,則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長(zhǎng)較快,4-6天即可匯合,,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長(zhǎng)特點(diǎn),。氣管平滑肌細(xì)胞的異常是呼吸道疾病的重要病理特征之一,其增生,、肥大是氣道重塑的關(guān)鍵,。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白 - 膠原聯(lián)合消化法結(jié)合組織貼塊法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,,95%;CO2,,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一,、分離與培養(yǎng):

二,、免疫熒光鑒定:


   1、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化,;
   4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h,;
   6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

磷化細(xì)胞角蛋白8抗體 蛋白激Cη封閉多肽 人抗鈣調(diào)特異抗體(CAM-ab)ELISA試劑盒

胰高血糖受體抗體 分泌型磷脂A2亞基5封閉多肽 人甲狀腺非肽激抗體(THAA)試劑盒ELISA

巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子抗體 晚期包膜蛋白1封閉多肽 人抗類固醇生成細(xì)胞抗體(SCA)ELISA檢測(cè)試劑盒

英文名稱: Caspase-7 環(huán)指蛋白88封閉多肽 人粒細(xì)胞特異性抗核抗體(GS-ANA)elisa試劑盒

原鈣粘附蛋白20抗體 早期內(nèi)吞體相關(guān)蛋白1封閉多肽 人抗信號(hào)識(shí)別顆粒抗體(SRP)試劑盒elisa

Kruppel樣因子抗體 己醛醣鹽水解酵封閉多肽 人封閉抗體(BA)檢測(cè)試劑盒elisa

磷化熱休克蛋白-70抗體 基質(zhì)金屬-1封閉多肽 人抗細(xì)胞膜DNA抗體(cmDNA)ELISA試劑盒

過氧化4抗體 E4F轉(zhuǎn)錄因子1封閉多肽 人抗鈣抑抗體(ACAST-DⅣ)ELISAit高試劑盒ELISA

白介2受體a鏈/IL-2RA抗體 亮氨拉鏈蛋白封閉多肽 人卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)ELISA檢測(cè)試劑盒

TSN蛋白抗體 趨化樣因子超家族成員3封閉多肽 人抗核仁纖維蛋白抗體(AFA/snoRNP/U3RNP)elisa試劑盒

骨形態(tài)發(fā)生抑制蛋白SOST抗體 瞬時(shí)受體電位陽離子通道亞家族M成員1封閉多肽 人系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)試劑盒elisa

核苷腺苷轉(zhuǎn)移1抗體 乙型肝炎病毒X蛋白HBX封閉多肽 人抗抗體(GM1)檢測(cè)試劑盒elisa

α-L巖藻糖苷2抗體 脫氫肽1封閉多肽 人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAGAb)ELISA試劑盒

信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白α抗體 選擇性剪接因子3亞基3封閉多肽 人抗中性粒細(xì)胞顆??贵w(ANGA)試劑盒ELISA

Verprolin同源結(jié)構(gòu)域包含蛋白3抗體 中心體蛋白27封閉多肽 人抗中性粒細(xì)胞抗體(ANA)ELISA檢測(cè)試劑盒

巢蛋白/神經(jīng)上皮干細(xì)胞蛋白抗體 KLHDC8B蛋白封閉多肽 人抗載脂蛋白抗體A1(ApoA1)elisa試劑盒

Rho相關(guān)蛋白激1抗體 冷休克結(jié)構(gòu)域蛋白C2封閉多肽 人抗胰島受體抗體(AIRA)試劑盒elisa

γ氨基丁運(yùn)載蛋白3抗體 精氨加壓受體2封閉多肽 人抗胃壁細(xì)胞抗體(AGPA/PCA)檢測(cè)試劑盒elisa
大鼠氣管平滑肌細(xì)胞HUCCT1人膽管癌細(xì)胞英文名稱:HUCCT11×1061640+10%FBS+1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

HUH-6人肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞英文名稱:HUH-61×106DMEM(含NaHCO3 1.5g / L)+10%FBS +1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

huh-7人肝癌細(xì)胞英文名稱:huh-71×106DMEM(含NaHCO3 1.5g / L)+10%FBS +1%P/S 提供STR鑒定報(bào)告

huh-7.5.1人肝癌細(xì)胞英文名稱:huh-7.5.11×106DMEM(含NaHCO3 1.5g / L)+10%FBS +1%P/S 提供HUH-7細(xì)胞STR鑒定報(bào)告

HUT-78人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞英文名稱:HUT-781×106IMDM+20%FBS+1%PS 提供STR鑒定報(bào)告

HUTU-80人十二脂腸腺癌英文名稱:HUTU-801×106MEM+10%FBS+1%P/S   提供STR鑒定報(bào)告

HUVEC人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(原代細(xì)胞永生化)英文名稱:HUVEC1×106內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)體系提供免疫熒光鑒定報(bào)告


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