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大鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 子宮組織
大鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:大鼠垂體細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠胸腺上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠胸腺基質(zhì)細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠頜下腺上皮細(xì)胞原代細(xì)胞5×105大鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞原代細(xì)胞5×105

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

子宮組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自子宮組織,;子宮是孕育胎兒的器官,位于盆腔中部,,膀胱與直腸之間,,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶,、盆膈,、尿生殖膈及會(huì)陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持,這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時(shí),,可以引起子宮脫垂,。子宮內(nèi)膜即黏膜,由上皮(屬單層柱狀上皮,,有分泌細(xì)胞和纖毛細(xì)胞二種)和固有膜(由結(jié)締組織構(gòu)成,,其內(nèi)有大量的星形細(xì)胞,稱為基質(zhì)細(xì)胞)組成,,子宮內(nèi)膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層,,功能層較厚,約占內(nèi)膜厚度的4/5,;基底層較薄較致密,,約占1/5,功能層可剝脫,,而基底層不可剝脫,。子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞主要功能:①子宮內(nèi)膜亦稱子宮黏膜,是指構(gòu)成哺乳類子宮內(nèi)壁的一層,;②子宮內(nèi)膜對(duì)動(dòng)情素和孕激素都起反應(yīng),,因此可隨著性周期(發(fā)情周期、月經(jīng)周期)發(fā)生顯著的變化,。子宮內(nèi)膜與胚胎附植密切相關(guān),,在生殖生理的研究中占重要地位。在胚胎與母體“對(duì)話"的過程中,,子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞充當(dāng)了極其重要的角色,。子宮內(nèi)膜構(gòu)成雌性哺乳動(dòng)物子宮壁的內(nèi)層,,位于子宮腔面,在動(dòng)物生殖生理活動(dòng)中占有重要地位,。子宮和子宮內(nèi)膜是維持雌性動(dòng)物生理功能和生育能力的重要器官,,子宮內(nèi)膜的再生修復(fù)是子宮的重要生理功能,。體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞對(duì)于研究其生理功能,、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用膠原消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  成纖維細(xì)胞樣

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,,95%;CO2,,5%

1.png

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一,、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將成1mm3左右大?。?/span>
   2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
   3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化,;
   4,、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;

 

1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min,;
   2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在室溫條件下,,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
   4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜,;
   5、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
   6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,,90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

亞甲基四氫葉脫氫抗體 5-甲酰環(huán)連接封閉多肽 

線粒體肌激CKMT抗體 磷化T淋巴細(xì)胞連接蛋白封閉多肽 

2號(hào)染色體開放閱讀框57抗體 胰島樣生長(zhǎng)因子1封閉多肽 

KLF15蛋白抗體 足細(xì)胞表達(dá)蛋白/轉(zhuǎn)錄因子21封閉多肽 

英文名稱: GST tag 植烷氧化封閉多肽 

二甲基組蛋白H2B K5抗體 肝癌上調(diào)蛋白封閉多肽 

溶質(zhì)載體家族10成員5抗體 錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白11封閉多肽 

原肌球蛋白調(diào)節(jié)蛋白3抗體 磷化膠質(zhì)纖維性蛋白封閉多肽 

肝細(xì)胞核因子3抗體 重組人載脂蛋白E 

四分子交聯(lián)體5抗體 免疫球蛋白A誘導(dǎo)同源蛋白封閉多肽 

人微管相關(guān)蛋白Tau-4單克隆抗體 軸周蛋白PRX封閉多肽 

ATP依賴RNA解旋DDX39抗體 泛硫酯L3封閉多肽 

磷化異染色質(zhì)蛋白1抗體(果蠅) 重組小鼠分泌蛋白 

6號(hào)染色體開放閱讀框223抗體 磷化鈉鉀ATP蛋白a1封閉多肽 

鋅指蛋白879抗體 DHX33蛋白封閉多肽 

細(xì)胞粘合(固生蛋白)抗體 垂體瘤細(xì)胞凋亡封閉多肽 

次要組織相容性抗原HA 1抗體 神經(jīng)細(xì)胞正五聚蛋白受體封閉多肽 

蛋白激MST1/2抗體 CRB1蛋白封閉多肽 
大鼠子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞MEM(無酚紅)基礎(chǔ)培養(yǎng)基英文名稱:MEM(無酚紅)500mL

角質(zhì)細(xì)胞無血清培養(yǎng)基英文名稱:D-KSFM500mL+1mL

Medium M3基礎(chǔ)培養(yǎng)基英文名稱:Medium M3500mL

NeuroGro 神經(jīng)元培養(yǎng)基英文名稱:NeuroGro500mL

CHO GROW CD2 培養(yǎng)基英文名稱:CHO GROW CD2 500mL

MEGM kit   CC-3150(A+B)英文名稱:Lonza/Clonetics500mL+4mL

BEGM kit   CC-3170(A+B)英文名稱:Lonza/Clonetics500mL+4.2mL

 


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