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人子宮內(nèi)膜干細(xì)胞

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更新時(shí)間:2023-04-21 15:54:34瀏覽次數(shù):259

聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 子宮組織
人子宮內(nèi)膜干細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:大鼠輸尿管上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠輸尿管平滑肌細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠膀胱上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠膀胱平滑肌細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠膀胱基質(zhì)成纖維細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人子宮內(nèi)膜干細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

子宮組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡介:

分離自子宮組織,;子宮是孕育胎兒的器官,,位于盆腔中部,膀胱與直腸之間,,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化,。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈,、尿生殖膈及會(huì)陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持,,這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時(shí),可以引起子宮脫垂,。子宮內(nèi)膜即黏膜,,由上皮(屬單層柱狀上皮,,有分泌細(xì)胞和纖毛細(xì)胞二種)和固有膜(由結(jié)締組織構(gòu)成,其內(nèi)有大量的星形細(xì)胞,,稱為基質(zhì)細(xì)胞)組成,,子宮內(nèi)膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層,功能層較厚,,約占內(nèi)膜厚度的4/5,;基底層較薄較致密,約占1/5,,功能層可剝脫,,而基底層不可剝脫。子宮內(nèi)膜構(gòu)成雌性哺乳動(dòng)物子宮壁的內(nèi)層,,位于子宮腔面,,在動(dòng)物生殖生理活動(dòng)中占有重要地位。子宮和子宮內(nèi)膜是維持雌性動(dòng)物生理功能和生育能力的重要器官,,子宮內(nèi)膜的再生修復(fù)是子宮的重要生理功能,。間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)來源于胚胎時(shí)期的中胚層組織,,具有很強(qiáng)的自我復(fù)制和多向分化潛能,,具有向脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞,、軟骨細(xì)胞及肌細(xì)胞等多種終末細(xì)胞定向分化的能力,,運(yùn)用 MSCs來修復(fù)軟骨損傷具有很好的應(yīng)用前景,目前已能夠從骨髓,、脂肪,、滑膜、骨骼,、肌肉等組織以及羊水,、臍帶、臍帶血中分離和制備間充質(zhì)干細(xì)胞,。體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜干細(xì)胞細(xì)胞對于研究其生理功能,、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

5.方法簡介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原消化法,、低密度稀釋克隆制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測:

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,,95%;CO2,,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一,、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
   3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織被消化;
   4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
   5,、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;

 

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
   2、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
   3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
   4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
   6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%;二氧化碳,5%,。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

DNA拓?fù)洚悩?gòu)3-β1抗體 D型-天冬氨氧化封閉多肽 

BLAME抗體 富含亮氨重復(fù)蛋白3封閉多肽 

ZDHHC23蛋白抗體 12號(hào)染色體開放閱讀框29封閉多肽 

尿轉(zhuǎn)運(yùn)型糖蛋白A2抗體 磷酯Cγ2封閉多肽 

抗體 RNA結(jié)合蛋白14封閉多肽 

尿苷二磷葡萄糖醛轉(zhuǎn)移A1抗體 FAM19A3蛋白封閉多肽 

單羧轉(zhuǎn)運(yùn)蛋4抗體 3號(hào)染色體開放閱讀框20封閉多肽 

OTOL1抗體 環(huán)指蛋白70封閉多肽 

HAUS8蛋白抗體 RAPH1蛋白封閉多肽 

鋅指MIZ結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體 醋奧曲肽 

磷化核糖體S6激RSK2抗體 磷化HER2受體轉(zhuǎn)換蛋白封閉多肽 

端粒保護(hù)蛋白1抗體 Caspase 激活的脫氧核糖核封閉多肽 

纖維蛋白溶原抗體 20號(hào)染色體開放閱讀框74封閉多肽 

G蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)節(jié)因子2抗體 促胃泌釋放肽封閉多肽 

磷化谷氨受體2B抗體 磷化細(xì)胞核因子封閉多肽 

CD20樣蛋白2抗體 肝癌新基因3蛋白封閉多肽 

SIGLEC8抗體 β葡萄糖苷3封閉多肽 

穿孔抗體 早老蛋白-1封閉多肽 
人子宮內(nèi)膜干細(xì)胞原代肌腱細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代肌腱細(xì)胞培養(yǎng)體系500mL

原代淋巴細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代淋巴細(xì)胞培養(yǎng)體系100mL

原代淋巴細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代淋巴細(xì)胞培養(yǎng)體系500mL

原代卵泡膜細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代卵泡膜細(xì)胞培養(yǎng)體系100mL

原代卵泡膜細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代卵泡膜細(xì)胞培養(yǎng)體系500mL

原代支持細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代支持細(xì)胞培養(yǎng)體系100mL

原代支持細(xì)胞培養(yǎng)體系英文名稱:原代支持細(xì)胞培養(yǎng)體系500mL

 


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