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大鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞

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更新時間:2025-04-09 10:53:01瀏覽次數(shù):279

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 腦靜脈組織
大鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:BxPC-3人原位胰腺腺癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLC666-1人鼻咽癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLC666-1人鼻咽癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500MLC-33A人宮頸癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基125MLC-33A人宮頸癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基細(xì)胞培養(yǎng)基500ML

詳細(xì)介紹

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自腦靜脈組織;與腦動脈相比,,腦靜脈管壁較薄,。與身體其他部位的靜脈不同,,腦靜脈管壁中沒有靜脈瓣,,靜脈血的回流依賴高位的勢能,。腦靜脈血的回流路徑可以歸納為:大部腦靜脈血經(jīng)腦深部靜脈和腦血竇流入頸內(nèi)靜脈;小部腦靜脈血經(jīng)眼部翼狀靜脈叢,,進(jìn)入靜脈導(dǎo)血管再到頭皮,,后流入椎管中的椎旁靜脈系統(tǒng)。腦靜脈系統(tǒng)有大量交通枝靜脈叢,,即使兩側(cè)頸內(nèi)靜脈都被阻塞,,大腦靜脈血仍可經(jīng)椎靜脈和頸外靜脈系統(tǒng)完成其回流。腦靜脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,,可見細(xì)胞貼壁伸展,,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形,、不規(guī)則形,、三角形或扇形,核卵圓形,、居中,;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,,胞漿豐富,,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,,高低起伏,;細(xì)胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀,;密度高時,,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,,4-6天即可匯合,,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn)。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白 - 膠原聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,,95%;CO2,,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

腦靜脈組織

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一,、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織被消化;
   4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
   5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
   3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
   6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

英文名稱: PCNA (Nuclear Loading Control) 鉀離子通道調(diào)節(jié)蛋白KCNRG封閉多肽 大鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA試劑盒

絲裂原活化蛋白激2抗體 HLA Class II DR4封閉多肽 大鼠前列腺性磷(PAP)試劑盒ELISA

磷化谷氨受體2B抗體 KIAA1751蛋白封閉多肽 大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)ELISA檢測試劑盒

英文名稱: IRF3 叉頭蛋白N2封閉多肽 大鼠前列腺特異性抗原(PSA)elisa試劑盒

N-鈣粘附分子抗體 小核糖核蛋白SNRPC封閉多肽 大鼠卵巢癌標(biāo)志物CA125試劑盒elisa

叉頭蛋白O1抗體 DISC1 N端封閉多肽 大鼠乳腺癌標(biāo)志物-CA153檢測試劑盒elisa

英文名稱: phospho-STAT1 (Ser727) 補(bǔ)體C3dg片段封閉多肽 大鼠胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒

19號染色體開放閱讀框67抗體 神經(jīng)肽 Y(1-36)多肽 大鼠血紅氧合1(HO-1)試劑盒ELISA

PSD95結(jié)合蛋白2抗體 磷化活化復(fù)制因子2封閉多肽 大鼠磷脂A2(PL-A2)ELISA檢測試劑盒

磷化細(xì)胞分裂周期蛋白25C抗體 中心體蛋白72封閉多肽 大鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)elisa試劑盒

轉(zhuǎn)錄因子E2F-5抗體 腸道病毒71型/手足口病病毒VP4抗體封閉多肽 大鼠水通道蛋白5(AQP-5)試劑盒elisa

Ras相關(guān)區(qū)域家族1A抗體 鋅指蛋白蛋白474封閉多肽 大鼠水通道蛋白4(AQP-4)檢測試劑盒elisa

鞘脂激活蛋白原抗體 鉀離子通道蛋白2封閉多肽 大鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISA試劑盒

英文名稱: SARS-CoV-2 () Spike S1 巨噬細(xì)胞炎癥因子1α封閉多肽 大鼠水通道蛋白1(AQP-1)試劑盒ELISA

同源蛋白UNCX抗體 激活受體2A封閉多肽 大鼠水通道蛋白0(AQP-0)ELISA檢測試劑盒

乙?;M蛋白H2B抗體 重組小鼠膠質(zhì)細(xì)胞谷氨運(yùn)載蛋白2 大鼠水通道蛋白2(AQP-2)elisa試劑盒

環(huán)腺苷應(yīng)答元件結(jié)合蛋白抗體 EPB41L5蛋白封閉多肽 大鼠甲狀腺球蛋白(TG)試劑盒elisa

液泡分選蛋白4抗體 類胰δ1封閉多肽 大鼠抑制A(INH-A)檢測試劑盒elisa
大鼠腦靜脈血管平滑肌細(xì)胞KYSE-410人食道鱗狀癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:KYSE-410細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

KYSE-410人食道鱗狀癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:KYSE-410細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

Li-7人肝癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:Li-7細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

Li-7人肝癌細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:Li-7細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

LN229人膠質(zhì)瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:LN229細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML

LN229人膠質(zhì)瘤細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:LN229細(xì)胞專用培養(yǎng)基500ML

LN229+LUC人膠質(zhì)瘤熒光標(biāo)記細(xì)胞專用培養(yǎng)基英文名稱:LN229+LUC細(xì)胞專用培養(yǎng)基125ML
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

 


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