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小鼠冠狀動脈平滑肌細胞

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更新時間:2025-04-09 10:53:01瀏覽次數:258

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產品簡介

供貨周期 現貨 規(guī)格 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實驗 組織來源 冠狀動脈
小鼠冠狀動脈平滑肌細胞的相關產品:大鼠胸腺成纖維細胞原代細胞5×105大鼠睪丸支持細胞原代細胞5×105大鼠海綿體平滑肌細胞原代細胞5×105大鼠卵巢顆粒細胞原代細胞5×105大鼠卵巢間質細胞原代細胞5×105

詳細介紹

商品詳細介紹:

4.細胞簡介:

分離自冠狀動脈組織;冠狀動脈是供給心臟血液的動脈,,起于主動脈根部,,分左右兩支,,行于心臟表面。采用Schlesinger等的分類原則,,將冠狀動脈的分布分為三型:右優(yōu)勢型,、均衡型、左優(yōu)勢型,。左右冠狀動脈是升主動脈的第一對分支,。左冠狀動脈為一短干,發(fā)自左主動脈竇,,經肺動脈起始部和左心耳之間,,沿冠狀溝向左前方行后,立即分為前室間支和旋支,。前室間支沿前室間溝下行,,旋支繞過心尖切跡至心的膈面與右冠狀動脈的后室間支相吻合。它是構成冠狀動脈壁的主要細胞成分,,細胞膜上分布著多種離子通道,,如電壓依賴性Na+通道、多種Ca2+通道和K+通道,;它們參與了靜息電位的維持與細胞膜電位的復極化,、超極化,調節(jié)血管平滑肌的收縮及舒張功能,,此外動脈粥樣硬化的發(fā)展也涉及冠狀動脈平滑肌細胞增殖,、炎癥及凋亡等。因此,,原代分離培養(yǎng)的冠狀動脈平滑肌細胞,,對研究生理和病理狀態(tài)下離子通道及血管張力變化機制具有非常重要的作用。冠狀動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,,可見細胞貼壁伸展,,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形,、不規(guī)則形,、三角形或扇形,,核卵圓形、居中,;2周后細胞匯合,,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,,有分枝狀突起,,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏,;細胞密度低時,,常交織成網狀;密度高時,,則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,,并保持上述形態(tài)學特征和生長特點,。

5.方法簡介:

實驗室分離的采用胰dan白 - 膠原聯合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質量檢測:

實驗室分離的經α-SMA免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長特性  貼壁

細胞形態(tài)  成纖維細胞樣

傳代特性  可傳3代左右

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,,95%;CO2,,5%

產品屬性:

產品名稱

規(guī)格

組織來源

小鼠冠狀動脈平滑肌細胞

5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

冠狀動脈

1.png

實驗報告:

一,、分離與培養(yǎng):

二、免疫熒光鑒定:


   1,、無菌條件下,,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將成1mm3左右大??;
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),,混懸10s,,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,,自然沉淀并收集上清,,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
   3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,,混懸10s,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,,重復此步驟2-3次,直至組織被消化,;
   4,、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,,棄去上清,,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
   5,、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng),;

 

1,、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,,用溫育的PBS沖洗細胞2次,,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min,;
   2,、PBS沖洗細胞2次,每次10min,,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min;
   3、PBS沖洗細胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min,;
   4,、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜,;
   5,、PBS沖洗細胞3次,每次10min,,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h;
   6,、用PBS沖洗3次,,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照,。

英文名稱: GAB1 重組小鼠糖蛋白gp330蛋白 

MICAL3蛋白抗體 RAB36蛋白封閉多肽 

英文名稱: TAK1/MAP3K7 蛋白激B3封閉多肽 

ADCYAP1單克隆抗體 對接蛋白3封閉多肽 

G蛋白偶聯受體GPR180蛋白抗體 白三烯B4受體1封閉多肽 

DNA聚合Κ抗體 殺傷細胞凝集樣受體F1封閉多肽 

CYP1A2單克隆抗體 Ran結合蛋白MOG1封閉多肽 

血管內皮細胞粘附分子(CD106)抗體 重組人胰島蛋白 

骨形態(tài)發(fā)生蛋白8b抗體 高遷移率族結合蛋白N4封閉多肽 

眼部白化病相關蛋白OA1/蛋白偶聯受體143抗體 重組豬藍耳病病毒N蛋白 

DNAJC22蛋白抗體 E3泛蛋白連接HECW2封閉多肽 

PSF2蛋白抗體 絲氨/蘇氨蛋白激蛋白封閉多肽 

英文名稱: PDHA1 L12R1蛋白封閉多肽 

γ1氨基丁受體α5/GABRα5抗體 信號轉導和轉錄激活因子3封閉多肽 

PRTG蛋白抗體 Myc Tag多肽 

英文名稱: MMP9 細胞色C氧化蛋白6B2封閉多肽 

英文名稱: Oxytetracycline 促黑細胞激α封閉多肽 

整合αX單克隆抗體 膜相關環(huán)指蛋白6封閉多肽 
小鼠冠狀動脈平滑肌細胞無外泌體血清英文名稱:無外泌體血清50mL

雞血清英文名稱:雞血清100mL

氟英文名稱:5-FU10mg

氟英文名稱:5-FU1g

英文名稱:Taxol10mg

吉西他濱英文名稱:GEM10mg

鹽阿霉英文名稱:ADR25mg
操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基,,90%;優(yōu)質胎牛血清,,10%,。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%,;二氧化碳,,5%。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%,。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,,現用現配,液氮儲存,。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細胞密度,。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

 


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