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大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞

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更新時(shí)間:2025-04-09 10:53:01瀏覽次數(shù):283

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 組織來源 視網(wǎng)膜組織
大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞的相關(guān)產(chǎn)品:人睪丸支持細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶E.G7-OVA (小鼠T淋巴瘤細(xì)胞)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶MDA-MB-231 (人乳腺癌細(xì)胞) (DMEM) (STR鑒定正確)1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶人主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶Hi-five (BTI-TN-5B1-4) (昆蟲細(xì)胞)1×10?cells/T25培養(yǎng)

詳細(xì)介紹

1.png

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

組織來源

大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

視網(wǎng)膜組織

商品詳細(xì)介紹:

4.細(xì)胞簡(jiǎn)介:

分離自視網(wǎng)膜組織,;視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層,,是一層透明的薄膜,。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成,,兩層間在病理情況下可分開,,稱為視網(wǎng)膜脫離,。色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連,,由色素上皮細(xì)胞組成,它們具有支持和營(yíng)養(yǎng)光感受器細(xì)胞,、遮光,、散熱以及再生和修復(fù)等作用,。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層,由外向內(nèi)分別為:色素上皮層,、視錐,、視桿細(xì)胞層、外界膜,、外顆粒層,、外叢狀層、內(nèi)顆粒層,、內(nèi)叢狀層,、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、神經(jīng)纖維層,、內(nèi)界膜,。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜,有感光作用,;后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)乳頭,。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個(gè)神經(jīng)元組成。第一神經(jīng)元是視細(xì)胞層,,專司感光,,它包括錐細(xì)胞和桿細(xì)胞。視桿細(xì)胞主要在離中心凹較遠(yuǎn)的視網(wǎng)膜上,,而視錐細(xì)胞則在中心凹處多,。第二層叫雙節(jié)細(xì)胞,約有10到數(shù)百個(gè)視細(xì)胞通過雙節(jié)細(xì)胞與一個(gè)神經(jīng)節(jié)細(xì)胞相聯(lián)系,,負(fù)責(zé)聯(lián)絡(luò)作用,。第三層叫節(jié)細(xì)胞層,專管傳導(dǎo),。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復(fù)雜的結(jié)構(gòu),,它貼于眼球的后壁部,傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動(dòng)的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面,,經(jīng)由視神經(jīng)到達(dá)出口,。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的,在黃斑區(qū),,其分辨能力強(qiáng),。視網(wǎng)膜色素上皮(RPE)位于脈絡(luò)膜和光感受器細(xì)胞外節(jié)之間,是視網(wǎng)膜下腔和脈絡(luò)膜血管之間的離子,、水,、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和代謝終產(chǎn)物轉(zhuǎn)運(yùn)通道;主要是由單層色素上皮細(xì)胞所構(gòu)成,,排列十分規(guī)則,。視網(wǎng)膜色素上皮參與循環(huán),,吞噬脫落的光感受器細(xì)胞外節(jié)以維持光感受器細(xì)胞興奮性,并分泌多種生長(zhǎng)因子,,幫助維持脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞和光感受器細(xì)胞的結(jié)構(gòu)完整性,。細(xì)胞呈多角形,細(xì)胞分為三部分,,即頂部,、體部和基底部。視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞無再生能力,,細(xì)胞死亡后不被替換,而是鄰近的細(xì)胞向側(cè)面滑動(dòng),,以填補(bǔ)死亡細(xì)胞遺留下來的空間,。視網(wǎng)膜色素上皮位于脈絡(luò)膜和光感受器細(xì)胞外節(jié)之間,是視網(wǎng)膜下腔和脈絡(luò)膜血管之間的離子,、水,、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和代謝終產(chǎn)物轉(zhuǎn)運(yùn)通道。視網(wǎng)膜色素上皮參與循環(huán),,吞噬脫落的光感受器細(xì)胞外節(jié)以維持光感受器細(xì)胞興奮性,,并分泌多種生長(zhǎng)因子,幫助維持脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞和光感受器細(xì)胞的結(jié)構(gòu)完整性,。

5.方法簡(jiǎn)介:

實(shí)驗(yàn)室分離的采用胰dan白-膠原混合消化法結(jié)合差速貼壁法,,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

6.質(zhì)量檢測(cè):

實(shí)驗(yàn)室分離的經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基  FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率    2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性  貼壁

細(xì)胞形態(tài)  上皮細(xì)胞樣

傳代特性  可傳1-2代

消化液  0.25%胰dan白

培養(yǎng)條件  氣相:空氣,,95%,;CO2,5%

操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基,,90%,;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,,95%,;二氧化碳,5%,。 溫度:37℃,,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,,10%DMSO,,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存,。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,,常溫條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

二,、免疫熒光鑒定:


   1,、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,,然后用PBS將此組織塊清洗2次,,最后將成1mm3左右大小,;
   2,、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,,置37℃條件下消化10min,,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置,;
   3,、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,,置37℃消化10 min后,,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,,直至組織被消化,;
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,,1200r/min 離心10min,,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
   5、差速貼壁1h后,,吸出培養(yǎng)基,,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

 

1,、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
   2,、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,然后在4℃條件下,,用0.1%Triton X-100透膜15min,;
   3、PBS沖洗細(xì)胞2次,,每次10min,,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min,;
   4,、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;
   5,、PBS沖洗細(xì)胞3次,,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗,, 37℃條件下放置1h,;
   6、用PBS沖洗3次,,每次10min,,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

HLA-DR抗體 內(nèi)臟異位相關(guān)蛋白/鋅指蛋白203封閉多肽 

磷化細(xì)胞核因子/k基因結(jié)合核因子p100抗體 GTPIMAP家族成員1封閉多肽 

酪氨蛋白激B3抗體 叉頭蛋白F2封閉多肽 

γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽2重鏈抗體 磷化促凋亡Bik蛋白封閉多肽 

鋅指蛋白321B抗體 精子成熟相關(guān)蛋白BOULE封閉多肽 

組織相容性復(fù)合體蛋白2反式激活因子抗體 胞漿蘋果1封閉多肽 

整合β6/Integrin β6抗體 染色體相關(guān)蛋白2封閉多肽 

線粒體鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體 絲氨/蘇氨蛋白激Nek11封閉多肽 

成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子17抗體 FITM2蛋白封閉多肽 

DZANK1蛋白抗體 Kelch樣蛋白17封閉多肽 

G蛋白偶聯(lián)受體激6抗體 波形蛋白封閉多肽 

BEND4蛋白抗體 4號(hào)染色體開放閱讀框3封閉多肽 

鋅指脂蛋白-1b抗體 COPS9蛋白封閉多肽 

羥磺基轉(zhuǎn)移2抗體 異質(zhì)核糖核蛋白H封閉多肽 

血小板反應(yīng)蛋白2/敏感蛋白2抗體 KIAA0701蛋白封閉多肽 

磷化蛋白酪氨激JAK-3抗體 磷化γ氨基丁γ2受體封閉多肽 

自主生長(zhǎng)因子GFI1抗體 視網(wǎng)膜色上皮細(xì)胞特異性蛋白65封閉多肽 

嗅覺受體5L2抗體 神經(jīng)突觸13封閉多肽 
大鼠視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞人卵巢成纖維細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

人臍帶血造血干細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

人子宮平滑肌細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

小鼠前列腺上皮細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠牙齦成纖維細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

大鼠真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

HTR-8/Svneo (人絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞) RPMI-1640+5% FBS+1% P/S1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶


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