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人角膜內(nèi)皮細胞

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更新時間:2025-04-09 10:53:01瀏覽次數(shù):265

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 眼角膜組織
人角膜內(nèi)皮細胞的相關產(chǎn)品:HS683人腦膠質(zhì)瘤細胞人細胞系1×106HS746T人胃癌細胞人細胞系1×106HSF(SV40)人真皮成纖維細胞(原代細胞永生化)人細胞系1×106HT-1080人纖維肉瘤細胞人細胞系1×106HT-1376人膀胱癌細胞人細胞系1×106

詳細介紹

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自眼角膜組織;角膜位于眼球前壁的一層透明膜,,約占纖維膜的前1/6,,從后面看角膜呈正圓形,從前面看為橫橢圓形,。角膜厚度各部分不盡相同,,中央部薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢,,如有外物接觸角膜,,眼瞼便會不由自主地合上以保護眼睛。為了保持透明,角膜并沒有血管,,透過外界空氣,、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層,,由前向后依次為:上皮細胞層,、前彈力層、基質(zhì)層,、后彈力層,、內(nèi)皮細胞層。角膜的高度透明性和光學性是正常發(fā)揮生理功能的必要條件之一,,而角膜內(nèi)皮細胞(CEC)在維持角膜的正常生理功能方面起重要作用,。角膜內(nèi)皮細胞是角膜內(nèi)層的單層細胞,構成了后彈力層和房水之間的物理屏障,,通過離子“泵"功能調(diào)節(jié)角膜中離子濃度和水分,,維持角膜的半脫水狀態(tài),保證角膜的正常厚度和透明度,。一旦角膜內(nèi)皮細胞功能出現(xiàn)紊亂,,常導致角膜水腫而使角膜部分甚至失去透明性。角膜內(nèi)皮細胞主要功能有:①角膜是的無血管的組織,,具有透明的特性和合成許多蛋白的功能,;②角膜內(nèi)皮細胞對角膜透明性有重要作用;③角膜內(nèi)皮細胞通過Na+-K+-ATP活性,,維持角膜和房水內(nèi)Na+梯度,,防止水分滲入角膜內(nèi),維持角膜實質(zhì)層相對脫水狀態(tài),,維持透明性,。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用混合膠原消化結合內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質(zhì)量檢測:

實驗室分離的經(jīng)NSE(神經(jīng)元特異性烯醇化)免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS,、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  內(nèi)皮細胞樣

傳代特性  可傳2-3代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,95%,;CO2,,5%

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

人角膜內(nèi)皮細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

眼角膜組織

1.png

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

二,、免疫熒光鑒定:


   1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將成1mm3左右大小,;
   2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
   3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復此步驟2-3次,,直至組織被消化,;
   4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;

 

1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
   2,、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
   3、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min,;
   4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;
   5,、PBS沖洗細胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
   6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

微管相關蛋白4抗體 接觸蛋白相關蛋白3封閉多肽 人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體ELISA試劑盒

中心體蛋白1抗體 陽離子通道精子相關蛋白4封閉多肽 人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)試劑盒ELISA

乙?;M蛋白H4抗體 Ras相關雌激調(diào)節(jié)生長抑制蛋白封閉多肽 人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)ELISA檢測試劑盒

英文名稱: Cyclin E1 重組人軟骨蛋白聚糖 人抗硬皮病抗體70(SCL70/topoⅠ)elisa試劑盒

鈣通道電壓依賴性β1蛋白抗體 His Tag多肽 人抗SS-B/La抗體試劑盒elisa

血管生成受體2抗體 核過渡蛋白2封閉多肽 人落葉型天皰瘡抗體(PF)檢測試劑盒elisa

半胱氨8抗體 轉胺4封閉多肽 人β2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1AbIgA)ELISA試劑盒

睪丸蛋白聚糖2抗體 磷化視網(wǎng)膜母細胞瘤相關蛋白1封閉多肽 人β2糖蛋白1抗體IgM(β2-GP1AbIgM)試劑盒ELISA

細胞凋亡誘導蛋白NALP3抗體 甲狀腺激受體相互作用15封閉多肽 人β2糖蛋白1抗體IgG(β2-GP1AbIgG)ELISA檢測試劑盒

英文名稱: URI1 乳腺癌抑癌蛋白封閉多肽 人抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)elisa試劑盒

前列腺E2受體2抗體 鈣依賴分泌激活蛋白1封閉多肽 人抗心磷脂抗體IgM(ACA-IgM)試劑盒elisa

趨化因子受體1抗體 肝細胞生長因子受體封閉多肽 人抗心磷脂抗體IgG(ACA-IgG)檢測試劑盒elisa

雄激結合蛋白抗體 雞IgY 人抗高爾基體抗體(AGAA)ELISA試劑盒

跨膜受體蛋白Notch-1抗體 延伸因子4封閉多肽 人沙眼衣原體(CT)試劑盒ELISA

溶質(zhì)載體轉運蛋白家族39成員A13抗體 補體C4b-A蛋白封閉多肽 人S100鈣結合蛋白A9/鈣粒蛋白B(S100A9)ELISA檢測試劑盒

硫軟骨2抗體 天冬氨-胱氨特異性家族1 P20封閉多肽 人S100鈣結合蛋白A8/鈣粒蛋白A(S100A8)elisa試劑盒

C型凝集結構域家族9成員A抗體 磷化細胞核因子封閉多肽 人前病毒整合位點1(Pim1)試劑盒elisa

腎小球裂孔膜蛋白PDCN抗體 跨膜蛋白111封閉多肽 人綠膿桿菌外毒A(PEA)檢測試劑盒elisa
人角膜內(nèi)皮細胞LX-2人肝星形細胞英文名稱:LX-21×1061640+10%FBS+1%P/S 提供STR鑒定報告

LX-2+GFP人肝星形細胞+GFP英文名稱:LX-2+GFP1×1061640+10%FBS+1%P/S 提供LX-2鑒定報告

Mahlavu 人肝癌細胞英文名稱:Mahlavu 1×106DMEM+10%FBS+1%P/S 提供STR鑒定報告

MCF-10A人乳腺上皮細胞英文名稱:MCF-10A1×106MEGM kit(五管因子)+100ng/ml霍亂毒(終止消化用刀豆)+1%P/S 提供STR鑒定報告

MCF-7人乳腺癌細胞英文名稱:MCF-71×106MEM+10%FBS+0.01mg/mL胰島+1%P/S 提供STR鑒定報告

MCF-7/Adr人乳腺癌阿霉耐藥細胞英文名稱:MCF-7/Adr1×1061640+10%FBS+1%PS+500ng/mL ADR提供STR鑒定報告

MCF-7+luc人乳腺癌細胞熒光標記英文名稱:MCF-7+luc1×106MEM+10%FBS+0.01mg/mL胰島+1%P/S 提供MCF-7細胞STR鑒定報告
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻,。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

 


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