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小鼠肺大靜脈內皮細胞

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更新時間:2025-04-09 10:53:01瀏覽次數(shù):284

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 肺靜脈組織
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詳細介紹

產品屬性:

產品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠肺大靜脈內皮細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

肺靜脈組織

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自肺大靜脈組織,;肺大靜脈在用肺呼吸的脊椎動物中,,把動脈血由肺送回心臟的靜脈,是一個靜脈里流動脈血的血管,。左右1對,,共4條,兩條連接右肺,,兩條連接左肺,。肺靜脈異位引流是指肺靜脈未能直接與左心房連接,而與右心房或體靜脈系統(tǒng)連接的先天性心血管異位,。肺靜脈淤血性肺動脈高壓,,是由于肺靜脈內血液淤滯而引起的肺動脈高壓。正常情況下,,肺循環(huán)具有血壓低,、阻力小和順應性大的特點,肺動脈壓力高低取決于單位時間內肺動脈血流量和肺血管的阻力,,要維持肺循環(huán)的低壓,、低阻的狀態(tài),必須保證整個肺循環(huán)系統(tǒng)的暢通無阻,,血液順利地由肺動脈經毛細血管進入肺靜脈,,再入左心室,經過左心室收縮進入體循環(huán),,才能避免肺動脈內壓力升高,。細胞呈多邊形鵝卵石狀排列,;該細胞在維持血管內外的動態(tài)平衡、合成和分泌細胞因子和介質,、維持凝血和纖溶的動態(tài)平衡中起重要作用,。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白-膠原聯(lián)合消化法結合差速貼壁法、并通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質量檢測:

實驗室分離的經CD31免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  內皮細胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,,95%;CO2,,5%

1.png

實驗報告:

一,、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將成1mm3左右大小,;
   2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,,直至組織被消化,;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
   5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;

 

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
   2、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
   3,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細胞30min;
   4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
   5,、PBS沖洗細胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
   6,、用PBS沖洗3次,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%,;優(yōu)質胎牛血清,,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存,。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

人泌乳單克隆抗體 生長抑受體5封閉多肽 人泛結合(E2/UBCE) ELISA試劑盒

胰島單克隆抗體 真核啟動因子2β封閉多肽 人蛋白質二硫鍵異構(PDI)試劑盒 ELISA

GalNAc-T9蛋白抗體 內質網(wǎng)蛋白ERp19封閉多肽 人胱天激活的脫氧核糖核(CAD)ELISA檢測試劑盒

DUS1L蛋白抗體 乙?;D移14封閉多肽 人γ谷氨酰半胱氨合成(γ-ECS)ELISA Kit

轉錄中介因子Tif1γ抗體 10號染色體開放閱讀框140封閉多肽 人泛激活(E1/UBAE) ELISA試劑盒

真核翻譯起始因子2C3抗體 外紡錘體極樣蛋白1封閉多肽 人胃(PP)試劑盒 ELISA

叉頭蛋白F2抗體 驅動蛋白樣蛋白1/甲狀腺激受體相互作用蛋白5封閉多肽 人己糖激(HK)ELISA檢測試劑盒

干擾alpha誘導蛋白6抗體 雙特異性蛋白磷6/絲裂原活化蛋白激磷3封閉多肽 人脫氫E1(PDH E1)ELISA Kit

巨噬細胞調控相關蛋白LRRFIP1抗體 磷化gamma氨基丁B型受體1封閉多肽 人糖原合成激(GSK)ELISA試劑盒

磷甘油脫氫抗體 跨膜蛋白30A封閉多肽 人胱天9(Casp-9)試劑盒 ELISA

鈣結合蛋白1抗體 腫瘤壞死因子α誘導蛋白3相互作用蛋白2封閉多肽 人胱天3(Casp-3)ELISA檢測試劑盒

腫瘤壞死因子配體超家族成員9抗體 生長停滯特異性蛋白8封閉多肽 人中性粒細胞彈性(NE)ELISA Kit

成纖維細胞生長因子受體5抗體 雙皮層蛋白結構域蛋白DCDC2封閉多肽 人碳酐2(CA-2)ELISA試劑盒

核帽結合蛋白1抗體 脫氧胞苷激封閉多肽 人解整合樣金屬8(ADAM8)試劑盒 ELISA

嗅覺受體5AU17抗體 SMAD家族9封閉多肽 人髓過氧化物(MPO)ELISA檢測試劑盒

神經突觸2抗體 磷化核突觸蛋白α封閉多肽 人顆粒B(Gzms-B)ELISA Kit

外殼蛋白COPE單克隆抗體 F-box蛋白家族FBXO3封閉多肽 人顆粒A(Gzms-A)ELISA試劑盒

原癌基因ROS1抗體 磷化粘著斑激封閉多肽 人牛小腸堿性磷(CIAP)試劑盒 ELISA
小鼠肺大靜脈內皮細胞大鼠輸卵管上皮細胞英文名稱:大鼠輸卵管上皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠輸卵管平滑肌細胞英文名稱:大鼠輸卵管平滑肌細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠子宮內膜上皮細胞英文名稱:大鼠子宮內膜上皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠子宮平滑肌細胞英文名稱:大鼠子宮平滑肌細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠卵巢表面上皮細胞英文名稱:大鼠卵巢表面上皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠乳腺上皮細胞英文名稱:大鼠乳腺上皮細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

大鼠乳腺成纖維細胞英文名稱:大鼠乳腺成纖維細胞5×105提供免疫熒光鑒定報告

 


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