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小鼠視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來(lái)源 視網(wǎng)膜組織
小鼠視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:羊骨骼肌細(xì)胞原代細(xì)胞5×105羊骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞原代細(xì)胞5×105牛骨骼肌細(xì)胞原代細(xì)胞5×105牛脂肪干細(xì)胞原代細(xì)胞5×105牛骨骼肌微血管內(nèi)皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng)

規(guī)格

組織來(lái)源

小鼠視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

視網(wǎng)膜組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自視網(wǎng)膜組織,;視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層,,是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺(jué)層組成,,兩層間在病理情況下可分開(kāi),,稱(chēng)為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連,,由色素上皮細(xì)胞組成,,它們具有支持和營(yíng)養(yǎng)光感受器細(xì)胞、遮光,、散熱以及再生和修復(fù)等作用,。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層,由外向內(nèi)分別為:色素上皮層,、視錐,、視桿細(xì)胞層、外界膜,、外顆粒層,、外叢狀層、內(nèi)顆粒層,、內(nèi)叢狀層,、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、神經(jīng)纖維層,、內(nèi)界膜,。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜,有感光作用,;后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)乳頭,。視網(wǎng)膜上的感覺(jué)層是由三個(gè)神經(jīng)元組成。第一神經(jīng)元是視細(xì)胞層,,專(zhuān)司感光,,它包括錐細(xì)胞和桿細(xì)胞。視桿細(xì)胞主要在離中心凹較遠(yuǎn)的視網(wǎng)膜上,,而視錐細(xì)胞則在中心凹處多,。第二層叫雙節(jié)細(xì)胞,約有10到數(shù)百個(gè)視細(xì)胞通過(guò)雙節(jié)細(xì)胞與一個(gè)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞相聯(lián)系,,負(fù)責(zé)聯(lián)絡(luò)作用。第三層叫節(jié)細(xì)胞層,,專(zhuān)管傳導(dǎo),。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu),,它貼于眼球的后壁部,傳遞來(lái)自視網(wǎng)膜感受器沖動(dòng)的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面,,經(jīng)由視神經(jīng)到達(dá)出口,。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的,在黃斑區(qū),,其分辨能力強(qiáng),。視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞作為視網(wǎng)膜中的主要膠質(zhì)細(xì)胞,大約占視網(wǎng)膜膠質(zhì)細(xì)胞的90%,,因而在視網(wǎng)膜疾病中起著何種作用也受到越來(lái)越多的關(guān)注,。在超微結(jié)構(gòu)水平上,Muller細(xì)胞的胞質(zhì)似乎比臨近的其他細(xì)胞更高的電子密度,,更發(fā)達(dá)的內(nèi)質(zhì)網(wǎng),,細(xì)胞核是典型的卵圓形或多角形。但在不同物種中或同一物種中的不同部位,,Muller細(xì)胞形態(tài)也會(huì)有所差異的,。視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞是一種特化的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞,不僅具有維持視網(wǎng)膜的正常結(jié)構(gòu)和功能的作用,,并調(diào)制視網(wǎng)膜神經(jīng)元活動(dòng),,還能參與多種病理過(guò)程,尤其是眼底增殖性病變,,如增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變,、增生性糖尿病視網(wǎng)膜病變等,體外培養(yǎng)Muller細(xì)胞是研究這些增殖性病變途徑之一,。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原消化法和胰dan白反復(fù)消化法制備而來(lái),,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  梭形、多角形

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,,95%,;CO2,,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二,、免疫熒光鑒定:


   1,、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將成1mm3左右大小,;
   2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化,;
   4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;

 

1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
   2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
   4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜,;
   5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
   6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

磷化補(bǔ)體成分5受體1抗體 Ras相關(guān)蛋白R(shí)AB-12封閉多肽 

OTOP3蛋白抗體 高爾基復(fù)合體CFR1封閉多肽 

蛋白精氨甲基轉(zhuǎn)移2抗體 磷化蛋白質(zhì)酪氨激JAK-1封閉多肽 

肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白Girdin抗體 γ干擾誘導(dǎo)單核細(xì)胞因子封閉多肽 

TMEM157蛋白抗體 細(xì)胞凋亡敏感性基因封閉多肽 

早老γ分泌抗體 FAM107B蛋白封閉多肽 

Kelch樣蛋白33抗體 膜相關(guān)環(huán)指蛋白11封閉多肽 

英文名稱(chēng): Human SAA1 血小板生成受體封閉多肽 

EXOC3L2蛋白/Hepatitis B Virus X antigen抗體 FAM83E蛋白封閉多肽 

英文名稱(chēng): EXPB-2 ORC6蛋白封閉多肽 

氨基糖苷類(lèi)磷結(jié)構(gòu)域蛋白抗體 ESD蛋白封閉多肽 

鋅指蛋白707抗體 胞吞調(diào)控蛋白Eps15封閉多肽 

ATP依賴(lài)的解螺旋抗體 8號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框86封閉多肽 

跨膜絲氨11D抗體 陽(yáng)離子轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)樣蛋白2封閉多肽 

纖維束1抗體 干擾調(diào)節(jié)因子4結(jié)合蛋白封閉多肽 

跨膜蛋白18抗體 甲狀腺相關(guān)眼病自身抗原封閉多肽 

醛固酮還原家族1成員C3抗體 γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽6封閉多肽 

IQCA1蛋白抗體 磷化原癌基因c-Jun封閉多肽 
小鼠視網(wǎng)膜Muller細(xì)胞T-47D細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基125mL×4T-47D細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持T-47D細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含T-47D細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,,無(wú)需添加任何成分,可直接用于T-47D細(xì)胞的體外培養(yǎng),。

A-431細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基125mL×4A-431細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持A-431細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含A-431細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,,無(wú)需添加任何成分,可直接用于A-431細(xì)胞的體外培養(yǎng),。

CW-2細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基125mL×4CW-2細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持CW-2細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含CW-2細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,,無(wú)需添加任何成分,可直接用于CW-2細(xì)胞的體外培養(yǎng),。

小鼠口腔上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL小鼠口腔上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持小鼠口腔上皮細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含小鼠口腔上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,,無(wú)需添加任何成分,,可直接用于小鼠口腔上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

大鼠腦成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL大鼠腦成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,,本產(chǎn)品可保持大鼠腦成纖維細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài)。本產(chǎn)品中已包含大鼠腦成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,,無(wú)需添加任何成分,,可直接用于大鼠腦成纖維細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

DMEM高糖 (含L-丙氨酰-L-,,不含酚紅)500mL-

雞小腸黏膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基100mL雞小腸黏膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)基由技術(shù)團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,,經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試,本產(chǎn)品可保持雞小腸黏膜上皮細(xì)胞佳的生長(zhǎng)狀態(tài),。本產(chǎn)品中已包含雞小腸黏膜上皮細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分,無(wú)需添加任何成分,,可直接用于雞小腸黏膜上皮細(xì)胞的體外培養(yǎng),。


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